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1、實驗診斷學實驗指導蘭州大學第一醫(yī)院實驗診斷教研室實習的目的與要求:一、實習目的通過實習學習有關檢驗的操作方法,熟悉和了解其基本技術,以便進一步理解課堂講授的內容,達到理論聯(lián)系實際的目的。二、實驗室守則1、準時參加實習,進實驗室時必須穿好白大衣,遵守課堂紀律注意保持實驗室的整齊與安靜。2、實驗前,將學習手冊加以預習。實習開始,仔細聽取講解,認真觀察示范操作及示教標本,先明了實驗原理和操作步驟后再操作。3、實驗過程中要認真操作,仔細觀察并聯(lián)系有關理論進行思考,注意檢驗數據的準確性和嚴謹性。4、愛護儀器,節(jié)約試劑,用前檢查,用后清點,損壞時要登記賠
2、償。5、注意安全,凡病人標本均應視為有傳染性,應防止污染自己及他人每次實習課后認真洗刷實驗用具,并輪流搞好實驗室的清潔衛(wèi)生。6、認真作好實驗記錄,正確地書寫實驗報告并于每次實習后交給輔導教師。實驗成績共20分(每次實驗3分,提問2分),直接加到期末考試成績中(卷面成績滿分80分)。目錄第一單元血液一般檢查………………………………………第二單元尿及糞便常規(guī)檢查……………………………………第三單元漿膜腔穿刺液與脊髓液檢查………………………….第四單元檢驗報告單的閱讀及分析…………………………….第一單元血液一般檢查一、紅細胞計數(redblood
3、cellcount)[要求]掌握末梢采血技術,熟悉細胞計數板的結構及用法,進行紅細胞計數,并記住參考值、臨床意義。[原理]一定量的血液,經一定量的等滲性溶液稀釋后,充入血細胞計數室中,于顯微鏡下計數一定體積內的紅細胞,并求得每升血液內的紅細胞數。.[儀器試劑]1、血細胞計數板,為一特制的長方形硬質玻璃板,中間l/3部分具有“H”形槽溝,橫槽溝上下的平臺部分各深0.1mm,成為二個計數臺(池),每臺有一個計數區(qū)域,分為9個大方格,每一個大方格的面積為lmm2,四角的每個大方格又劃分為16個中方格,供白細胞計數用。中央的一個大方格用雙線劃分為25
4、個中方格,每中方格又劃分為16個小方格,共為400個小方格,供紅細胞計數用。計數臺之上覆以特制的蓋片(厚度0.4mm、表面平直、質地較硬)后構成計數室。每個大方格的體格是0.1mm3(1mm×lmm×0.1mm),參閱圖1,2及3。2、容量準確的微量吸管(具有10ul及20ul刻度)3、紅細胞稀釋液(Hayem稀釋液)氯化鈉1.0ɡ硫酸鈉(Na2S04·10H20)5.0ɡ氯化高汞5.0ɡ蒸餾水加至200ml過濾后備用此稀釋液為等滲性溶液,比重較大,使紅細胞易于懸浮,并有防腐作用。4、光學顯微微5、消毒、穿刺用具為75%酒精棉球、干棉球、消毒
5、刺血針。[方法]1、準確加紅細胞稀釋2m1于一中號試管中,塞緊管口,并拭凈血細胞計數板及蓋玻片。2、用75%酒精棉球消毒被檢人左手無名指尖側腹部。3、待酒精揮發(fā)后.由左手捏緊取血部位,以右手持消毒穿刺針快速速人約2~3mm深。拭去第一滴血后,用微量吸管準確吸血到l0ul處,拭去管尖外余血,將吸管插到稀釋液中迅速地把血液放出,并用上清液洗凈吸管內殘存血液,立即輕輕振蕩混勻,用消毒干棉球按壓穿刺傷口。4、進一步混勻紅細胞懸液,然后用尖吸管吸取數滴(或用細玻璃棒醮取一滴,充入計數室內準備計數。充細胞懸液時應防止產生氣泡,要一次充好,液量多少適宜。水
6、平位靜置2~3min待細胞沉下。5、用低倍鏡找出紅細胞計數區(qū)域。計數中央大方格中的四個角和中心的五個中方格內的紅細胞。凡在中方格雙線上的紅細胞按壓左側及上側線者計入。6、將5個中方格內紅細胞數×5×10×200×106=5個中方內紅細胞數×1010=紅細胞數/L,報告方式:Δ、ΔΔ×1012/L上式中×5表示把5個中方格內紅細胞數折算為1個大方格的紅細胞?!?0表示把1個大方格容積(0.1u1)折算為lul?!?00表血液稀釋倍數?!?06表示將ul換算為L。Δ、ΔΔ×1012表示將紅細胞數以小數點前保留1位數字乘以1012形式報告。如數得紅
7、細胞為450個則報告為4.5×1012/L。[注意事項]1、取血部位的皮膚必須正常,2、一人一針,防止交叉感染。3、微量吸管的容量必須準確,內腔一定要干燥,4、取血動作必須迅速。若作血紅蛋白和紅細胞計數兩項時,應先取紅細胞計數的標本,后取血紅蛋白測定的標本。5、充液之前務必充分混勻,否則因久置而紅細胞下沉,導致計數值錯誤地偏低。6、一般于低倍鏡下計數即可。為區(qū)別異物或殘渣,將可疑目標置低倍鏡視野中心,然后轉高倍鏡觀察。7、白血病患者,其白細胞明顯增多時,則應進行校正,8、高球蛋白血癥病人,其血液加稀釋液后,迅速出現顆粒狀渾濁,高汞將球。此時可
8、換用生理鹽水作稀釋液,及時計數。9、含高效價冷凝集素的病人,當血加入稀釋液之后,應事先將紅細胞稀釋液管加溫后再放入血液或將紅細胞懸液管置溫箱內待冷凝現象消失后再迅速