genistein對livin基因表達(dá)和惡性黑素瘤libr細(xì)胞凋亡、周期及增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究

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1、分類號:R75單位代碼:10752密級:公開學(xué)號:2009209寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文Genistein對Livin基因表達(dá)和惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞凋亡、周期及增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究EffectsofGenisteinonexpressionoflivinandApoptosis,CycleandProliferationinhumanmalignantmelanomaLiBrcells學(xué)位申請人:楊一飛指導(dǎo)教師:王昊申請學(xué)位門類級別:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:皮膚病與性病學(xué)研究方向:惡性黑素瘤的基因治療所在學(xué)院:臨床醫(yī)學(xué)院論文完成日期:二〇一二年四月寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生

2、院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeEffectsofGenisteinonexpressionoflivinandApoptosis,CycleandProliferationinhumanmalignantmelanomaLiBrcellsStudent’sName:YangYifeiSupervisor:WangHaoSubjectCategory:MedicalScienceMajor:DermatologyandVenereologySpecialty:Genethe

3、rapyofmalignantmelanomaSchool:NingxiaMedicalUniversityCompletionDate:Apr.2012寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果,無抄襲及編造行為。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外,本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。論文作者簽名_____論文導(dǎo)師簽名_____年月日年月日寧夏醫(yī)科大學(xué)關(guān)于學(xué)位論

4、文使用授權(quán)的聲明寧夏醫(yī)科大學(xué)有權(quán)保留使用本人學(xué)位論文,同意學(xué)校按規(guī)定向國家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許被查閱和借閱。本人授權(quán)寧夏醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。可以公布(包括刊登)論文的全部或部分內(nèi)容。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名_____論文導(dǎo)師簽名_____年月日年月日寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文中文摘要Genistein對Livin基因表達(dá)和惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞凋亡、周期及增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的闡明Genistein對惡性黑素瘤LiB

5、r細(xì)胞Livin基因表達(dá)的影響和對惡性黑素瘤細(xì)胞凋亡、周期及增殖的作用,為進(jìn)一步探索Genistein治療惡性黑素瘤的可能性和揭示Genistein的抑癌機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法分別在基因和蛋白水平上應(yīng)用RT-PCR和Westernblot檢測、確認(rèn)惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞Livin基因的表達(dá);在體外以高表達(dá)Livin基因的惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞為試驗(yàn)對象,應(yīng)用RT-PCR檢測Genistein作用LiBr細(xì)胞后Livin基因的表達(dá)變化,并初步探討其劑量及時(shí)間效應(yīng);取最適濃度的Genistein作用LiBr細(xì)胞后應(yīng)用AnnexinV-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測

6、其對細(xì)胞凋亡的影響;應(yīng)用PI單染流式細(xì)胞術(shù)分析其對細(xì)胞周期的改變;應(yīng)用Westernblot檢測其對凋亡效應(yīng)蛋白caspase-3表達(dá)的影響及應(yīng)用MTT比色法檢測其對細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果經(jīng)RT-PCR和Westernblot檢測,惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞高表達(dá)Livin基因;Genistein作用LiBr細(xì)胞后能顯著下調(diào)Livin基因表達(dá),并且下調(diào)過程呈劑量和時(shí)間依賴關(guān)系,40umol/L可達(dá)到最大下調(diào)效應(yīng),其下調(diào)LivinmRNA的最大效應(yīng)出現(xiàn)在作用后96h;Genistein可顯著誘導(dǎo)LiBr細(xì)胞凋亡,增加LiBr細(xì)胞早、晚期凋亡率,引起細(xì)胞G0/G1期阻滯,

7、并能顯著下調(diào)caspase-3蛋白表達(dá)及抑制細(xì)胞增殖。結(jié)論Genistein能顯著下調(diào)惡性黑素瘤細(xì)胞Livin基因表達(dá),并可誘導(dǎo)LiBr細(xì)胞凋亡、使細(xì)胞增殖周期進(jìn)展受阻、抑制細(xì)胞增殖。關(guān)鍵詞Genistein,惡性黑素瘤,Livin,細(xì)胞凋亡,細(xì)胞周期,細(xì)胞增殖I寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文英文摘要EffectsofGenisteinonexpressionoflivinandApoptosis,CycleandProliferationinhumanmalignantmelanomaLiBrcellsAbstractObjectiveClarifyGenis

8、teinonthecel

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