非小細(xì)胞肺癌患者外周血和骨髓中l(wèi)unx基因表達(dá)的

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1、非小細(xì)胞肺癌患者外周血和骨髓中LUNX基因表達(dá)的【摘要】 ?。勰康模萏接懛切〖?xì)胞肺癌(NSCLC)患者外周血和骨髓微轉(zhuǎn)移的肺特異性X蛋白(LUNX)基因診斷的臨床意義。[方法]應(yīng)用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù),對42例肺癌患者和12例肺良性病變患者的外周血和骨髓中LUNX基因mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測。[結(jié)果]42例肺癌患者有14例在外周血中檢測到LUNX基因mRNA的表達(dá),陽性表達(dá)率為33.3%,有10例在骨髓中檢測到LUNX基因mRNA的表達(dá),陽性表達(dá)率為23.8%。LUNXmRNA的表達(dá)與CK-19基因mRNA的表達(dá)率無顯著性差異(P>0.05)

2、。外周血和骨髓微轉(zhuǎn)移與肺癌組織學(xué)類型、細(xì)胞分化程度及TNM分期均存在密切關(guān)系(P<0.05)。[結(jié)論]外周血和骨髓LUNX基因mRNA的表達(dá)是檢測肺癌微轉(zhuǎn)移的一個(gè)有價(jià)值的指標(biāo),為制定治療方案和評估預(yù)后提供重要參考依據(jù)。【關(guān)鍵詞】非小細(xì)胞肺癌 微轉(zhuǎn)移 LUNX基因 外周血 骨髓  Abstract:[Purpose]Toexploretheclinicalsignificanceoflung-specificXprotein(LUNX)genefordiagnosistomicrometastasesinperipheralbloodandbonemarroall-

3、celllungcancerpatients.[Methods]TheLUNXmRNAexpressionarro42casesonarylesion.[Results]ThepositiveratesofLUNXmRNAinperipheralbloodandbonemarrolungcancerpatientsRNAandthatofCK-19mRNA(P>0.05).ThemicrometastasesinperipheralbloodandbonemarroRNAmightbeavaluablemarkerformicrometastasesinlungc

4、ancerpatients,ayalsoprovideimportantclinicalinformationforprognositicevaluationandpropertreatmentplanning.Keyall-celllungcancer;micrometastases;LUNXgene;peripheralblood;bonemarroicrometastases)是指影像學(xué)和常規(guī)組織檢查不能檢測到的循環(huán)中的癌細(xì)胞以及原發(fā)灶以外的微小轉(zhuǎn)移灶?,F(xiàn)有的研究結(jié)果表明,微轉(zhuǎn)移與患者的預(yù)后有一定的相關(guān)性,并可早期診斷腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[2~4]。微轉(zhuǎn)移發(fā)生在肺癌的

5、早期,說明肺癌是一種全身性疾病。我們選取一種新型的肺癌分子標(biāo)記物——肺特異性X蛋白(lungspecificXprotein,LUNX)作為研究,以目前廣為應(yīng)用的CK-19標(biāo)記物為對照,觀察其在非小細(xì)胞肺癌患者的表達(dá)及其預(yù)后。同時(shí),對同一個(gè)個(gè)體的外周血和骨髓同時(shí)檢測微轉(zhuǎn)移,以期發(fā)現(xiàn)臨床應(yīng)用價(jià)值。1材料與方法1.1研究對象研究對象為2003年3月至2004年3月我院行肺癌根治術(shù)的42例患者,已排除遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,手術(shù)前均行胸部、肝臟、頭部、骨骼的影像學(xué)檢查。其中男性33例,女性9例,平均年齡64歲(38歲~76歲)。本組患者的腫瘤分期、TNM分期均根據(jù)國際抗癌協(xié)會(huì)1997年第5

6、版的標(biāo)準(zhǔn)[4]。Ⅰ期18例、Ⅱ期10例、Ⅲa期14例。其中病理類型為腺癌10例,鱗癌18例,腺鱗癌2例,細(xì)支氣管肺泡癌12例。低分化癌15例,中分化癌17例,高分化癌10例。同時(shí)設(shè)立肺良性病變組:同期接受手術(shù)的肺良性病變患者12例,男性7例,女性5例,年齡33歲~62歲。其中肺炎性假瘤4例,肺結(jié)核5例,支氣管擴(kuò)張3例??瞻讓φ战M:正常健康者外周血,共8例,男性5例,女性3例。1.2實(shí)驗(yàn)材料和儀器主要試劑:Trizol、Taq酶(杭州博日科技有限公司),逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、pGEM-T載體、質(zhì)粒提取試劑盒(Promega公司),DNAMarker(Fermentas公司)。主要

7、儀器:實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(美國ABI公司7700)。引物由上海生物工程有限公司合成,探針購于基康生物技術(shù)有限公司。肺癌細(xì)胞株A549購于上海中科院細(xì)胞生物所,用于制備標(biāo)準(zhǔn)品模板。1.3實(shí)驗(yàn)方法1.3.1標(biāo)本的獲取和初步處理所有標(biāo)本收集過程中嚴(yán)格保持無菌,同時(shí)防止上皮細(xì)胞污染。在術(shù)前1d抽取肺癌組和手術(shù)對照組患者以及健康志愿者的外周血約2ml。肺癌組和手術(shù)對照組患者在手術(shù)中、進(jìn)胸之前選取手術(shù)切口處肋骨抽取約2ml骨髓。以上外周血和骨髓均加入Eppendorf管中并迅速置入液氮中備用。1.3.2RNA的提取和逆轉(zhuǎn)錄待測標(biāo)本及肺癌細(xì)胞株A54

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