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1、授予單位代碼10089學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?0122275H鈐沒搿大5HebeiMedicalUniversity碩士學(xué)位論文科學(xué)學(xué)位瑞芬太尼對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷PI3K/Akt信號(hào)通路的影響研究生：謝明明導(dǎo)師：呂艷霞教授專業(yè)：麻醉學(xué)二級(jí)學(xué)院：第三醫(yī)院2015年3月河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師（或指導(dǎo)小組）的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)
2、所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名：命銷辦導(dǎo)師簽章：二級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章：廣年i月》/日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：讀f胡硝導(dǎo)師簽章：年月日目錄中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………4英文縮寫…………………………………………………………………8研究論文瑞芬太尼對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷PI3K/Akt信號(hào)通路
3、的影響前言………………………………………………………………9材料與方法…………………………………………………………9結(jié)果………………………………………………………………20附圖………………………………………………………………22附表………………………………………………………………30討論………………………………………………………………32結(jié)論………………………………………………………………35參考文獻(xiàn)…………………………………………………………35綜述PI3K/Akt信號(hào)通路對(duì)缺血再灌注損傷影響的研究進(jìn)展………………………………………………………………………39致謝………………………………
4、……………………………………52個(gè)人簡(jiǎn)歷………………………………………………………………53中文摘要瑞芬太尼對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷PI3K/Akt信號(hào)通路的影響摘要目的：腎臟缺血再灌注（ischemia/reperfusion，I/R）損傷是臨床上較為常見的病理現(xiàn)象，也是導(dǎo)致急性腎功能衰竭和腎移植失敗的重要原因之[1]一。I/R損傷病因復(fù)雜，不僅與炎癥反應(yīng)有關(guān)，尚涉及細(xì)胞凋亡。PI3K/Akt信號(hào)通路由PI3K與其下游分子Akt所組成，廣泛存在于細(xì)胞中，調(diào)節(jié)細(xì)[2]胞的增殖、分化、凋亡以及遷移等。Kwon等研究發(fā)現(xiàn)，腎臟I/R期間PI3K/Akt信號(hào)通路被激活，并通過其抗凋亡作用促進(jìn)細(xì)胞
5、存活，進(jìn)而參與I/R損傷的修復(fù)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，超短效高選擇μ阿片受體激動(dòng)劑[3-4]瑞芬太尼可通過抑制細(xì)胞凋亡減輕腎臟I/R損傷，但其具體機(jī)制尚不完全明了。本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠腎臟I/R損傷模型，觀察應(yīng)用瑞芬太尼對(duì)I/R不同時(shí)點(diǎn)腎臟細(xì)胞凋亡率和腎組織細(xì)胞中PI3K/Akt信號(hào)通路中PI3KmRNA和AktmRNA的表達(dá)，以及Akt蛋白和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的表達(dá)的影響，以探討瑞芬太尼減輕腎臟I/R損傷細(xì)胞凋亡作用是否與PI3K/Akt信號(hào)通路有關(guān)。方法：健康成年雄性SD大鼠60只，體重200～230g，采用隨機(jī)數(shù)字表法，將大鼠隨機(jī)分為5組（n=12）：假手術(shù)組（S組）、腎臟缺血
6、再灌注組（I/R組）、瑞芬太尼組（R組）、瑞芬太尼+渥曼青霉素（Wortmannin）組（RW組）和Wortmannin組（W組）。除S組外，其余四組采用夾閉雙側(cè)腎動(dòng)脈45min恢復(fù)再灌注法制備大鼠腎臟I/R損傷模型。R組和RW組于缺血前15min至再灌注30min經(jīng)尾靜脈輸注瑞芬太尼1.0-1-1μg·kg·min，S組、I/R組和W組給予等容量的生理鹽水替代；RW組和W組于缺血前20min靜脈注射Wortmannin15μg/kg，S組、I/R組和R組給予等容量生理鹽水替代。每組于再灌注24h和48h分別取6只大鼠經(jīng)股靜脈取血1ml，靜置后離心，取血清，用于測(cè)定尿素氮（BUN）及肌酐（
7、Scr）含量，并于再灌注24h、48h時(shí)處死大鼠取腎組織，HE染色光鏡下觀察腎臟組織病理學(xué)改變，流式細(xì)胞術(shù)雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，RT-PCR法檢測(cè)腎組織PI3KmRNA和AktmRNA的表達(dá)，westernblot檢測(cè)腎臟組織Akt蛋白的表達(dá)和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的變化。1中文摘要結(jié)果:1血清Cr和BUN濃度與S組比較，其余4組再灌注各時(shí)點(diǎn)血清Cr和BUN濃度均明顯升高（P＜0.01或0.05）。與I/R組相比
