葡萄糖(glu) 葡萄糖氧化酶終點法

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1、項目葡萄糖(GLU)方法葡萄糖氧化酶終點法目錄1.檢測原理2.標本采集與處理2.1受檢者的準備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標本處理3.試劑3.1試劑3.2校準血清3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計算7.操作性能7.1精密度7.2準確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測原理在葡萄糖氧化酶的作用下,β-D-葡萄糖氧化生成過氧化氫和葡萄糖酸。過氧化氫在過氧化物酶的存在下與苯酚、4-氨基安替比林氧化縮合成紅色醌式染料。此染料在500nm處有最大吸收峰,其吸光度值與葡萄糖含量成正比。GODβ-D-葡萄糖+H2O+

2、O2-----------H2O2+D-葡萄糖酸PODH2O2+4-氨基安替比林+苯酚----------醌亞胺(紅色)+H2O2.標本采集與處理2.1受檢者的準備:病人空腹12h,不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應用影響測試項目的藥物。此外,對于體檢者,采血的季節(jié)都應做相關記錄,因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動,為了前后比較應在每年同一季節(jié)檢驗。應囑體檢對象在抽血前24小時內不做劇烈運動。有些藥物長期應用,可使患者糖代謝發(fā)生障礙,引起血糖增高,因而應當在使用這些藥物期間定期監(jiān)測血糖,避免引起高血糖。常用藥物中可致血糖增高的有以下幾類?!?/p>

3、 糖皮質激素:糖皮質激素藥物如強的松、氫化可的松、抗炎松等,臨床應用廣泛。糖皮質激素可通過三條途徑影響糖代謝:(1)增強糖元分解;(2)使糖異生途徑活動;(3)減少外周組織對葡萄糖的作用,因而血糖升高。如果大劑量或長期使用糖皮質激素治療,應密切監(jiān)測血糖,根據(jù)情況適當減少劑量或配合降糖藥物應用?! 〖谞钕僦苿杭谞钕偌に兀椎獍贰⒓谞钕偎?、甲狀腺球蛋白),可以促進葡萄糖的吸收,加速糖元分解及糖異生,使血糖增高。因而應用甲狀腺制劑時應嚴密觀察,特別是糖尿病病人需用甲狀腺制劑時應慎重給藥?! ∧I上腺素:腎上腺素可動員肝及肌肉的糖元分解,使血糖升高。一般來說,腎上腺素及擬腎上腺素制劑很少

4、會長時間就用,所以對血糖的影響不大?! ±騽亨邕纛惱騽╅L時間應用,可使病人的糖耐量降低而升高血糖,可能是抑制胰島素分泌或使糖元分解的緣故。噻唪類利尿劑致高血糖大多出現(xiàn)在用藥2-3個月后,停藥能自行恢復?! ”茉兴帲喊ù萍に嘏c黃體酮樣衍生物,這些藥物均具有降低糖耐量和升高血糖的作用。因此患有糖尿病的育齡婦女,不能服用這些避孕藥?! ‘悷熾拢寒悷熾率强菇Y核病的一線藥物,治療結核病時用藥期至少在半年以上。長期用異煙肼可影響糖代謝,使糖耐量降低,因此在用藥期間應定期檢查血糖并采取相應措施。當糖尿病合并肺結核時,異煙肼忌與磺脲類降糖藥合用,否則可能產(chǎn)生不可逆糖尿病?! ∑渌喝鐭熕?/p>

5、及其衍生物、吩噻嗪類藥物、生長素、促腎上腺皮質激素、雙香豆素、去甲基麻黃堿等藥物,均有增高血糖濃度的作用,使用時應注意監(jiān)測血糖,避免引起高血糖或糖尿。2.2靜脈采血:除非是臥床的病人,一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內外的分布,會影響測試項目的濃度。在采血前至少應靜坐5分鐘,一般從肘靜脈取血,使用止血帶的時間不超過1分鐘,穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑:血漿使用EDTANa2(1mg/mL)作為抗凝劑。2.4標本處理:血標本室溫放置30min~45min后離心分離血清或血漿,在兩小時內檢測完畢;如兩小時內不能檢測完畢,將離心分離血清或血漿置潔凈試管加蓋2-8℃保存。

6、3.試劑3.1試劑:本科使用湖南永和陽光科技有限責任公司GLU試劑盒,為液體單一試劑,各組分如下:組成濃度磷酸鹽緩沖液0.1mmol/LPH=7.5葡萄糖氧化酶(GOD)>15u/mL過氧化物酶(POD)>1.5U/mL變旋酶>2.0U/mL4--氨基安替比林0.25mmol/L苯酚0.75mmol/L穩(wěn)定劑3.2:校準血清使用湖南永和陽光科技有限責任公司提供的40項校準血清。校準頻次:空白定標:每日需做試劑空白定標。全點定標:試劑換批號使用時或質控結果超過規(guī)定的2SD范圍,需要全點定標。3.3試劑與校準血清的穩(wěn)定性:原包裝試劑儲存在2-8℃至標簽所示失效日期。試劑開瓶后,在儀器

7、中至少可保存30天。試劑儲存在18-22℃穩(wěn)定28天,試劑應避免污染。試劑顏色為無色至淺粉色,當試劑變色或者在546nm的吸光度高于0.15ABS,按照試劑失效處理。多項校準血清在2-8℃儲存至標簽所示失效日期,復溶后-20℃保存,可穩(wěn)定一個月,只可凍融一次,避免反復凍融。參見校準血清說明書。試劑盒配備的水標準液在2-8℃儲存至標簽所示失效日期,開瓶后2-8℃儲存避免污染,可穩(wěn)定2個月。4.儀器KONELAB30型號儀器。性能:波長500nm,儀器測定吸光度的靈敏度應達到0.00

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