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《亞慢性苯暴露對小鼠精子生成的影響及表觀遺傳機制研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)論文題目：堊慢絲苤墨噩牡叢!基猹王生盛趁絲喧區(qū)蠢理遺佳扭劍砑塞答辯委員會主席：曾±基數(shù)拯答辯委員會成員：黃陳平教授酆紅握塾堡萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學碩士學位論文目錄中文摘要．．．．?．．?．．．．．．．．??．．．?．?．．．．．．．．．．．．．1英文摘要?．．．．．．．．．．．?????．．?．．?．．．．．．．?3前言．．．????????????????．．6材料與方法???????．???．?????9結果．．．．．．．?．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．?．?．．．．．．．．．19討論?．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
2、．?．．．．．．．．．．．．．．．．?26附錄．．．．．?．．．．．．．?．．．．．．．．．．．．．．．．．．．?．．．．．．．．．．．．33致謝．．．．．．．．．．．．?．．．．．．．．．．．．．?．．．．．．．．．．．．．?．．．．．34綜述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．??．．．．．．??．．．．．．．．．．．35學位論文獨創(chuàng)性聲明????????????．．43關于學位論文使用授權聲明．．．??????．．．．．．．?．43萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要亞慢性苯暴露對小鼠精子生成的影響及表觀遺傳機制研究背景：苯被廣泛應用于工業(yè)生產(chǎn)和日常
3、生活，暴露難于避免。盡管苯主要損害造血系統(tǒng)，但苯的雄性生殖毒性也被一些研究所報道。目前己觀察到苯接觸工人的精子數(shù)量下降，異常形態(tài)精子比例增加，精子DNA損傷，非整倍體和染色體結構畸變精子的比率增加等現(xiàn)象。毒理學研究也顯示，亞慢性苯吸入暴露可導致實驗小鼠的精子濃度降低、活力下降，提示苯對精子生成具有明確的毒性作用。然而，苯對生精過程不同階段的影響特征還不清楚。表觀遺傳學(epigenetics)的興起，為苯毒性機制研究提供了新的視角和方向。其中，DNA甲基化與MicroRNA(miRNA)調(diào)控是表觀遺傳調(diào)控的主要內(nèi)容，并且在睪丸發(fā)育及精子生成等過程中也起著重要的調(diào)控作用。
4、本研究通過檢測亞慢性苯暴露對小鼠精子生成的損傷狀況，以揭示苯對生精過程的損傷特征：并通過相關基因甲基化的變化和miRNA的表達的檢測，以探討苯對精子生成損傷的表觀遺傳機制。材料方法：1．亞慢性苯吸入染毒：6～8周齡的C57BL／6J雄性小鼠，按體重隨機分為3組，分別為對照組、lppm和100ppm苯暴露組。模擬職業(yè)暴露情況，實施每天8小時，每周5天，共13周的亞慢性動式吸入染毒。2．睪丸病理學檢測：HE染色觀察睪丸組織病理學改變。3．精細胞marker基因表達檢測：選取精子發(fā)生中階段特異性表達基因，作為不同生精階段精細胞的marker，選定的marker基因有代表A型精
5、原細胞的Plzf，分化型精原細胞的Stra8，初級精母細胞I拘Sycp3，圓形精子的Tnpl、Tnp2，長形精子的Akap4，以及魚精蛋白Prml、Prm2，采用實時熒光定量PCR檢測睪丸marker基因的mRNA表達。4．DNA甲基轉移酶表達檢測：選取4種DNA甲基轉移酶Dnmtl、Dnmt3a、Dnmt3b、Dnmt31，用實時熒光定量PCR檢測其睪丸組織的mRNA表達。5．基因甲基化程度檢測：利用飛行時間質(zhì)譜法(MALDI．TOF．MS)定量檢測Tnpl、Prm2基因的甲基化水平。6．miRNA表達檢測：利用PicTar、T撕getScan和MiRanda三個軟件
6、共同預測基因的靶miRNA。依據(jù)預測結果，并結合文獻報道，分別選取了"TnpI的靶miRNA萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學碩士學位論文是miR．181b．5p、Tnp2的靶miRNA是miR．122．5p、Prml的靶miRNA是miR-484、Prm2的靶miRNA是miR．24．3p，采用實時熒光定量PCR檢測睪丸miRNA表達。結果：1．睪丸病理學檢測分析：苯暴露組小鼠睪丸組織呈現(xiàn)嗜酸性染色增強，lppm組出現(xiàn)少量核溶解和細胞脫落現(xiàn)象，其病理意義尚不明確；100ppm組小鼠睪丸生殖細胞變性、壞死的明顯增多，管腔中心無(或少)細胞的曲細精管數(shù)量明顯增多，表明亞慢性苯暴露可引起
7、小鼠睪丸的病理改變。2．marker基因表達分析：與對照組比較，苯暴露組marker基因Plzf、Stra8、Sycp3、Akap4的mRNA表達均未顯示統(tǒng)計學差異；而lppm組Prm2I拘mRNA表達顯著降低(戶
