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《綿羔羊jivet技術(shù)相關(guān)影響因素的研究》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:密級:學(xué)號:2009108010單位代碼:10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文綿羔羊JIVET技術(shù)相關(guān)影響因素的研究研究生郭洪石國慶(研究員)指導(dǎo)教師萬鵬程(副研究員)申請學(xué)位門類級別農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位學(xué)科、專業(yè)名稱動物遺傳育種與繁殖研究方向動物繁育技術(shù)所在學(xué)院動物科技學(xué)院中國新疆石河子··2012年6月EffectsofsomefactorsonJIVEToflambsADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricultu
2、reByGuoHong(AnimalGenetics,BreedingandReproduction)DissertationSupervisor:Researcher.Shiguo-qingJune·2012學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的學(xué)位論文是在我導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果據(jù)我。所知,除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含其他個(gè)人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中作了明確的說明并表示謝意。。研究生簽名:時(shí)間:年月日學(xué)位論文版權(quán)授權(quán)書本人完全了解石河子大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位、論文的規(guī)定,學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向
3、國家主管部門或指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版有權(quán)將學(xué)位論文用于贏利目的的。少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書館被查閱有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行檢。索有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要。匯編出版保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。。研究生簽名:時(shí)間:年月日導(dǎo)師簽名:時(shí)間:年月日本研究經(jīng)費(fèi)資助由國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目基于羔羊體外成熟卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組分析及核質(zhì)成熟相關(guān)機(jī)制研究項(xiàng)目編號31160460兵團(tuán)博士基金優(yōu)質(zhì)綿羔羊卵泡資源庫高效利用技術(shù)研究項(xiàng)目編號2010JC10國家科技支撐項(xiàng)目子課題超細(xì)型細(xì)毛羊新品種(系)選育與關(guān)鍵技術(shù)研究項(xiàng)目編號2011BAD28B05-1-1Thepr
4、esentstudywassupportedbygrants(31160460)fromtheNaturalScienceFoundationChina,BintuanPhDFoundation(2010JC10)andNationalKeyTechnologiesR&DProgram(2006BAD14B08-05)摘要幼畜胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)(JIVET)是集幼畜超數(shù)排卵,卵母細(xì)胞的體外成熟和體外受精,胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)為一體的生物高新技術(shù)體系。本研究就羔羊卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)體系優(yōu)化,品種對羔羊超數(shù)排卵和卵母細(xì)胞發(fā)育能力的影響以及羔羊和成年羊卵母細(xì)胞核質(zhì)成熟比較、
5、囊胚細(xì)胞數(shù)量比較。為建立高效的幼畜胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)體系進(jìn)行理論探索研究。實(shí)驗(yàn)一,研究了在成熟液中添加不同濃度的EGF和β-巰基乙醇對羔羊卵母細(xì)胞發(fā)育能力的影響及其和成年羊卵母細(xì)胞體外發(fā)育的不同。并將體外受精胚胎進(jìn)行了移植,為研究利用綿羊羔羊卵母細(xì)胞生產(chǎn)后代提供理論和技術(shù)方法。研究結(jié)果表明,添加不同濃度的EGF對哈薩克羔羊卵母細(xì)胞卵裂率和囊胚率影響不顯著(P>0.05)。成熟液中添加100μMβ-巰基乙醇能顯著提高羔羊卵母細(xì)胞囊胚率(P<0.05),但對卵裂率影響不顯著(P>0.05)。羔羊卵母細(xì)胞卵裂率和囊胚率均顯著低于成年羊(P<0.05)。添加100μMβ-巰基乙醇
6、能顯著提高羔羊卵母細(xì)胞正常受精率(P<0.05),且與成年羊卵母細(xì)胞受精率差異不顯著(P>0.05)。未添加β-巰基乙醇多精入卵率顯著高于成年羊(P<0.05),而添加100μMβ-巰基乙醇多精入卵率與成年羊差異不顯著(P>0.05)。成熟液中不添加β-巰基乙醇時(shí)未受精率(20.0%)高于成年羊組(12.3%)和β-巰基乙醇(13.5%),但差異不顯著(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,β-巰基乙醇能提高哈薩克羔羊卵母細(xì)胞發(fā)育能力,提高正常受精比例并減少多精子受精的發(fā)生。但羔羊卵母細(xì)胞發(fā)育能力仍顯著低于成年羊。哈薩克羔羊卵母細(xì)胞體外成熟、受精和發(fā)育獲得的2-8細(xì)胞胚胎進(jìn)行輸
7、卵管移植,14只受體羊中7只妊娠,妊娠率為50.0%;共產(chǎn)羔9只,其中8只存活。實(shí)驗(yàn)二,比較羔羊和成年羊卵母細(xì)胞核成熟和質(zhì)成熟,研究兩種卵母細(xì)胞間的差異。實(shí)驗(yàn)分別對羔羊和成年羊體外成熟培養(yǎng)0、6、12、18和24h的卵母細(xì)胞取樣后對α微管蛋白和染色體進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,以研究羔羊和成年羊卵母細(xì)胞核成熟的差異;分別對羔羊和成年羊體外成熟培養(yǎng)12和24h的卵母細(xì)胞取樣后進(jìn)行皮質(zhì)顆粒染色,以比較羔羊和卵母細(xì)胞質(zhì)成熟情況。結(jié)果表明,羔羊和成年羊卵母細(xì)胞在0h和6h時(shí)大部分處于GV和GVBD期。0h時(shí)羔羊卵母細(xì)胞處于GVBD期的卵母細(xì)胞比例顯著低