阿片受體在瑞芬太尼減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷中的作用

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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文阿片受體在瑞芬太尼減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷中的作用姓名：熊穎芬申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：麻醉學(xué)指導(dǎo)教師：呂艷霞201203中文摘要阿片受體在瑞芬太尼減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷中的作用摘要目的：本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型，觀察阿片受體興奮劑瑞芬太尼及其拮抗劑納洛酮對腎臟組織學(xué)和腎功能及腎組織超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、蛋白激酶C(PKC)蛋白表達(dá)水平和PKC活性的影響，以探討阿片受體在瑞芬太尼減輕腎臟缺血再灌注損傷中的作用。方法：成年雄性Sprague．Dawley(SD)大鼠75只，隨機(jī)分

2、為5組：假手術(shù)組(S組)、模型組(M組)、瑞芬太尼組(R組)、納洛酮組(N組)、納洛酮+瑞芬太尼組(NR組)，每組15只。S組只暴露雙側(cè)腎動(dòng)脈但不予夾閉，余四組均采用夾閉雙側(cè)腎動(dòng)脈45min再恢復(fù)灌注的方法制備大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型。R組和NR組于缺血前15min至再灌注30min內(nèi)經(jīng)尾靜脈持續(xù)輸注瑞芬太尼1．O“g·kg"1．min一，S組、M組和N組給予等容量生理鹽水替代；N組和NR組于缺血前20min經(jīng)尾靜脈注射納洛酮0．3mg／kg，間隔55min再次靜注相同劑量納洛酮，S組、M組和R組給予等容量生理鹽水替代。各組于再灌注24h時(shí)經(jīng)股靜脈

3、采集血樣和經(jīng)膀胱抽取尿樣各lml，分別用于測定血清肌酐(sCr)和尿素氮(BUN)濃度及尿N．乙酰．氨基葡萄糖苷酶(NAG)和丫．谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶“．GT)水平。并于再灌注24h時(shí)處死大鼠取腎組織標(biāo)本，光、電鏡下觀察腎臟組織結(jié)構(gòu)變化，并用黃嘌呤氧化法測定SOD活性、硫代巴比妥酸法測定MDA含量、免疫組化法測定腎組織PKC蛋白表達(dá)水平及ELISA法測定腎組織PKC活性。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較采用單因素方差分析，P

4、管無明顯擴(kuò)張，管腔內(nèi)未見壞死脫落細(xì)胞。M組腎小管上皮細(xì)胞水腫、空泡變性、壞死，腎小管明顯擴(kuò)張，管腔內(nèi)可見大量壞死脫落細(xì)胞，部分管腔內(nèi)可見管型。R組腎小管上皮細(xì)胞輕度水腫，部分腎小管擴(kuò)張，管腔內(nèi)僅見少量壞死脫中文摘要落細(xì)胞。N組和嗍腎組織病理學(xué)變化與M組相近。2電鏡觀察sgt腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)線粒體未見腫脹、空泡變性、嵴無斷裂，微絨毛排列整密。M組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)線粒體變形、腫脹、大部分嵴融合或缺失，微絨毛稀疏。R組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)線粒體稍擴(kuò)張、部分嵴融合或消失，微絨毛排列較整密。N組和NR組腎小管上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化與M組相近。3血清Cr和BUN濃度及

5、尿NAG和丫．GT水平與S組比較，余四組血清Cr和BUN濃度及尿NAG矛I]T．GT水平均升高(P<0．05或0．01)。與M組比較，R組上述四指標(biāo)均降低(PO．05)。4腎組織MDA含量和SOD活性與S組比較，余四組腎組織MDA含量均升高，而SOD活性均降低(P

6、1)。M組、N組和NR組的二指標(biāo)3組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0．05)。5腎組織PKC蛋白表達(dá)PKC在腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)：S組呈淡黃色的弱陽性表達(dá)；M組、N組和NR組較S組染色略深；R組呈棕黃色顆粒聚集的強(qiáng)陽性表達(dá)。與S組比較，M組、N組和NR組腎組織PKC蛋白表達(dá)水平(E]]AOD)雖有增強(qiáng)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0．05)，R組腎組織PKC蛋白表達(dá)水平明顯增強(qiáng)(戶

7、C蛋白表達(dá)水平3組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義儼>O．05)。6腎組織PKC活性與S組比較，余四組腎組織PKC活性均升高(PO．05)。結(jié)論：阿片受體能介導(dǎo)瑞芬太尼減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷，機(jī)制與其被瑞芬太尼激活后使腎組織ROS蓄積減少、PKC蛋白表達(dá)上調(diào)及PKC活性增加有關(guān)。關(guān)鍵詞：瑞芬太尼；納洛酮；阿片受體；腎臟；再灌注損傷英文摘要Ther

8、oleofopioidreceptorsinremifentanilattenuatingrenal-I■^