廣州市吸毒強(qiáng)戒人員hiv感染流行病學(xué)調(diào)查及基因型分析

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1、南方醫(yī)科大學(xué)同等學(xué)力碩士學(xué)位論文廣州市吸毒強(qiáng)戒人員HIV感染流行病學(xué)調(diào)查及基因型分析TheepidemiologicalsurveyandgenotypeanalysisagainstHIVfromdrugusersinGuangZhou課題來(lái)源：自選課題專業(yè)名稱學(xué)位申請(qǐng)人指導(dǎo)教師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員論文評(píng)閱人臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)石澤林吳炳義教授吳曉蔓教授劉華章副主任醫(yī)師裘宇容教授鄭磊教授曾方銀教授2012年11月20日廣州碩士學(xué)位論文廣州市吸毒強(qiáng)戒人員HIV感染流行病學(xué)調(diào)查及基因型分析碩士研究生：石澤林指導(dǎo)教師：吳炳義教授摘要研究背景和目的HIV病毒已經(jīng)對(duì)全球人類的健康造成嚴(yán)重

2、威脅，成為全球關(guān)注的熱點(diǎn)。HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原體，目前還沒有針對(duì)HIV-I的疫苗，早期診斷和制定預(yù)防措施是防止HIV-1傳播的關(guān)鍵。靜脈吸毒者是HIV高發(fā)人群，而且在吸毒者之間的流行和傳播比較嚴(yán)重，要想制定預(yù)防措施，了解其詳細(xì)的特征極其重要。因此本研究的目的是了解吸毒強(qiáng)戒人群中HIV的感染情況以及影響H1V感染的相關(guān)危險(xiǎn)行為學(xué)特征，分析吸毒人群HIV感染者中HIV-I的基因序列特征，確定其感染的基因亞型分布和各亞型的流行趨勢(shì)。研究方法研究對(duì)象為2010年1月-2010年12月期間在戒毒管理局醫(yī)院接受治療的強(qiáng)制戒毒人員1085名，其中包括男性822例，女性263例，年

3、齡從16歲至49歲。使用自行設(shè)計(jì)的調(diào)查問(wèn)卷，對(duì)戒毒人員進(jìn)行一對(duì)一的問(wèn)卷調(diào)查，內(nèi)容包括戒毒者的社會(huì)行為學(xué)特征，如姓名、年齡、職業(yè)、文化程度以及籍貫；吸毒方式、吸毒時(shí)問(wèn)以及是否共用注射器等戒毒人員的吸毒相關(guān)因素；同時(shí)調(diào)查性行為與HIV感染相關(guān)的影響因素，包括婚姻狀況、性伴侶人數(shù)和安全套使用情況。每例研究對(duì)象采集2ml靜脈血，加入EDTA．K2抗凝管中，按照衛(wèi)生部中國(guó)疾病預(yù)防控摘要制中心2009年發(fā)布的《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》的有關(guān)要求檢測(cè)血漿中的HIV抗體，抗體初篩使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法，初篩陽(yáng)性的送廣州市疾病預(yù)防控制中心，使用免疫印跡法進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，若免疫印跡法確認(rèn)為陽(yáng)性定義為H

4、IV感染，最終結(jié)果使用SPSS13．0軟件，分類資料使用行×列表卡方檢驗(yàn)，等級(jí)資料用線性趨勢(shì)檢驗(yàn)，陽(yáng)性事件的影響因素分析采用Logistic回歸模型，P<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從HIV確認(rèn)陽(yáng)性的標(biāo)本中隨即抽取36例，從初篩陰性的樣本中抽取15例，共51份樣本，采集全血樣本2ml，加入EDTA．K2抗凝管中，使用德國(guó)凱杰試劑盒進(jìn)行基因組DNA的提取，用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)核酸濃度和純度。在Genbank中查找HIVgag基因的序列，序列號(hào)為NC001802，按照引物設(shè)計(jì)的基本原則，使用軟件primerpremier5．0設(shè)計(jì)引物，并使用Oligo6．0進(jìn)行引物評(píng)估，在NCBI中進(jìn)

5、行blast以驗(yàn)證引物的特異性，設(shè)計(jì)的引物包括外引物和內(nèi)引物，其中外引物為引用文獻(xiàn)的引物，外引物的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為1243bp，內(nèi)引物的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為290bp，所有引物均在英濰捷基公司合成。使用外引物和內(nèi)引物進(jìn)行巢式PCR，PCR以后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，若有目的條帶，送去華大基岡公司進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序結(jié)果使用軟件Chromas2進(jìn)行分析，并通過(guò)美國(guó)拉莫斯國(guó)家實(shí)驗(yàn)室HIV核酸數(shù)據(jù)庫(kù)的BLAST工具與國(guó)際參考毒株進(jìn)行比對(duì)，確認(rèn)所屬HIV的基因亞型。研究結(jié)果在調(diào)查的1085名廣州市吸毒強(qiáng)戒人員(HIV確認(rèn)陽(yáng)性107名，陽(yáng)性率為9．86％)：本調(diào)查中包括男822名，女263名，戶籍主要分布在廣

6、東、廣西、湖南、湖北及四川省；年齡16--49歲，以20～30歲和3叫0歲居多，分別占總?cè)藬?shù)的百分比為26．9％和46．4％，相應(yīng)地HIV感染的陽(yáng)性率也居多，3¨0歲年齡組陽(yáng)性率最高，為10．9％，進(jìn)行線性趨勢(shì)檢驗(yàn)，吸毒者各年齡組與HIV感染率無(wú)顯著線性趨勢(shì)睜2．040，P=0．154)；男性的感染率為10．8％，女性的感染率為6．8％，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義貨-3．560，P--0．059)。學(xué)歷中以初中文化程度的人數(shù)最多，占n碩士學(xué)位論文72．4％，其次為高中、中專文化，占18．9％，不同文化程度HIV感染的陽(yáng)性率不同，文化程度越低HIV感染的陽(yáng)性率越高，對(duì)不同文化程度所導(dǎo)致的感染率

7、進(jìn)行了線性趨勢(shì)檢驗(yàn)，結(jié)果表明HIV感染率與文化程度的下降呈線性相關(guān)(f=13．85，P<0．001)。在所調(diào)查的所有戒毒者中有88．1％以吸食海洛因?yàn)橹鳎?015名(占93．6％)吸毒者開始吸毒的方式為口服，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，有706名(占65．1％)發(fā)展成為靜脈吸毒，其次是燙吸和口鼻吸，采用注射方式者H1V感染率為12．3％，燙吸組為6．o％，口鼻吸組為3．2％，三者之間有顯著性差異貨=14．413，P=0．001)。在靜脈吸毒者中有446名存在共用注射器行為，占6