捷蜥蜴線粒體基因組及有鱗目系統(tǒng)發(fā)育研究

捷蜥蜴線粒體基因組及有鱗目系統(tǒng)發(fā)育研究

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1、捷蜥蜴線粒體基因組及有鱗目系統(tǒng)發(fā)育研究專業(yè)名稱:生物化學(xué)與分子生物學(xué)申請(qǐng)人:陶春榮指導(dǎo)教師:秦新民教授論文答辯委員會(huì)拂遺遮委員:雨荻-1飄殤。j—I、吣/VC/^、、盞魚聾刻聾壅前男’IIIIIIIIIII)HI)1)))b1))lHlll))lI捷蜥蜴線粒體基因組及有鱗目系統(tǒng)發(fā)育研究Y2585078研究生:陶春榮年級(jí):2011級(jí)導(dǎo)師:秦新民教授學(xué)科專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:分子系統(tǒng)學(xué)摘要捷蜥蜴(Lacertaagilis)隸屬于爬行綱(Reptilia)、有鱗目(Squamata)、蜥蜴科(Lacertidae)動(dòng)物,廣泛分布在歐、亞、非洲,國內(nèi)主要分

2、布于新疆。該物種已經(jīng)被收錄到《國家保護(hù)的有益的或者有重要經(jīng)濟(jì)、科學(xué)研究價(jià)值的陸生野生動(dòng)物名錄》。本文利用PCR和長片段PCR方法對(duì)捷蜥蜴線粒體基因組全序列及其核基因c.mos序列進(jìn)行了擴(kuò)增和測序。從GenBank中下載39個(gè)有鱗目物種的線粒體16SrRNA和核基因c.mos序列,以奧利諾科鱷(Crocodylusintermedius)和非洲侏儒鱷(偽據(jù)D腸em螂tetraspis)為外群,以16SrRNA基因序列及16SrRNA+c-mos基因聯(lián)合序列為分子標(biāo)記,并且運(yùn)用軟件MrBayes3.0b4和PAUP4.0分別使用貝葉斯推斷法和最大似然法構(gòu)建了有鱗目的B

3、I(BayesianInference,BI)和ML(MaximumLikelihood,ML)系統(tǒng)發(fā)育樹。所得主要內(nèi)容和結(jié)論如下:1.捷蜥蜴線粒體基因組全長17,090bp,包括13個(gè)編碼蛋白基因(ATP6,ATP8,COI—III,NDl.6,ND4L,Cytb)、22個(gè)tRNA基因、2個(gè)核糖體rRNA基因(16SrRNA和12SrRNA基因)以及1個(gè)主要的非編碼控制區(qū)(D.Loop控制區(qū))。另外,其輕鏈復(fù)制起始點(diǎn)fOL)可形成莖環(huán)(stem.100p)結(jié)構(gòu)。每個(gè)基因都沒有出現(xiàn)基因重排的現(xiàn)象,而且它們?cè)谖恢蒙?、順序上和方向上都與大多數(shù)報(bào)道過的有鱗目的多數(shù)物種相

4、同。捷蜥蜴線粒體基因組堿基組成具有明顯的A+T偏向性,總A+T含量所占百分比為60.3%,明顯比G+C含量高。另外,捷蜥蜴線粒體基因組堿基表現(xiàn)出負(fù)GC偏斜值(。0.330)及正AT偏斜值(0.038)。2。捷蜥蜴線粒體基因組13個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因中,NDl以ATT為起始密碼子,COI、COII、ND63個(gè)基因以GTG為起始密碼子,其余都以ATG為起始密碼子。NDl、ATP8、ND4L、ND5、ND6、C燦6個(gè)基因以完全的吖蚺行使終止密碼子功能,COI和ND2則分別以AGG和TAG為終止密碼子,ATP6以不完全的TA作為終止密碼子,COII、COrn、ND3、ND44

5、個(gè)基因的終止密碼子為不完全T。3.捷蜥蜴線粒體基因組的22個(gè)tRNA基因中,除tRNAs叮(AGY)缺失T臂,其余21個(gè)tRNA基因的二級(jí)結(jié)構(gòu)均呈典型的三葉草結(jié)構(gòu)。4.捷蜥蜴的非編碼D.100p區(qū)域位于tRNA.Pro基因和tRNA.Phe基因之間,長度是1,688bv,A+T含量為65.9%,高于捷蜥蜴線粒體基因組全序列A+T含量的平均水平。在捷蜥蜴的非編碼區(qū)存在一些特殊序列:5’端有3個(gè)終止相關(guān)序列:TASl:5t.ACATn汀CCⅡ訂T.3’,TAS2:5’.ACATAATACATA.3’,TAS3:5’.ACATAAlTACAl隊(duì).3’,3’端也有3個(gè)的保

6、守序列:CSB.1:5’.ATTGTCTTAATGCTTGGTAGAC觸漁.3’,CSB.2::5’.CAAACCCCCCTACCCCC-3’,CSB-3:5’-TCGCCAACCCCTAAACGA.3’。5.基于39個(gè)物種(不包括外群)16SrRNA基因和16SrRNA+c.mos基因兩個(gè)數(shù)據(jù)集分別構(gòu)建了有鱗目的BI和ML系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果表明:得到的4棵系統(tǒng)發(fā)育樹拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)基本一致,6個(gè)亞目都表現(xiàn)出良好的單系性,鬣蜥亞目與蛇蜥亞目形成姐妹支后,與壁虎亞目聚為一支:然后與蛇亞目相聚;接著再與蚓蜥亞目和蜥蜴亞目相聚。6個(gè)亞目的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系為:(((((鬣蜥亞目+蛇蜥亞

7、目)+壁虎亞目)+蛇亞目)+蚓蜥亞目)+蜥蜴亞目)。除了短頭蚓蜥科外,其余各科在4棵系統(tǒng)發(fā)育樹中均表現(xiàn)為單系性,與形態(tài)分類結(jié)果相符。關(guān)鍵詞:捷蜥蜴;有鱗目;線粒體基因組;核基因;分子系統(tǒng)學(xué)IITheCompleteMitogenomeofLacertaagilisandthePhylogeneticAnalysisofSquamataMasterCandidate:TaoChun-RongMajor:BiochemistryandMolecularBiologyGrade:201Supervisor:Qinxin-MinResearchdirection:Mole

8、cular

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