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1、學(xué)校代碼：10264研究生學(xué)號(hào)：M090109286上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文題目：番茄黃化曲葉病毒分子鑒定及致病性研究英文題目：MolecularIdentificationofTYLCVandPathogenicity專業(yè)：作物遺傳育種研究方向：分子抗病育種姓名：田守波指導(dǎo)教師：朱為民研究員二O一二年三月十一日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包
2、含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本
3、學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日番茄黃化曲葉病毒分子鑒定及致病性研究摘要番茄（LycopersiconesculentumM）是世界范圍內(nèi)廣泛種植的主要蔬菜之一，但近些年由于番茄黃化曲葉病毒（Tomatoyellowleafcurlvirus）的大規(guī)模爆發(fā)給番茄生產(chǎn)帶來了巨大影響，造成了嚴(yán)重?fù)p失。該病毒是一種由煙粉虱傳播的雙生病毒，嚴(yán)重影響番茄品質(zhì)和產(chǎn)量，甚至可以造成番茄絕收。目前該病毒病在上海郊區(qū)也有大面積發(fā)生，已成為影響該地區(qū)番茄種植的主要障礙之一。
4、近幾年來專家們一直致力于尋求解決這一問題的方法，其中篩選和培育抗病品種被認(rèn)為是解決該病害問題最有效、最直接的方法。而開展番茄抗病基因的分子標(biāo)記和品種資源的抗病鑒定、評(píng)價(jià)工作，則有助于建立番茄分子標(biāo)記輔助選擇育種體系，獲得更多、更準(zhǔn)確的抗源材料，促進(jìn)番茄抗病育種水平的顯著提高。本研究對(duì)上海農(nóng)科院園藝所番茄組提供的番茄材料進(jìn)行病毒病和抗病基因的鑒定，并在大田中用自然傳毒的方法對(duì)分子鑒定的抗性基因結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。經(jīng)鑒定含純合抗性基因的株系，則可用于雜交育種，從而培育出更多優(yōu)良的含復(fù)合抗性基因的品種。該實(shí)驗(yàn)
5、對(duì)番茄抗病育種研究具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。從上海、山東、河北地區(qū)采集了表現(xiàn)為黃化曲葉病的番茄樣本，用兼并引物PA/PB擴(kuò)增，均得到500bp的目的片段，克隆測(cè)序后在GenBank上比對(duì)分析，均為番茄黃化曲葉病毒（TomatoYellowLeafCurlVirus，TYLCV）。各地區(qū)TYLCV分離物具有很高的同源性，其同源性均超過98.9%，而與其他雙生病毒親緣關(guān)系相對(duì)較遠(yuǎn)。對(duì)上海市農(nóng)科院園藝所抗雙生病毒的番茄抗性材料提取DNA，利用已經(jīng)報(bào)道的分子標(biāo)記，初步分析這些材料攜帶抗病基因Ty-1、Ty-2、T
6、y-3。目前番茄材料中含有最多的抗性基因?yàn)門y3，其次是Ty1-1,最少的是Ty2，其中含有Ty-3/Ty-3(純合抗病)的田間均表現(xiàn)為抗病。并對(duì)分子標(biāo)記結(jié)果與田間試驗(yàn)符合率為97.3%。構(gòu)建了侵染番茄的兩種雙生病毒（HaNHK7與PaLCCNV）侵染性克隆，致病性測(cè)定表明，均可以系統(tǒng)侵染番茄、本氏煙并表現(xiàn)明顯癥狀，HaNHK7侵染性克隆能侵染番茄和本氏煙，產(chǎn)生葉片向下卷曲癥狀；PaLCCNV侵染性克隆也可以侵染番茄和本氏煙，導(dǎo)致其葉片向上卷曲。關(guān)鍵詞：番茄，番茄黃化曲葉病毒病，雙生病毒，分子鑒定
7、IMolecularIdentificationofTYLCVandPathogenicityofGeminivirusesABSTRACTTomato(LycopersiconesculentumM)iswidlycultivatedintheworldasoneofthemainvegetables.Butinrecentyears,tomatoproductionisseriouslyaffectedresultin,hugelossesforTomatoyellowleafcurlviru
8、s(TYLCV)large-scaleoutbreakTYLCV,akindofGeminivirusestransmittedbythewhiteflyBemisiatabaci,canaffectseriousinfluencetoqulityandproductionoftomatoevencauseeconomiclossesupto100%intomatocrop.AtpresentTYLCVhasbrokeoutwidlyintheShanghaiareaandhasb
