花金龜科(cetoniidae)部分種類基因序列及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系研究

花金龜科(cetoniidae)部分種類基因序列及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系研究

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1、沈陽大學(xué)碩士學(xué)位論文本試驗研究中使用核酸測序法測定了花金龜科43條核酸序列,分別為:褐繡花金龜(AnthracophorarusticolaBurmeister)、白星花金龜(ProtaetiabrevitarsisLewis)、多紋星花金龜(ProtaetiafamelicaJanson)藍(lán)星花金龜(ProtaetiaimpavidaJanson)的Cytb、COI、16SrRNA、28SrRNA、COII基因序列,華美花金龜(CetoniamagnificaBallion)、暗綠花金龜(Cetoniaviridiop

2、acaMotschulsky)、黃粉鹿花金龜(DicranocephaluswallichibowringiPascoe)的Cytb、COI、28SrRNA、COII基因序列,疏紋星花金龜(ProtaetiacathaicaBates)的Cytb、COI、28SrRNA基因序列,雙斑短突花金龜(GlycuphananicobaricaJanson)Cytb、COI、16SrRNA、28SrRNA基因序列,小青花金龜(OxycetoniajucundaFaldermarm)Cytb、16SrRNA、28SrRNA基因序列,

3、自NCBI中查詢下載一條Chilolobaacuta的28SrRNA基因序列。應(yīng)用DNAmanl00軟件及ClustalX2.0軟件進(jìn)行拼接、校正及多重同源性比較,MEGA4.0軟件對序列組成和遺傳距離進(jìn)行分析,并采用Kimura.2參數(shù)模型、NJ法和MP法重建系統(tǒng)發(fā)育樹。得到下述結(jié)論:(1)花金龜科11個種Cytb、COI、16SrRNA、28SrRNA、COII基因序列長度分別為350bp、537bp、703bp、600bp、246bp,保守位點(diǎn)分別為226個、372個、572個、577個、156個,其中均為第二位點(diǎn)

4、居高;變異位點(diǎn)依次為124個、165個、131個、23個、90個,第三位點(diǎn)的變異率最高。Cytb基因序列中A、T、G、C的平均含量分別為36.8%、33.2%、19%、11%,其中A_卜T的平均含量為70.O%,G+C的平均含量為30.0%;COI基因序列中A、T、G、C的平均含量分別為30.3%、35.5%、15.9%、18.2%,其中A+T的平均含量為75.8%,G+C的平均含量為34.2%;16SrRNA基因序列中A、T、G、C的平均含量分別為39.9%、34.1%、8.7%、17.2%,其中A+T的平均含量為74

5、%,G+C的平均含量為25.9%;COII基因序列中A、T、G、C的平均含量分別為34.2%、32.8%、17.8%、15.2%,其中A+T的平均含量為67%,G+C的平均含量為33%。28SrRNA基因序列中A、T、G、C的平均含量分別為25.4%、20.8%、沈陽大學(xué)碩士學(xué)位論文30.4%、23.4%,其中A+T的平均含量為46.2%,G屺的平均含量為53.7%。表現(xiàn)出明顯的線粒體及核的堿基偏好性。(2)花金龜科11個種Cytb、COI、16SrRNA、28SrRNA、COII的堿基轉(zhuǎn)換/顛換平均值(It值)分別為1

6、.1、1.2、1.3、2.5、1.1。其中,Cytb基因序列的疏紋星花金龜與多紋星花金龜?shù)腞值為2.3745,16SrRNA基因的白星花金龜與多紋星花金龜R值為2.5179,COII基因的藍(lán)星花金龜與多紋星花金龜R值為1.5731,均說明屬內(nèi)不同種間的R較大,親緣關(guān)系較近,這與形態(tài)學(xué)分類結(jié)果基本相吻合。(3)花金龜科11個種Cytb、COI、16SrRNA、28SrRNA、COII基因的遺傳距離分別為0.0097.0.4103、0.0038.0.2340、0.0104.0.1571、0.0104.0.0223、0.009

7、7.0.2477。其中最小值均發(fā)生在星花金龜屬內(nèi),尤以疏紋星花金龜、白星花金龜之間與多紋星花金龜之間最小,說明同屬不同種親緣關(guān)系較近。(4)線粒體Cytb、COI、16SrRNA、COII基因序列中,氨基酸使用中頻率最高的是Leu(亮氨酸),密碼子使用頻率最高的為UAA、AAA;核基因序列氨基酸使用頻率最高的是Arg(精氨酸),密碼子使用頻率最高的是CUC。說明線粒體基因與核基因在氨基酸和密碼子的使用方面有明顯差異。(5)基于Cytb、COI、16SrRNA、28SrRNA、COIl5種基因,采用Kimura-2參數(shù)模型

8、分別構(gòu)建的11種花金龜NJ樹和MP樹結(jié)果顯示:NJ和MP樹的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系基本一致,即星花金龜屬Protaetia的疏紋星花金龜、白星花金龜、多紋星花金龜、藍(lán)星花金龜優(yōu)先聚為一個分支,其次為花金龜屬Cetonia的華美花金龜(長毛花金龜)和暗綠花金龜,其他屬先后聚集在花金龜科支下,外群多色異麗金龜和斑股鍬甲處于次外枝和

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