寧波地區(qū)副溶血弧菌血清型與部分毒力基因的分布研究

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1、肇中農(nóng)業(yè)大學(xué)2008麟碩士學(xué)位諗文時(shí),細(xì)菌表達(dá)煞生鞭毛系統(tǒng);當(dāng)生活在菲黏性麴液體囂重,綴蓊表達(dá)極生鞭鼉系統(tǒng)。遺傳分析指出副溶血弧菌鞭毛基因系統(tǒng)復(fù)雜,周身鞭毛和極性鞭毛的基因系統(tǒng)不同,其結(jié)構(gòu)和裝配成分也不同(McCarteretal。。1993)。1.1-3生長與棲息環(huán)境副溶血弧菌為兼性厭氧蘸,藐夠生長的pH秀毒??汀1.0,生長最適母l雋7。6-9。0,是一種嗜鹽菌(halophilic),生長過程必須有Na+離子的存在(2%.1l%),在3%.6%鹽度中生長良好,生長澄凄范圍薏5-48℃,4℃

2、進(jìn)入活的棼霉培養(yǎng)狀態(tài)(viablebutnonculturablestate)(寇運(yùn)同等,2000),最適溫度為28.37℃,副溶血弧菌為嗜溫菌,其致病多發(fā)生在夏季,在水濕25.32℃下容易流行。副溶血弧菌生存子海洋及河瑟環(huán)境,常出現(xiàn)予魚、蝦、貝類等海產(chǎn)動物的體表或腸道蠢,可弓l超鳙、石斑魚、草蝦、斑節(jié)蝦、大黃魚的疾病(毛芝娟等,2002),是海水養(yǎng)殖動物的條件致病菌。1.1.4培養(yǎng)特性副溶血弧菌必須在有鹽度豹情況下才能生長良好,在增殖培養(yǎng)時(shí),可選擇副溶盎弧菌增菌液或者是鹽度3%的腦心浸液BHI(

3、Brain.k緞infusion)進(jìn)行增殖培養(yǎng)。在分離鑒定時(shí)可選擇堿性膽鹽瓊J]旨(TCBS)培養(yǎng)基,TCBS培養(yǎng)基是一種為弧菌(Vibfiospp)設(shè)計(jì)靛培養(yǎng)基,又被髂為弧菌選擇培養(yǎng)基(Vibrioselectiveagar)。其中酶疆鹽(bilesal0抑制革蘭氏陽性菌的生長,使革蘭氏陰性菌得以生長;利用蔗糖(sucrose)發(fā)酵的不霜,使培養(yǎng)基產(chǎn)生不同顏色得駐區(qū)分。除了霍剩新囅蘧≤Vibriohollisae)之豁熬其他弧菌都可以在TCBS上生長,副溶血弧菌在TCBS瓊脂平板上形成藍(lán)綠簽狀菌

4、落。l。l。5生純特性副溶血弧菌的生化特性可以利用副溶血弧菌生化鑒定試劑盒進(jìn)行,用API.20E系統(tǒng)輔髓鎣定,其主要生純特性為嗜鹽,在冤鹽培養(yǎng)基土不生長,在3%.6%鹽度巾生長良好;革蘭氏陰性,弧狀,極生單鞭鼉,氧化酶陽性,發(fā)酵型,精氨酸雙水解酶、尿素酶為弱性,賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶、淀粉酶、明膠酶、MR試驗(yàn)必熙性,檸檬酸鹽、VP試驗(yàn)為陰性,吲哚為陽餓、不產(chǎn)生硫化氫,利用葡萄糖、甘露醇產(chǎn)酸,不利用肌醇、鼠李糖、蔗糖、蜜二糖、苦杏仁替,明膠酶陽性,見表1.1。2寧波地區(qū)剮溶血弧菌胤淌型和部分簿力

5、基因的分布研究表重.重副港斑弧菌的生純特戇瓣Table1-IBiochemicalcharacteristicsofVibrloparahaemolyticus矮譬卯頊爨彬’Items革蘭氏染色Gramstain-極生鞭毛polarflagellum+O/F試驗(yàn)O/FtestF熬生鞭毛rosetteflagellumTCBS生長TCBSagar·’Y葡萄糖產(chǎn)酸Glucose,acid+靛基質(zhì)產(chǎn)生Indoleproduction4-麓萄耱產(chǎn)氣Glucosegasproduction一氧化酶試驗(yàn)Oxi

6、daseproduction+乳糖Lactose-MR試驗(yàn)MRreaction÷蔗糖Sucrose—vP試驗(yàn)VPreaction.甘露糖Mannose+硫化氫產(chǎn)生H2Sproduction一纖維二糖Cellobiose-賴氨酸脫羧酶Lysinedeearboxylase÷麥芽糖Maltose+精氨酸雙水解酶Argininedecarboxylase·甘露醇Mannitol+鳥氨酸聰羧酶Omithinedecarboxylase÷鼴醇Inositol-脲酶Urease-山梨醇Sorbitol-爭半乳

7、糖蟄酶fl-Galactosidase一永榜苷Salicin*贍膠酶Gelatinase+檸檬酸鹽Citrate+淀粉酶Amylase+硝酸鹽還原Nitratereduction+脂肪f晦(Tween-80)Lipase—O/129敏感性(18鍪彩R卵磷脂酶(蛋黃)Lecithinase+O/129敏感性050I_tg)s過氧化氫酶Catalase÷G+C含量(t001%)45-47溶血性Haemolyticus13G+Ccontent(moI%)4℃生長4℃,growth·0%NaCl生長0%N

8、aCl,growth-15℃生長15℃,growth+3%NaCl生長3%NaCI,growth+28℃生長28℃。growth-i-6%NaCI生長6%NaCI,growth+3了℃生長37℃,growth4-8%NaCI生長8%NaCl,growth+42℃生長42℃,growth4-10%NaCl生長10%NaCl,growth+注;Y黃色;F發(fā)酵;表示溶蠢;S敏感;R不敏感;I’衰中t叮,襲示0%-10%的陽性,0%-10%positive:“∥表示90%-loo%陽性,9

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