非小細(xì)胞肺癌患者外周血survivinmrna表達(dá)和臨床意義

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1、非小細(xì)胞肺癌患者外周血SurvivinmRNA表達(dá)和臨床意義【摘要】目的通過對非小細(xì)胞肺癌(Non-smallcelllungcancer,NSCLC)患者外周血生存素(Survivin)mRNA的檢測;探討其對NSCLC診斷的臨床價值和意義。方法采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測55例非小細(xì)胞肺癌患者、60例對照組的外周血SurvivinmRNA的表達(dá)情況。結(jié)果SurvivinmRNA在NSCLC組的陽性率顯著高于對照組(P0.05)。結(jié)論外周血Survivin可作為早期輔助診斷NSCLC及微轉(zhuǎn)移的一個有價值的腫瘤標(biāo)志物?!娟P(guān)鍵詞】Surv

2、ivinmRNA;外周血;RT-PCR;非小細(xì)胞肺癌doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x)?2013.06.053文章編號:1004-7484(2013)-06-2913-01肺癌目前是全世界發(fā)病率、死亡率最髙的惡性腫瘤,其中非小細(xì)胞肺癌占80-85%[11,但目前缺乏特異且敏感的早期病變的診斷指標(biāo)。外周血中腫瘤標(biāo)志物的檢測有助于發(fā)現(xiàn)常規(guī)方法不能發(fā)現(xiàn)的存活于血循環(huán)中的微小腫瘤細(xì)胞灶。本研究旨在通過RT-PCR方法檢測NSCLC患者外周血中survivinmRNA的表達(dá)情況,探求NSCLC早期診斷、早期血道微轉(zhuǎn)移檢測的特異、敏感指

3、標(biāo),為臨床應(yīng)用提供理論和實驗依據(jù)。1材料和方法1.1實驗對象選擇2010年4月至2011年2月大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院收治的相關(guān)患者。惡性腫瘤組55例:男性31例,女性24例,年齡30-77歲;其中腺癌40例,鱗癌14例,大細(xì)胞癌1例。所有病例均經(jīng)病理檢查證實?;颊卟裳熬葱谢熁蚍暖?。對照組包括肺部良性病變組30例:男性18例,女性12例,年齡23-74歲;其中肺炎19例,肺結(jié)核球4例,炎性假瘤7例。正常健康對照組30例:男性15例,女性15例,年齡21-69歲,均無心、肝、肺等器質(zhì)性疾病史。1.2方法1.2.1引物合成在GeneBank查找Sur

4、vivinmRNA、3-actinmRN(內(nèi)參)基因序列,引物由大連寶生物公司合O1.2.2標(biāo)本采集及TotalRNA的提取用枸椽酸鈉抗凝經(jīng)去酶處理的采血管,取患者晨空腹肘靜脈血2.0ml?淋巴細(xì)胞分層液分離核細(xì)胞,RNAisoPlus細(xì)胞裂解液裂解,氯仿,異丙醇進(jìn)一步抽提總RNA??俁NA用紫外分光光度計定量,并行1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定,加入適量RNase-free滅菌水分裝-80°C保存?zhèn)溆谩?.2.3RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件42°C30min、95°C5min、5°C5mino在PCR反應(yīng)儀中進(jìn)行。反應(yīng)產(chǎn)物-2(TC保存?zhèn)溆?。PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件

5、94°C5min,變性94°C30s,72°C延伸lniin,共進(jìn)行30個循環(huán),最后72°C延伸5min.,SurvivinmRNA復(fù)性62°C30s,P-actinmRNA56°C30s1.3統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSSV17.0統(tǒng)計軟件包處理,用X2檢驗分析計數(shù)資料之間的比較,以P

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