il-31在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌ck的影響

《il-31在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌ck的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文IL--31在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌CK的影響姓名：杜青波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：黃俊瓊201205遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文IL．31在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌CK的影響IL一31在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌CK的影響摘要目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究IL．31和IL．31R在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及趨化因子在hIL．31作用肺泡上皮細(xì)胞后的分泌情況，進(jìn)一步探討IL．31在哮喘氣道炎癥中的作用。方法1)采用卵白蛋白(OVA)致

2、敏，激發(fā)的方法建立哮喘小鼠模型，將20只雌性BABL／C小鼠隨機(jī)分為A(對(duì)照組)和B(哮喘模型組)兩組，每組各10只。第一階段為致敏階段，分別在第l天和第14天腹腔注射0．2ml的100pgOVA(Ovalbumin)和2．25mg氫氧化鋁凝膠(其濃度為13mg／m1)混懸液各1次；從第21天氣開(kāi)始霧化吸入濃度為3％OVA，每次30min，連續(xù)7天，此階段為模型的激發(fā)階段：正常對(duì)照組小鼠，在致敏和激發(fā)兩個(gè)階段用PBS代替OVA進(jìn)行。2)制作病理切片：完成致敏、激發(fā)后的模型小鼠，在結(jié)束激發(fā)后的24小

3、時(shí)內(nèi)，無(wú)菌取肺組織，部分組織制作病理切片(HE染色)，觀察兩組小鼠氣道組織結(jié)構(gòu)病理改變情況；部分組織提取總RNA，用于以后的實(shí)驗(yàn)。3)hIL一31作用A549細(xì)胞：用含15％胎牛血清的RPMIl640于37"C、5％C02的環(huán)境下培養(yǎng)A549細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞鋪滿瓶底的85％～95％時(shí)，用不同濃度(10ng／ml、50ng／ml、lOOng／m1)hIL一31作用A549細(xì)胞和相同濃度(10ng／m1)hIL一31作用A549細(xì)胞不同時(shí)間(12小時(shí)、24小時(shí)、36小時(shí))。4)用熒光定量PCR(FQ-PC

4、R)方法檢測(cè)兩組小鼠肺組織IL．31及IL．31R的水平及趨化因子CCL2在hlL一31作用A549細(xì)胞后的分泌情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理以SPSSl7．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間的樣本均數(shù)用t檢驗(yàn)。本研究設(shè)定檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=O．05，以P<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1)觀察哮喘組小鼠在霧化10分鐘左右可見(jiàn)鼻翼煽動(dòng)增快，每分鐘可達(dá)350次遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文IL．31在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌CK的影響左右，煩躁不安，嘴唇顏色加重，軀體呈弓背向上等癥狀。對(duì)照組小鼠

5、未見(jiàn)明顯異常。2)病理切片顯示：哮喘小鼠急性發(fā)作時(shí)，在支氣管及血管周?chē)兄行粤＜?xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞、骨架斷裂；胸腔壓力增大、肺泡破裂。3)熒光定量PCR的相對(duì)表達(dá)結(jié)果顯示：和正常對(duì)照組相比較，IL．31及IL．31R在哮喘小鼠急性發(fā)作時(shí)肺組織的表達(dá)增高，P<0．05，差異有意義。4)不同濃度hlL．3l作用于A549細(xì)胞后，每組濃度與未處理組相比較，趨化因子CCL2的分泌均增高。P<0．05，差異有意義。5)同一濃度hlL．31作用A549細(xì)胞，CCL2在不同時(shí)間段分泌均增高。P<

6、0．05，差異有意義。結(jié)論熒光定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，IL．31及IL．31R在哮喘小鼠在肺組織中表達(dá)增高，說(shuō)明IL．31在哮喘的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用；hlL．31作用于肺組織來(lái)源的A549細(xì)胞后，趨化因子CCL2的分泌增多，說(shuō)明，IL．31可能誘導(dǎo)肺組織細(xì)胞分泌趨化因子參與哮喘氣道炎癥。這一結(jié)論為哮喘氣道炎癥的形成提供更直接的證據(jù)。關(guān)鍵詞白介素．31：A549細(xì)胞；嗜酸性粒細(xì)胞：CCL2遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文IL．3l在哮喘小鼠肺組織中的表達(dá)及對(duì)肺組織細(xì)胞分泌CK的影響ExpressionofInte

7、rkin-31inthelungtissueoftheasthmaticmiceandThesecretionsofCKfromlungtissuecellsobjectivesAbstractByresearchedtheIL--31andIL·-31Rexpressioninthelungofasthmaticmiceandche—motacticfactorsecretedbystudiesofalveolarepithelialcellswithhlL一31．Furtherinvestig

8、atetherelationshipbetweenIL-31andc11romcairwayinflammationofasthma．Methods1)TheBALB／Cmicemodelwassensitizedandinducedbyovalbumin(OVA)withclassicmethod．Twentyasthmaticfemalemicewererandomlydividedintotwogroups(tenineach)：normalcontrolgroupandas