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《鵝tlr2-1、15基因的克隆、組織表達(dá)譜分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、廣東海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文鵝TLR2--1、15基因的克隆、組織表達(dá)譜分析姓名：華國洪申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師：賈汝敏；巨向紅201206鵝TLR2．1、15基因的克隆、組織表達(dá)譜分析摘要Toll樣受體(Toll．1ikereceptors，TLRs)是一類重要的模式識(shí)別受體(pathogenrecognizereceptors，PRRs)，通過識(shí)別保守的病原相關(guān)分子模式(pathogenassociatedmolecularpatterns，PAMPs)啟動(dòng)先天性免疫應(yīng)答。Toll樣受體不僅參與非特異性免疫(天然免疫)，也是連接非特異性免疫和特異性免疫的橋梁。為解析
2、Toll樣受體在鵝抗感染免疫中的作用機(jī)制，并為抗病育種積累可供選擇的基因素材，本研究以馬崗鵝為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用RT-PCR、SMART-RACE及生物信息學(xué)分析技術(shù)，克隆了鵝TLR2．1、15全長(zhǎng)基因，分析了其分子特征；qRT-PCR技術(shù)，定量分析了其在健康鵝體內(nèi)各組織的表達(dá)譜。結(jié)果表明：(1)鵝TLR2．1cDNA序列全長(zhǎng)3119bp，包括359bp的5’非編碼區(qū)、378bp的3’非編碼區(qū)和編碼783個(gè)氨基酸的2382bp的開放閱讀框，分子量為90．17kDa、PI為7．73。TLR2．1全長(zhǎng)氨基酸序列包含1個(gè)信號(hào)肽、9個(gè)富含亮氨酸的重復(fù)序列(Leucine．richRepeat,LRR)、
3、1個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和1個(gè)胞內(nèi)TIR結(jié)構(gòu)域(IL．R1homologousregion,TIR)。同源比對(duì)顯示，鵝TLR2．1與其他已報(bào)道脊椎動(dòng)物的TLR2．1具有較高的同源性(39．6．84．6％)。組織表達(dá)分析顯示，TLR2在健康鵝的組織中具有較廣的表達(dá)分布，其中在腎臟、法氏囊、皮膚、腦組織中表達(dá)量較高。(2)鵝TLRl5cDNA序列全長(zhǎng)2805bp，包括114bp的5’非編碼區(qū)、93bp的3’非編碼區(qū)和編碼865個(gè)氨基酸的2598bp的開放閱讀框，分子量為98．85kDa、PI為7．25。TLRl5全長(zhǎng)氨基酸序列包含1個(gè)信號(hào)肽、64"富含亮氨酸的重復(fù)序列、1個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和1個(gè)胞內(nèi)TIR結(jié)構(gòu)域
4、。氨基酸結(jié)構(gòu)分析、多序列比對(duì)和進(jìn)化樹分析都表明，TLRl5與其他物種TLRs之間有較高的氨基酸相似性，與雞TLRl5的同源性最高(83％)。組織表達(dá)分析顯示，TLRl5在健康鵝的組織中具有較廣的表達(dá)分布，其中在肌胃和肌肉組織中表達(dá)量較高。關(guān)鍵詞：鵝，Toll樣受體，基因克隆，基因表達(dá)，免疫M(jìn)olecularCloningandTisssuesExpressionProfileofgooseTLR2--1and15GeneAbstractToll—likereceptors(TLRs)areconsidered硒keysensorstotriggerthehost’Sinnateimmunes
5、ystemandadaptiveilTlrtluneresponsesbyrecognizingvariousPAMPsandinitiatingsignaltransduetion．TLRshaveacentralroleininnateimmunityandarealsorequiredforthedevelopmentofanadaptiveirflmuneresponse，bridginginnateandadaptiveimmunity．ThepresentstudywasconductedtoexplorethepotentialroleofTolllikereceptoront
6、hegooseimmunity,andaccumulatealternativegeneticmaterialforthegoosebreedingfordisease-resistant．WeclonedthecDNAofTLR2-1and15byRT-PCR,SMART-RACEinMaGanggoose，aswelltheirexpressionprofileindifferenttissuesbyqRT-PCR．Theresultsshowedthat：(1)TheclonedgooseTLR2-lfulllengtheDNAexhibited3119bpinlength，inclu
7、dinga5'-terminal(UTR)of359bp，a3'-terminalfOTR)of378bpandanopenreadingframe(ORF)of2382bpencoding793aminoacideshasacalculatedmolecularmassof90．17kDa,atheoreticalpIof7．73，andaputativesignalsecretionpeptide33勰i
