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《甘藍型油菜人工合成種polcms恢復基因的分子標記開發(fā)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、華中農業(yè)大學碩士學位論文甘藍型油菜人工合成種polCMS恢復基因的分子標記開發(fā)姓名：龍福蓉申請學位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導教師：劉平武201206甘藍型油菜人工合成種中波里馬細胞質雄性不育恢復基因的分子標記開發(fā)摘要甘藍型油菜因抗病及產量性狀較為突出，最終取代白菜型油菜成為我國半冬性油菜產區(qū)的主要油料作物。利用甘藍型油菜較強的雜種優(yōu)勢，結合GMS、CMS、GCMS、SI和CHA等利用途徑有效提高油菜產量成為當今油菜育種研究的一個熱點。其中，CMS在當今油菜的生產實踐和育種研究中應用的最為廣泛。細胞質雄性不育系和恢復系的選育作為細胞質雄性不育雜種優(yōu)勢利用的核心技
2、術，長期以來均受到了廣大育種家的高度重視。然而，甘藍型油菜起源于歐洲，之后才傳入我國，因而我國的甘藍型油菜遺傳基礎狹窄。這嚴重制約了我國油菜雜種優(yōu)勢在育種工作中的應用。利用人工合成的甘藍型油菜可以在一定程度上拓寬我國甘藍型油菜狹窄的遺傳基礎并豐富其遺傳多樣性，進而可能篩選到新的雄性不育或恢復基因資源，有利于甘藍型油菜雜種優(yōu)勢的研究和應用。本研究利用在甘藍型油菜人工合成種中篩選獲得的波里馬細胞質雄性不育恢復系23—002．1構建遺傳分離群體，結合常規(guī)AFLP技術和生物信息學技術手段開發(fā)與該人工合成種中攜帶的恢復基因緊密連鎖的分子標記并對其進行初步圖譜定位，以促進該恢復
3、基因資源在雜種優(yōu)勢育種中的應用，并為進一步分離、克隆該恢復基因打下基礎。論文獲得的結果主要如下：1．利用人工合成種恢復系23—002．1、polCMS不育系l141A及其保持系1141B和NPZ05構建了兩個育性分離群體：逐步回交群體A和逐步回交群體B。同時調查回交過程中產生的復交群體A、復交群體B、逐步回交群體A和逐步回交群體B群體中各單株育性，卡平方檢驗符合l：1的理論分離比。說明分離群體中攜帶的恢復基因僅有1個位點。2．BSA法分析了(EcoRI／MseI、SacI／TaqI)2組酶切組合，共篩選了1280對AFLP引物。獲得2個與聊連鎖的AFLP標記(EA0
4、8MCl0—180、EA08MG05—230)。這兩個標記距離目標位點的遺傳距離分別為5．6cM和9．3cM，且位于聊基因的兩側。3．TA克隆這2個標記(EA08Mcl0180和EA08MG05230)片段并測序，結果表明這2標記特異片段的大小分別為162bp和215bp。利用這些序列信息將其中1個AFLP標記EA08MG05230成功轉為SCAR標記SCL2。4．將與尺廖緊密連鎖的AFLP標記序列與白菜的Scaffold進行BLAST比對，根華中農業(yè)大學2012屆碩士學位論文據同源的Scaffold序列共設計了60對SSR引物和110對SCAR引物。再在構建的復交
5、群體A中篩選這些引物，共計獲得12個與肋緊密連鎖的標記。5．將上述所得到的SCAR標記和SSR標記序列與白菜基因組序列進行比較，結合5個標記(BRSC01，BRIPl4，BRIP47，BRIP33和OS36)與DH系連鎖圖譜的整合信息，最終將恢復基因肋定位在甘藍型油菜A基因組第9染色體上。6．將4中獲得的12個與跏緊密連鎖的標記在逐步回交群體A、逐步回交群體B、NILs和DH系群體中進行通用性分析。結果表明標記OS36和BRIPl4通用性最好，BRIP33次之。關鍵詞：甘藍型油菜人工合成種；細胞質雄性不育(CMS)；育性恢復基因∞白)；分子標記；圖譜定位Il甘藍型油
6、菜人工合成種中波里馬細胞質雄性不育恢復基因的分子標記開發(fā)AbstractRapeseedoilisthemainediblevegetableoilinChina．BrassicacampestrisL．waseventuallytakenplacebyBrassicanapusL．insemiwintertyperapeseedcultivationregioninChinaduetohigherdiseaseresistanceandhigheryieldinB．napus．Strongheterosishasbeenobservedbymanybreeders
7、in丑napus．Asaresults，manybreedersalefocusingonthebreedingofrapeseedvarietieswithhighyieldandqualitybytheaidofheterosisutilizationinmodemrapeseedbreedingprogram．Thereareseveralmethodsforutilizingheterosisinrapeseedbreeding，suchasgenicmalesterile(GMS)，cytoplasmicmalesterile(CMS)，genican
