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1、402例乙肝患者HBV-DNA和HBV-M同步檢測結(jié)果分析(1河北省邯鄲市傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)科河北邯鄲056002)(2河北省邯鄲市傳染病醫(yī)院傳染產(chǎn)科河北邯鄲056002)【摘要】目的：乙肝患者血清HBV-M與HBV?DNA聯(lián)合檢測臨床應(yīng)用價(jià)值。方法：對(duì)402例乙肝患者血清標(biāo)木采用免疫化學(xué)發(fā)光分析法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分別進(jìn)行HBV-M和HBV?DNA定量測定，以HBV-M血清學(xué)模式進(jìn)行分組分析，探討兩者的關(guān)系特點(diǎn)。結(jié)果：HBV血清學(xué)常見模式6種和少見模式5種。乙肝大三陽患者血清標(biāo)木HBV-DNA陽性率為55.9%,病毒載量中、高
2、拷貝復(fù)制；乙肝小三陽患者血清標(biāo)木HBV-DNA陽性率為19.48%,病毒載量中、低拷貝復(fù)制；第8組陽性率為61.0%,病毒載量以中、低拷貝復(fù)制。結(jié)論：HBV?DNA定量檢測在各種HBV?M血清學(xué)模式具有差異，為臨床診斷、治療提供了重要依據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】乙肝；HBV-M；免疫化學(xué)發(fā)光法；HBV-DNA；實(shí)時(shí)熒光定量PCR【中圖分類號(hào)】R446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8231(2016)24-0233-01乙型肝炎病毒(HBV)屬于嗜肝DNA病毒科，是乙型病毒性肝炎患者的病原體。我國人群中HBV攜帶率約為10%,約有1.2
3、億人攜帶HBV[l]oHBV感染可表現(xiàn)為重癥肝炎、急性肝炎、慢性肝炎或無癥狀攜帶者，部分慢性肝炎可演變成肝硬化或肝癌。HBV-M為乙肝病毒感染的血清學(xué)標(biāo)志物。HBV-DNA是反應(yīng)HBV復(fù)制最可靠指標(biāo)。對(duì)兩者同步檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析，期望能為臨床提供有效依據(jù)。1.對(duì)象與方法1.1對(duì)象2013年邯鄲市第六醫(yī)院就診的402例乙肝患者。1.2方法1.2.1標(biāo)木采集：患者靜脈血5毫升，促凝管采集，取血清檢測。1.2.2儀器與試劑:化學(xué)發(fā)光儀,SLAN-PCR擴(kuò)增儀，HBV-M試劑，HBV-DNA熒光定量PCR試劑。1.2.3HBV-M血清學(xué)標(biāo)志
4、物檢測：化學(xué)發(fā)光法。1.2.4HBV-DNA定量檢測：實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，HBV?DNA>500copies/mL判斷為陽性。2.結(jié)果根據(jù)乙肝HBV-M血清學(xué)模式類型，將402例HBV血清學(xué)結(jié)果分為常見模式和少見模式（見表）,前者88.81%,后者11.19%oHBV血清學(xué)常見模式6種,大三陽占40%,PCR陽性率為55.9%；小三陽占38%,PCR陽性率為19.48%；4、5、6組所占比例較少，PCR為陰性。HBV血清學(xué)少見模式5種，8組占10.2%,PCR陽性率為61.0%；7、9、11組各有1例，9、11組PCR為陽性；7、
5、10組PCR為陰性。注：“■”表示無數(shù)據(jù)。3.討論HBV-M是臨床上乙肝病原學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)。本方法是繼ELISA法檢測后新一代測定技術(shù)oHBV-M檢測常用指標(biāo)包括：HBsAg>HBsAbHBeAg>HbeAb和HbcAb。HbsAg為病毒外膜蛋白的重要組成成分，為HBV感染的主要血清學(xué)檢測指標(biāo)。在感染早期就會(huì)出現(xiàn)在血液中，并會(huì)持續(xù)數(shù)月或終生，判斷患者是否感染乙肝病毒的依據(jù)。熒光定量PCR檢測HBV?DNA是臨床基因診斷的有效手段。周麗敏⑵文獻(xiàn)報(bào)道乙肝標(biāo)志物共24種模式。本研究共搜集11種模式，在大三陽與小三陽模式中，HBV?DNA陽性
6、率分別為55.9%和19.9%,病毒含量具有差異。與張海業(yè)⑴數(shù)據(jù)相比，大三陽組HBV-DNA陽性率較低，可能是（1）患者經(jīng)用藥治療后，HBV?DNA較HBeAg易于轉(zhuǎn)陰；（2）與病毒發(fā)生變異有關(guān)；（3）HBV-DNA呈低水平復(fù)制受HBV-DNAPCR試劑檢測下限低靈敏度局限。大三陽組病毒載量以高、中濃度拷貝復(fù)制，提示病毒在體內(nèi)復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)，E抗原的存在與HBV病毒量存在正相關(guān)性；小三陽病毒載量以中、低濃度拷貝復(fù)制，提示病毒未停止復(fù)制，只是復(fù)制緩解或部分患者出現(xiàn)病毒基因變異。本研究中1,5模式僅有1例，HBV-DNA為陽性，該
7、模式見于抗原抗體低濃度轉(zhuǎn)化，或病毒亞型感染所致。乙肝大三陽組與小三陽組HBV-DNA對(duì)比結(jié)果說明，HbeAg與乙肝病毒載量復(fù)制緊密相關(guān)。罕見模式中，第8組占總?cè)虢M數(shù)的10.20%,其HBV?DNA陽性率61.0%,說明HbeAg/抗Hbe血清轉(zhuǎn)換期，病毒并未完全停止復(fù)制或病毒基因變異。9和10各有一?例，HBV?DNA均為陽性。相關(guān)研究表明HbsAb作為保護(hù)性抗體只有達(dá)到一定水平才能達(dá)到中和病毒、發(fā)揮保護(hù)作用的水平⑶。HBV?M與HBV-DNA無明顯相關(guān)性。綜上所述，雖然HBV?M化學(xué)發(fā)光檢測雖有高靈敏度、強(qiáng)特異性、寬線性范圍等特
8、點(diǎn)，但不能100%反應(yīng)病毒復(fù)制情況，而HBV-DNA的定量檢測能準(zhǔn)確、靈敏地反映體內(nèi)是否存在HBV病毒及其動(dòng)態(tài)增殖水平。因此，兩者定量聯(lián)合檢測可以了解乙型肝炎患者體內(nèi)HBV感染、復(fù)制等情況，為乙肝病毒的治療方案選擇、療效觀察、預(yù)后判斷、變異檢測等提
