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《副溶血弧菌與溶藻弧菌毒力基因分布與抗生素耐藥性分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文題名（中英對(duì)照）：副溶血弧菌與溶藻弧菌毒力基因分布與抗生素耐藥性分析Analysisofthedistributionofvirulence-relatedgenesandantibioticresistanceofVibrioparahaemolyticusandVibrioalginolyticus作者姓名：冼鈺茵指導(dǎo)教師姓名吳希陽(yáng)及學(xué)位、職稱(chēng)：博士、教授學(xué)科、專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：工學(xué)食品科學(xué)學(xué)位類(lèi)型：學(xué)術(shù)學(xué)位論文提交日期：2015年5月15日論文答辯日期：2015年5月21日答辯委員會(huì)主席：夏延
2、斌教授（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)）論文評(píng)閱人：鄧小玲主任技師（廣東省疾病預(yù)防控制中心）張寧副教授（暨南大學(xué)）學(xué)位授予單位和日期：暨南大學(xué)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研宄成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研宄成果，也不包含為獲得暨南大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研宄所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:簽字日期：AG年j■月4日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全
3、了解暨南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)暨南大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū)）學(xué)位論文作者簽名:導(dǎo)師簽名:簽字日期：年X月2丨日簽字日期:學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：電話:通訊地址：郵編摘要兩種主要食源性弧菌——副溶血弧菌和溶藻弧菌都是海洋生態(tài)環(huán)境中廣泛分布的正常菌群，同時(shí)也是重要的病原弧菌，不僅能使水產(chǎn)養(yǎng)
4、殖動(dòng)物患病，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，還能導(dǎo)致人類(lèi)食物中毒和胃腸道感染，危害人體健康。鑒于副溶血弧菌和溶藻弧菌具有高度同源性，而現(xiàn)有研究集中在前者，對(duì)于溶藻弧菌的致病機(jī)理缺乏了解。本論文在毒力相關(guān)基因和抗生素抗性?xún)煞矫娴奶匦员容^副溶血弧菌和溶藻弧菌，通過(guò)分析與比較兩種弧菌毒力基因分布情況及多藥耐受現(xiàn)象之間的異同，為了解這兩種弧菌的致病機(jī)制、耐藥機(jī)制、流行病學(xué)研究和食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供指導(dǎo)，主要結(jié)果如下：1.針對(duì)副溶血弧菌和溶藻弧菌的溶血素基因(trh、tdh、tlh)、毒力調(diào)控基因(toxR、toxS)和毒力貢獻(xiàn)基因
5、(Collagenase、UreR、FlaA、ompW、AspA、fur)構(gòu)建了兩套多重PCR體系并運(yùn)用于從環(huán)境和水產(chǎn)品（青口、白貝、和貴妃蚌等）分離的248株副溶血弧菌和128株溶藻弧菌的毒力基因分布調(diào)查，發(fā)現(xiàn)這11種毒力相關(guān)基因在兩種弧菌中均有不同程度的分布：tlh、Collagenase、FlaA、ompW和fur基因在兩種弧菌中分布較廣，toxR和toxS基因次之；而且兩種弧菌的毒力基因分布情況都有各自的特點(diǎn)：副溶血弧菌的分離株不攜帶tdh和trh基因，AspA、toxR和toxS基因的攜帶率均超過(guò)90
6、%；溶藻弧菌則相反，tdh和trh基因的攜帶率高達(dá)38.28%，AspA、toxR和toxS基因的攜帶率遠(yuǎn)低于副溶血弧菌。本論文所構(gòu)建的多重PCR體系以水煮法提取的細(xì)菌DNA為模板同時(shí)檢測(cè)兩種弧菌的多個(gè)毒力相關(guān)基因，具有低成本、高靈敏度和高通量的特點(diǎn)，可用于基層大規(guī)模大范圍的毒力相關(guān)基因發(fā)布調(diào)查。2.結(jié)合表型分型技術(shù)和分子分型技術(shù)，通過(guò)PCR反應(yīng)篩選與致病性高度相關(guān)的O3、O4型副溶血弧菌后輔以血清凝集實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證，從收集到的248株副溶血弧菌中篩選出8株O3型副溶血弧菌和9株O4型副溶血弧菌，通過(guò)限制性?xún)?nèi)切酶
7、SfiⅠ酶切后進(jìn)行脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）分型，為環(huán)境副溶血弧菌致病株的深入研究提供參考。3.本論文采用Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法研究上述副溶血弧菌和溶藻弧菌分離株對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中常用的18種抗生素（氨芐西林、阿莫西林、羧芐西林、頭孢噻吩、頭孢哌酮、頭孢呋新鈉、頭孢唑啉、慶大霉素、鏈霉素、阿米卡星、萬(wàn)古霉素、多粘菌素B、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、紅霉素、環(huán)丙沙星、利福平和克林霉素）的耐藥狀況，發(fā)現(xiàn)兩種弧菌都對(duì)多種抗生素具有不同程度的抗性，多藥耐受情況十分嚴(yán)重，以溶藻弧菌為甚?；诃h(huán)境中溶I藻弧菌的存在比副溶血弧
8、菌更為普遍而且對(duì)其研究相對(duì)不足的現(xiàn)狀，本論文的研究結(jié)果不僅能用于指導(dǎo)水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)抗生素的合理規(guī)范應(yīng)用，還能促進(jìn)對(duì)病原弧菌尤其是溶藻弧菌耐藥基因定位和耐藥機(jī)制的研究。關(guān)鍵詞：副溶血弧菌；溶藻弧菌；毒力相關(guān)基因；耐藥性；分型IIAbstractFoodborneVibrioparahaemolyticusandVibrioalginolyticusarecommonaquaticmicro
