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《中國(guó)遷粉蝶屬_鱗翅目_粉蝶科_基于nd_和co_基因部分序列的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、ActaZootaxonomicaSinica,35(4):776-781(Oc.t,2010)ISSN1000-0739動(dòng)物分類學(xué)報(bào)中國(guó)遷粉蝶屬(鱗翅目,粉蝶科)基于ND和CO基因部分序列的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系*汪江尚素琴張雅林西北農(nóng)林科技大學(xué)植保資源與病蟲(chóng)害治理教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,昆蟲(chóng)博物館陜西楊凌712100摘要測(cè)定了中國(guó)遷粉蝶屬3種4亞種以及遷粉蝶指名亞種5個(gè)生態(tài)型的線粒體CO基因和ND基因部分序列,以靈奇尖粉蝶為外群,分別采用最大簡(jiǎn)約法、最大似然法和貝葉斯法構(gòu)建分子系統(tǒng)樹(shù),探討了中國(guó)遷粉蝶屬3種4亞種間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系,
2、并首次明確了遷粉蝶指名亞種5個(gè)生態(tài)型的親緣關(guān)系。結(jié)果顯示在測(cè)得的CO基因661bp序列和ND基因472bp序列中,有變異位點(diǎn)227個(gè),簡(jiǎn)約位點(diǎn)119個(gè),A+T含量(755%)明顯偏高。遷粉蝶屬4亞種分子系統(tǒng)關(guān)系為:(鎘黃遷粉蝶指名亞種+((梨花遷粉蝶指名亞種+梨花遷粉蝶海南亞種)+遷粉蝶指名亞種)),遷粉蝶指名亞種5個(gè)生態(tài)型分子系統(tǒng)關(guān)系為:(無(wú)紋型+((有紋型+紅角型)+(銀斑型+血斑型)))。關(guān)鍵詞鱗翅目,黃粉蝶亞科,遷粉蝶屬,CO基因,ND基因,系統(tǒng)發(fā)育.中圖分類號(hào)Q961遷粉蝶屬Catopsilia由Hbner于1
3、819年建立,12實(shí)驗(yàn)方法模式種為PapiliopomonaFabricius,隸屬于鱗翅目121總DNA提取Lepidoptera,粉蝶科Pieridae,黃粉蝶亞科基本參照Z(yǔ)mimermann等(2000)的方法,在Coliadinae。目前全世界已知9種,分布于亞洲、非此基礎(chǔ)上略做改進(jìn)。取蝴蝶的一只足,加入250L洲及大洋洲等地。中國(guó)分布有3種4亞種,主要分提取緩沖液(5mmol/LTris-HC,l25mmol/L布在西南區(qū)、華中區(qū)和華南區(qū)。其中遷粉蝶指名亞NaC,lpH80,25mmol/LEDTA,01%SDS)
4、,用種C.pomonapomona具多型性,各型的外生殖器結(jié)構(gòu)塑料小杵將足搗碎。加入2L蛋白酶K(20mg/相似,且變異連續(xù),又都分布于云南西雙版納地區(qū),mL),混勻,60保溫至少3h。經(jīng)酚和氯仿純化僅從形態(tài)上很難探討它們之間的系統(tǒng)關(guān)系,需借助后,加入2倍體積的無(wú)水乙醇沉淀DNA。DNA沉分子手段或其它方法進(jìn)一步確定。淀經(jīng)70%乙醇清洗,空氣干燥后,溶于50LTE,目前,有關(guān)遷粉蝶屬分子系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系的研究4保存?zhèn)溆?。未?jiàn)報(bào)道。ND和CO基因由于進(jìn)化速率較快,122PCR擴(kuò)增線粒體目的基因片段常用于分析親緣關(guān)系密切的種、亞種
5、及地理種群之?dāng)U增兩種線粒體基因的引物均為通用引物(表間的系統(tǒng)關(guān)系(王備新等,2002)。本文對(duì)中國(guó)分布2),由上海申能博彩生物科技有限公司合成。的遷粉蝶屬3種4亞種以及遷粉蝶指名亞種5個(gè)生PCR反應(yīng)體系總體積為50L,其中5uL10態(tài)型的線粒體ND和CO基因的部分序列進(jìn)行測(cè)Buffer,7LMgCl2(25mmol/L),75LBSA定,比較這4個(gè)亞種在DNA序列上的差異,探討了(06mg/mL),1LdNTP(10mmol/L),10mol/L它們的分子系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系,并首次明確了遷粉蝶指引物各1L,4LDNA模板溶
6、液(包含10~25ng名亞種5個(gè)生態(tài)型的親緣關(guān)系。DNA),05UTaq酶,雙蒸水補(bǔ)足至50L。反應(yīng)程1材料和方法序?yàn)?94預(yù)變性5min;94變性30s,ND基因與11實(shí)驗(yàn)材料CO基因分別為48和47復(fù)性40s,72延伸研究所用的遷粉蝶屬標(biāo)本來(lái)源和信息見(jiàn)表1。30s,35個(gè)循環(huán);72總延伸10min。反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)野外采集新鮮標(biāo)本帶回實(shí)驗(yàn)室,經(jīng)鑒定后立即取其1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)和GelDos圖像分析儀觀6條足置于100%的酒精中固定,-20冰箱保存察,經(jīng)純化試劑盒純化,基因片段由南京金思特科技備用。有限公司采用
7、ABI-377基因分析儀測(cè)定?？萍疾炕A(chǔ)性工作專項(xiàng)(2006FY110500-3),西北農(nóng)林科技大學(xué)青年科學(xué)基金(QN2009033)資助.*通訊作者,E-mai:lsuqinsh@126.com收稿日期:2010-01-25,修訂日期:2010-07-15.776Oc.t,2010汪江等:中國(guó)遷粉蝶屬(鱗翅目,粉蝶科)基于ND和CO基因部分序列的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系777表1樣品來(lái)源、信息及GenBank登錄號(hào)Table1.Thesources,informationandGenBankaccessionNo.ofsamples.
8、GenBank登錄號(hào)種名編號(hào)采集地點(diǎn)采集時(shí)間GenBankaccessionNo.SpeciesCodeCollectionlocationCollectiondateCOGe
