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1、北冬蟲夏草的人工培育技術實驗報告蛹蟲草又名北蟲草,為子囊菌亞門麥角菌目、麥角菌科真菌,迄今已檢測或分離到的生理活性物質(zhì)有蟲草素、蟲草酸、蛹蟲草多糖和超氧化物歧化酶等,藥效類似冬蟲夏草,具鎮(zhèn)靜、消炎、止血化痰、補精髓、抗腫瘤、抗缺氧等功效,對腎炎、肝炎、腫瘤、哮喘、神經(jīng)衰弱等疾病有明顯的治療效果。如今野生冬蟲夏草資源被過度開發(fā),數(shù)量銳減,價格暴漲,因此作為冬蟲夏草的理想替代品的蛹蟲草,近年來越來越受到人們的青睞,其種植量也不斷增加。下面將近年來的種植經(jīng)驗總結(jié)如下。1菌種的制作蛹蟲草菌種較其他品種的食用菌更容易退化,不出草現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生,要避免菌種退化一是從正規(guī)菌種經(jīng)營部門購買優(yōu)質(zhì)
2、菌種,其次就是要采用適合的保藏方法,并適時選擇好的菌株進行組織分離復壯。優(yōu)質(zhì)菌種的特征是菌絲體初期為白色,粗壯,絨毛狀,略有爬壁。受光線刺激的管壁與基質(zhì)結(jié)合處呈現(xiàn)黃色,隨著時間的延長,黃色逐漸變成橘紅色。1.1母種。母種培養(yǎng)基配方為去皮馬鈴薯200g、葡萄糖2Og、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂0.5g,瓊脂20g、自來水1000ml(pH值7.0),將配方中的各種物品稱量好,然后將土豆切成1cm3的小塊放入鍋中,加入l000ml水,待開鍋后保持10~15min,然后用2~3層紗布過濾,取濾液加入瓊脂粉繼續(xù)加熱直到瓊脂粉由固體變?yōu)橐后w,然后將其它成分加入濾液中定容到1000ml,將培
3、養(yǎng)基分裝到試管,每管培養(yǎng)基的加入量占試管容積的1/4~1/5,然后給試管加上棉塞,用牛皮紙包扎滅菌。將培養(yǎng)基配制好后,將保存母種轉(zhuǎn)接在母種培養(yǎng)基上,在22℃恒溫箱培養(yǎng)7~10d母種即可長滿試管斜面。1.2液體原種。液體原種培養(yǎng)基配方同母種,只是去掉瓊脂成分。將稱量好的土豆切塊、煮汁、過濾,然后加入配方中的其它成分,定容到1000ml,然后將配制好的培養(yǎng)基分裝入500ml三角瓶,每瓶100ml,每瓶加入l0一l5粒玻璃珠,高壓聚丙烯膜封口包扎,于1.1kg/m滅菌40rain接種固體母種后于25℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱,105次/mi11振蕩培養(yǎng)7~10d,液體培養(yǎng)基中充滿飽滿的菌絲球
4、,有菇類特有的香味,無酸、臭、霉等異味,此時液體原種培養(yǎng)成功。2栽培技術2.1培養(yǎng)基制作??梢栽耘嘤枷x草的培養(yǎng)基有多種,大米、小米、大小米混合米、麥仁等都可以,目前栽培效果最好的是大米。其配方為90%的大米、10%的蠶蛹粉。其制作方法是,首先將40g大米培養(yǎng)基放入罐頭瓶,再分別按1:1比例加入營養(yǎng)液,(營養(yǎng)液配方為:磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.5g、自來水1000inl,pH值7.0),然后用聚丙烯薄膜包扎,于高壓滅菌鍋內(nèi)1.1kg/m的壓力下滅菌lh。2.2接種。待培養(yǎng)基取出冷卻到常溫后,在消毒后的超凈工作臺或接種箱內(nèi)于酒精燈的無菌區(qū)內(nèi)接種,每瓶接入液體原種菌種約10ml,注
5、意接種后輕輕搖動瓶子,使菌種均勻覆蓋培養(yǎng)基表面。在此環(huán)節(jié)如果接入的菌種太少,不容易蓋滿培養(yǎng)基表面,致使發(fā)菌速度減緩,還容易導致局部培養(yǎng)基表面過于干燥,不利于菌絲的生長及出草。如果菌種量太大,容易導致培養(yǎng)基內(nèi)水分過多,尤其是瓶內(nèi)下部培養(yǎng)基,發(fā)菌過程中會出現(xiàn)菌絲生長到瓶內(nèi)一定位置后,在瓶壁上形成一黃色暈環(huán),菌絲不再向下生長。2.3菌絲體培養(yǎng)。將接種后的栽培瓶移入恒溫箱在25℃條件下,黑暗培養(yǎng),經(jīng)過15~20d,菌絲體長滿培養(yǎng)基。2.4轉(zhuǎn)色。待菌絲長滿瓶后,將瓶移入出菇室,溫度控制在25℃,空氣相對濕度控制在60%~70%,白天利用自然的散射光,晚上日光燈補光,一般7d左右瓶內(nèi)的菌
6、絲體由白色轉(zhuǎn)為橙黃色。2.5出菇。待菌絲體轉(zhuǎn)色后,在瓶口薄膜中央扎5~7個孔,培養(yǎng)室空氣相對濕度控制在85%~95%,溫度為l8℃~20℃,白天利用自然散射光照射,晚上用日光燈照射補光。很快在菌絲體表面會出現(xiàn)黃色的粒狀突起,此為蛹蟲草的原基,一般經(jīng)過7~10d,粒狀原基長成棒狀的子實體,待子實體長到5~8cm,上部棒狀部分出現(xiàn)小的粒狀突起(蛹蟲草有性繁殖體)時,即可采收。此環(huán)節(jié)注意事情:一是薄膜上的孔數(shù),數(shù)量太少,蛹蟲草會因為空氣不足,在培養(yǎng)基表面形成很多類似猴頭狀的球狀物,很難分化棒狀子實體?;蛘呒词狗只訉嶓w,但棒狀子實體上很難形成有性的繁殖體。其次就是空氣相對濕度,濕度
7、小子實體會貼壁生長,如果嚴重缺水,子實體會干枯而死。2.6采收。將滅菌鑷子冷卻,在無菌區(qū)打開瓶蓋,將蛹蟲草子實體夾出,待所有子實體全部取出后,清理料面,每瓶加約3ml滅菌水,蓋好薄膜,繼續(xù)培養(yǎng)15d可出第2茬。因二茬菇后瓶內(nèi)容易出現(xiàn)雜菌感染,不易出菇,且產(chǎn)量較低,故棄之不用。4月28日6月5日成品