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《磷脂酰膽堿的分離提取與松蘿酸脂質(zhì)體的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、鄭州人學(xué)碩f：學(xué)位論文摘要本論文分為兩部分開展實(shí)驗(yàn)。第一部分以蛋黃粗磷脂作為原料分離提純得到ESO(磷脂酰膽堿PC的含量在80％以上)以及深加工產(chǎn)品E98(磷脂酰膽堿PC的含量在98％以上)，并對兩種產(chǎn)品的質(zhì)量做出評價(jià)。E80的質(zhì)量評價(jià)包括酸值、碘值、皂化值、有關(guān)物質(zhì)、水分等；E98的質(zhì)量評價(jià)除包括上述E80各檢測項(xiàng)之外，用’H-NMR和”C-NMR圖譜對PC的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確證。并用HPLC分析了兩種產(chǎn)品中各磷脂組分的種類和含量。第二部分是使用第一部分分離提純得到的E98，與膽固醇篩選合適的配方包埋藥物松蘿酸制備松蘿酸脂質(zhì)體。對松蘿酸脂質(zhì)體進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)，包括粒徑測量、藥脂比大小、載藥量
2、高低、包封率高低等。并對貯減了一個(gè)月的脂質(zhì)體進(jìn)行了穩(wěn)定性研究。采用有機(jī)溶劑沉淀法對蛋黃粗磷脂進(jìn)行處理。依次用丙酮和無水乙醇溶解浸泡該磷脂粗品，過濾除去不溶性雜質(zhì)；用重蒸丙酮沉淀得到成品粗品；用活性炭進(jìn)行脫色處理；95％乙醇進(jìn)行精制；重蒸丙酮二次沉淀后在凍干設(shè)備上凍干制得成品。按2005年版《中華人民共和國藥典》有關(guān)規(guī)定對成品進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)。經(jīng)分析采用有機(jī)溶劑沉淀法制備的成品各質(zhì)量參數(shù)均符合寶雞力邦生物工程有限公司的企業(yè)內(nèi)部自控標(biāo)準(zhǔn)。產(chǎn)品性能達(dá)到了德國Lipoid公司生產(chǎn)的E80產(chǎn)品的水平，完全可以替代該產(chǎn)品使用。將制得的E80作為原料，采用柱層析色譜法深加工得到高純磷脂產(chǎn)品E98。上柱
3、的沈脫液采用氯仿和甲醇的混合溶媒。TLC進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測，檢測結(jié)果作為更換沈脫液中氯仿和甲醇比例的判斷依據(jù)。將洗脫液按所含物質(zhì)種類的不同分批收集濃縮后脫色，在重蒸丙酮中沉淀、凍干設(shè)備上凍干制得成品E98。按E80的相關(guān)步驟對深加工產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)。結(jié)果得到的成品純度在98％以上。用核磁共振儀對E98進(jìn)行1H-NMR和’3C．NMR的分析確定了其結(jié)構(gòu)。將E98和膽固醇作為基礎(chǔ)原料，篩選合適的配方工藝制備松蘿酸脂質(zhì)體，并評價(jià)了其質(zhì)量。建立了松蘿酸脂質(zhì)體的HPLC色譜條件和包封率的測定方法。HPLC色譜條件是用c18反相色譜柱，(250mmx4．6mm，51a)，流動(dòng)相組成為甲醇：PBS(pH
4、為5．0左右)=70：30(體積比)，流速為lml／min，紫外檢測波長為284nm。包封率的測定方法是用自制的SephadexG．25葡聚糖微型凝膠色譜柱分離脂質(zhì)體和游離藥物，蒸餾水作為洗脫劑，用HPLC檢測脂質(zhì)體中藥物和游離藥物的含量，鄭州人學(xué)顧}二學(xué)位論文計(jì)算出松蘿酸脂質(zhì)體的包封率．結(jié)果表明，E98和膽固醇以70：30(mol：m01)為配方制備的脂質(zhì)體，可以包封松蘿酸藥量達(dá)lmg／50mg左右，脂質(zhì)體的粒徑為130-a：20nm，包封率在90％以上。將貯存一個(gè)月后的脂質(zhì)體再進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體粒徑較以前有所變大。這和PC為中性磷脂有關(guān)，符合文獻(xiàn)報(bào)道的情況。包封率也有所下降
5、。關(guān)鍵詞：卵磷脂；質(zhì)量評價(jià)；脂質(zhì)體；高效液帽：包封率鄭州人學(xué)碩I：學(xué)位論文ABS’I’RAC’I’There8retwopartsinthispaper．Thepartone，untreatedeggphospholipidsasstartingmaterialWasseparatedtogainE80andthedeepproductE98，andthequalitiesoftwoproductswcreevaluated．ThequalityparametersofE80includeacidvalue,iodinevalue,saponificationvalue,therel
6、atedsubstance,thewatercontent，etc．ExceptfortheoptionsofqualityparametersofE80，the1HNMRand’3HNMRWasusedtodeteminethestructureofPC。High—performanceliquidchromatoguaphic(HPLC)Wasusedtoanalysethevarietiescfphospholipidsandcontentsintwoproducts．Theparttwo，thefitratioofE98andcholesterolWaschoosedtopr
7、epareliposomalusnicacid。Thelipnsomes’qualitiesWff／'eevaluatedsuchasparticlesize,durg-to·lipidratio，durg-carrying,encapsulatedefficiency,etc．Thestabilityoftheliposomeswasalsomeasuredafteronemonth．Themethodofprecipitationwi也organics
