烏拉坦誘導小鼠肺癌模型的研究

烏拉坦誘導小鼠肺癌模型的研究

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1、單位代碼10475學號104753101277分類號R965碩士學位論文烏拉坦誘導小鼠肺癌模型的研究學科、專業(yè):藥理學研究方向:腫瘤藥理與中藥藥理申請學位類別:醫(yī)學碩士申請人:孫婷指導教師:杜鋼軍教授二〇一三年五月THESTUDYOFLUNGCANCERMODELINDUCEDBYURETHANEINMICEADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMaster

2、ofMedicineBySunTingSupervisor:Prof.DuGangjunMay,2013Abbreviation英文縮寫英文全稱中文全稱DMBA7,12-dimethylbenz[a]anthracene7,12-二甲基苯蒽MNUN-methyle-N-nitrosoureaN-甲基N-亞硝基脲ECMExtracellularmatrixc細胞外基質BMBasementmembrane基底膜ColⅠTypeⅠcollagenⅠ型膠原ColⅡTypeⅡcollagenⅡ型膠原ColⅢTypeⅢcollagenⅢ型膠原LN

3、Laminin層粘連蛋白MMP-9MatrixMetalloproteinase-9基質金屬蛋白酶-9TIMP-1Tissueinhibitorsofmetalloproteinase-1組織基質金屬蛋白酶抑制劑-1NGFNervegrowthfactor神經(jīng)生長因子BDNFBrain-derivedneurotrophicfactor腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子TrkATropomyosin-relatedkinaseA酪氨酸激酶受體ATrkBTropomyosin-relatedkinaseB酪氨酸激酶受體BTGF-β1Transformi

4、nggrowthfactor-β1轉化生長因子-β1bFGFBasic-fibroblastgrowthfactor堿性成纖維細胞生長因子PAFPlateletactivatingfactor血小板活化因子TCTotalcholesterol總膽固醇TGTriglyceride甘油三酯InsInsulin胰島素ADPNAdiponectin脂聯(lián)素Glut-4Glucosetransporter4葡萄糖轉運體-4ELISAEnzyme-linkedimmunosorbentassay酶聯(lián)免疫分析HEHematoxylin-eosinst

5、aining蘇木精-伊紅染色法TTF-1Thyroidtranscriptionfactor-1甲狀腺轉錄因子-1CEACarcinoembryonicantigen癌胚抗原LDHLactatedehydrogenase乳酸脫氫酶BrdU5-Bromo-2-deoxyUridine5-溴脫氧尿嘧啶核苷BSAAlbuminfrombovineserum牛血清白蛋白AcrAcrylamide丙烯酰胺BisBis-acrylamide甲叉雙丙烯酰胺GlyGlycine甘氨酸APAmmoniumpersulphate過硫酸銨2-ME2-Mer

6、captoethanol2-巰基乙醇SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸鈉摘要肺癌是嚴重威脅人類生命健康的惡性腫瘤,近年來發(fā)病率及死亡率逐年上升。肺癌動物模型對肺癌的發(fā)病機理研究及治療藥物篩選非常重要,但目前常用的肺癌模型中移植性腫瘤長勢過快,與臨床腫瘤差異很大;自發(fā)性與誘導性腫瘤發(fā)病率和成瘤時間很不穩(wěn)定。因此,建立一種與臨床肺癌生物學特征相似、致瘤穩(wěn)定均一、重現(xiàn)性好、發(fā)病率高的肺癌動物模型對于研究肺癌的病因及篩選肺癌治療藥物,尤其是篩選十分有特色的肺癌治療傳統(tǒng)中藥是腫瘤領域的迫切需要。本研究采用不同劑量烏拉坦、

7、不同品系小鼠及不同致癌方案比較肺致癌率及平均肺結節(jié)數(shù)以確定最佳肺癌造模方法;通過生化指標檢測及病理組織分析比較烏拉坦誘導的肺癌模型與臨床人體肺癌發(fā)病的相似性;并通過寒熱2種性質的中藥對建立的肺癌模型進行佐證,提出肺癌新的發(fā)病機制,以期為臨床肺癌的治療提供新理念、新方法。在本研究中,烏拉坦800mg/kg腹腔注射、每周兩次、連續(xù)5周的造模方式可在C57BL/6小鼠中4個月誘導出穩(wěn)定均一、致癌率100%的肺腺癌,并能克服C57BL/6小鼠對烏拉坦誘導肺癌的基因抵抗。肺癌小鼠體內生化指標檢測表明,該模型建立后荷瘤小鼠ColI、MMP-9、T

8、IMP-1、NGF、TrkA、BDNF、TrkB、TGF-β1、bFGF、Ins、Glut-4水平均顯著升高,肺組織LN、血清TC水平顯著降低,且隨著時間的延長與正常小鼠差異越顯著。病理及免疫組化檢測表明,該模型中誘導的

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