葡萄糖(GLU)測定11

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1、LaboratoryMedicineDepartment,TianjinBaodiHospital天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作文件葡萄糖（GLU）測定1.第1頁頁首內(nèi)容葡萄糖（GLU）測定（HK法）天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗科操作規(guī)程文件號：CZGC/SH/014第四版共3頁本規(guī)程每2年復(fù)審一次復(fù)審日期：2013年5月1日復(fù)審人：陳玉良（簽名）規(guī)程編寫者：崔樹明審批者：陳玉良批準(zhǔn)日期：2013年5月6日實施日期：2013年5月10日文件分發(fā)部門和/或個人：檢驗科醫(yī)務(wù)科；保管者：王文志（簽名）院長辦公室；保管者：劉會芹（簽名）院檔案室；保管者：劉會芹（簽名）檢驗科；主任：陳玉良（簽名）臨床化

2、學(xué)檢驗室：崔樹明（簽名）2.原理在己糖激酶催化下，葡萄糖在三磷酸腺苷（ATP）和鎂離子存在的情況下被已糖激酶（HK）磷酸化，產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和二磷酸腺苷（ADP）。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PDH）使G-6-P氧化為6-磷酸葡萄糖，同時使煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）還原為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，還原（NADH）。在340/380nm的吸光度變化與標(biāo)本中存在的葡萄糖數(shù)量成正比。HK葡萄糖+ATP-------------﹥G-6-P+ADPMg2+G6PDHG-6-P+NAD+-------------﹥6-磷酸葡萄糖+NADH+H+3.樣本采集與處理：3.1病人準(zhǔn)備：

3、無特殊要求。3.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。3.3標(biāo)本類型：無溶血的血清或肝素化的血漿。3.4標(biāo)本穩(wěn)定性：樣本須在30分鐘內(nèi)分離血清或血漿，2～8℃下冷藏的血清或血漿可穩(wěn)定24小時，-20℃冰凍起來可穩(wěn)定1個月。3.5樣本處理：血標(biāo)本應(yīng)盡快送檢驗室。室溫下放置10-15min后離心分離血清或血漿置樣品杯中待測。4.試劑3LaboratoryMedicineDepartment,TianjinBaodiHospital天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作文件4.1試劑：本科使用使用華氏亞太醫(yī)學(xué)科技有限公司葡萄糖檢測試劑盒，LOT：041211。此試劑盒為液體單一試劑，即開既用

4、，無須特殊準(zhǔn)備。4.2試劑主要成分如下：三乙醇胺緩沖液50mmol/LATP1.5mmol/LNAD0.7mmol/L己糖激酶2.0KU/L葡萄糖-6-磷酸脫氫酶3.0KU/L注意：1.此試劑為體外診斷用。2.不要入口，吞下有害。3.保護劑為疊氮鈉，與下水管中的銅反應(yīng)形成爆炸性化合物，即使只含有少量的疊氮鈉，如果排向下水道請用大量的水沖洗。4.3試劑的儲存與穩(wěn)定性：4.3.1未開封的試劑于2-8℃保存，穩(wěn)定至有效期。4.3.2已開封的試劑在陰暗處（2-8℃）可穩(wěn)定一個月。4.3.3避光保存，用后立即蓋好封蓋。4.3.4發(fā)現(xiàn)試劑中有沉淀物禁止使用。4.4校準(zhǔn)血清：BECKMAN公司提供，產(chǎn)品批號

5、為0115。為凍干品，未開封者2-8℃保存至有效期。臨用前用5ml去離子水復(fù)溶，放置30min，混勻待完全溶解后使用。復(fù)溶的血清2-8℃可穩(wěn)定4天。當(dāng)有以下情況時需要重新定標(biāo)：1．換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時。2．當(dāng)儀器做完保養(yǎng)后。3．重要零件更換時。4.5質(zhì)控品：RONDOX公司提供，LECEL-2LEVEL-3，產(chǎn)品批號為759UN及551UE。凍干品，未開封者2-8℃保存至有效期。使用前用5ml去離子水復(fù)溶，30分鐘后輕輕混勻，待完全溶解后使用。復(fù)溶后的血清2-8℃可穩(wěn)定4天。每天隨樣品一起測定，測定值應(yīng)在允許范圍以內(nèi)。5.儀器奧林巴斯AU2700全自動生化分析儀6操作6.1AU2700

6、開機6.1.1檢查W1、W2清洗液及稀釋液有足夠量，不足時補充；6.1.2打開水機水源的自來水閥門，按水機前面板的（POWERON）鍵，開啟水機；6.1.3按分析儀前面板的（POWERON）鍵，開啟分析儀主機；6.1.4確認(rèn)打印機為開機并處于聯(lián)機狀態(tài)，開啟中文機；6.1.5確認(rèn)儀器上在線試劑的位置是否正確、數(shù)量（體積）是否充足，不足時添加，并在系統(tǒng)狀態(tài)下的試劑狀態(tài)檢查試劑。6.2開始分析6.2.1將蘭架第一位置放水，黃架相應(yīng)位置放入校準(zhǔn)液；6.2.2將蘭架、黃架、白色標(biāo)本架放入樣品臺上；6.2.3用鼠標(biāo)點擊在屏幕最上方（開始分析）圖標(biāo)；3LaboratoryMedicineDepartment

7、,TianjinBaodiHospital天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院檢驗科標(biāo)準(zhǔn)操作文件6.2.4點擊屏下方（EXIT）圖標(biāo)，退到主屏幕。6.3分析參數(shù)樣品體積1.6ul溫度37℃試劑1體積240ul方法終點法試劑2體積0.0ul單位mmol/L波長340nm定標(biāo)方式AB讀點0-27完整的實驗參數(shù)與操作程序可以在AU2700用戶手冊中查到。7計算：結(jié)果無須手工計算，結(jié)果自動以mmol/L輸入微機打印。報告