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《烏司他丁、缺血預處理、缺血后處理聯(lián)合對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾～躲斑一名螈等匿研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生躲蓐曼羔導師繇未百鍵縟加a8聿3月瘳日中文摘要烏司他丁、缺血預處理、缺血后處理聯(lián)合對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響摘要目的復雜的腎臟手術，如腎移植術、腎實質(zhì)切開取石術、腎腫瘤的腎部分切除術，血管外科的主動脈修補術等術中均需要阻斷腎臟血流引起腎缺血再灌注(ischemia．reperfusion，I／R)損傷。常溫下阻斷腎血
2、流時間超過40min，將導致急性腎功能衰竭，I／R損傷也是腎移植中影響移植腎早期功能恢復及長期存活的主要因素。如何預防和減輕I／R損傷，一直是腎臟保護中的主要課題。本研究前期實驗成功制備了大鼠腎臟I／R損傷模型及大鼠腎臟I／R損傷的缺血后處理(ischemicpostconditioning，IPo)模型，觀察到烏司他丁(ulinastain，U)預先給藥、缺血預處理(ischemicpreconditioning，IP)、IPoF?J匕夠通過清除自由基，增強SOD活性，減輕脂質(zhì)過氧化反應，抑制細胞凋亡而減輕大鼠I／R腎損傷。缺血再灌注損傷是由許多因素造成的復雜的病理生理過程，缺血損傷能夠?qū)?/p>
3、致亞致死性細胞損傷，而更被再灌注時各種細胞內(nèi)來源的活性氧而加重損傷；此外，炎性介質(zhì)前體的形成，巨噬細胞、中性粒細胞、淋巴細胞的聚集和活化則進一步加重損傷；微循環(huán)的阻塞可導致無灌流區(qū)域的形成和引起缺血損傷。針對單一介質(zhì)或機制的保護措施要達到理想的保護效果是很困難的。本研究在前期實驗基礎上探討缺血預處理、缺血后處理以及烏司他丁聯(lián)合對大鼠腎豫損傷的影響及其機制。為臨床保護缺血再灌注損傷腎臟建立一種中文摘要新的、更合理的方式，為減輕腎損傷，保護腎功能提供理論依據(jù)。方法36只雄性SD大鼠隨機分為6組(n=6)，假手術組(S組)，缺血再灌注組(I瓜組)，缺血預處理聯(lián)合后處理組(IP+IPo組)，烏司他丁
4、聯(lián)合缺血預處理組(U+IP組)，烏司他丁聯(lián)合缺血后處理組(U+IPo組)，烏司他丁、缺血預處理聯(lián)合后處理組(U+IP+IPo組)。10％水合氯醛3ml／kg腹腔注射麻醉，采用夾閉雙側(cè)腎蒂45min、再灌注6h制備腎臟I／R損傷模型。用無損傷動脈夾夾閉雙側(cè)腎蒂，腎臟顏色變?yōu)榘导t色即可確認腎臟血流阻斷，造成雙側(cè)腎缺血45min后，松開動脈夾，腎臟由暗紅色恢復鮮紅色即可確認血流恢復，夾閉和放開腎蒂時腹腔內(nèi)各注射林格液20ml／kg。S組僅行開腹，游離出雙側(cè)腎臟，分離雙側(cè)腎蒂不夾閉，傷口用生理鹽水紗布覆蓋，暴露45min不作腎缺血處理；I／R組夾閉雙側(cè)腎蒂，缺血45min后放開動脈夾；IP+IPo組
5、在缺血前先給予夾閉雙側(cè)腎蒂缺血5min，再灌注5min，反復3次，夾閉雙側(cè)腎蒂缺血45min后再灌注10S，缺血10S，反復3次，再恢復血液灌注6h；U+IP組：缺血前30min經(jīng)尾靜脈注射烏司他丁2×104U／kg，夾閉雙側(cè)腎蒂缺血5min再灌注5min反復3次，即給予夾閉雙側(cè)。腎蒂缺血45min后，再恢復血流灌注6h；U+IPo組缺血前30min經(jīng)尾靜脈注射烏司他丁2×104U／kg，夾閉雙側(cè)腎蒂缺血45min后，再灌注10S，缺血10s，反復3次，再恢復血液灌注6h；U+IP+IPo組缺血前30min經(jīng)尾靜脈注射烏司他丁2×104U／kg，余操作同IP+IPo組。再灌注6h時處死大鼠，
6、酶法測定血清肌酐(Cr)水平、中文摘要苦味酸不除蛋白法測定尿素氮(BUN)水平；放射免疫分析法測定尿c【1．微球蛋白(a1．MG)水平；硫代巴比妥酸(TBA)法測定腎組織丙二醛(MDA)含量和黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)活性；原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標記(TU姬L)法檢測腎組織中凋亡細胞，計算凋亡指數(shù)(apopaticindex，AI)；采用免疫組化(SP)法觀察腎組織中凋亡相關蛋白Bcl．2、Bax和Caspase．3的表達，計算蛋白陽性染色指數(shù)(positiveindex，PI)；蘇木素．伊紅(HE)染色，在光鏡下觀察腎組織病理學變化。結(jié)果與S組比較，再灌注6h時，I瓜組、
7、IP+IPo組、U+IP組、U+IPo組、U+IP+IPo組血清Cr和BUN濃度明顯升高(P
