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《斑馬魚(yú)lamin a基因編碼序列的克隆與lamin a-egfp-pcs2+重組質(zhì)粒的構(gòu)建》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、《中國(guó)圖書(shū)資料分類法》分類號(hào)：R394.3單位代碼：10660學(xué)號(hào)：S100149貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位材料(臨床論文部分)斑馬魚(yú)LaminA基因編碼序列的克隆與2+LaminA-EGFP-pCS重組質(zhì)粒的構(gòu)建研究生：葉芝旭導(dǎo)師：何志旭年級(jí)：2010級(jí)專業(yè)：兒科學(xué)2013年5月10日目錄摘要.............................................................................................................1略縮詞表...........................
2、..........................................................................2前言.............................................................................................................4材料與方法.................................................................................................6結(jié)果....
3、.......................................................................................................21討論...........................................................................................................27參考文獻(xiàn)............................................................................
4、.......................33致謝...........................................................................................................36英文摘要...................................................................................................38論文原創(chuàng)性聲明................................................
5、......................................39綜述...........................................................................................................40附：臨床能力考核有關(guān)材料：臨床輪轉(zhuǎn)考核表(按時(shí)間順序)學(xué)術(shù)活動(dòng)情況表(按時(shí)間順序)臨床能力考試及學(xué)位答辯情況表貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文斑馬魚(yú)LaminA基因編碼序列的克隆與2+LaminA-EGFP-pCS重組質(zhì)粒的構(gòu)建專業(yè)：兒科學(xué)研究生：葉芝旭導(dǎo)師：何志旭摘要2+目的克隆斑馬魚(yú)
6、LaminA的基因編碼序列，并構(gòu)建LaminA-EGFP-pCS的重組質(zhì)粒，用SP6酶制備正義的mRNA。方法收集多個(gè)時(shí)相的野生型斑馬魚(yú)胚胎，TRIZOL法提取總RNA，RT-PCR法擴(kuò)增LaminA基因編碼序列，將得到的LaminA與2+2+EGFP-pCS分別用BamHI、EcoRI酶雙酶切后,將LaminA插入EGFP-pCS質(zhì)粒中。對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切、菌落PCR及插入片段進(jìn)行測(cè)序鑒定后，用NotI酶線性化質(zhì)粒，通過(guò)SP6酶體外轉(zhuǎn)錄合成了融合了EGFP的LaminAmRNA。結(jié)果通過(guò)RT-PCR2+技術(shù)擴(kuò)增出1977bp的LaminA擴(kuò)增產(chǎn)物，構(gòu)建的LaminA-EGFP-pC
7、S重組質(zhì)粒經(jīng)雙酶切、菌落PCR及插入片段的測(cè)序后與預(yù)期結(jié)果相符，用SP6酶體外轉(zhuǎn)錄獲得的5‘端加帽的正義mRNA，通過(guò)胚胎顯微注射，觀察到綠色熒光蛋白的表達(dá)。結(jié)論克2+隆了斑馬魚(yú)LaminA基因編碼序列，并構(gòu)建了LaminA-EGFP-pCS重組質(zhì)粒，并制備了5‘端加帽的正義mRNA。關(guān)鍵詞：斑馬魚(yú)，核纖層蛋白A，質(zhì)粒構(gòu)建，體外轉(zhuǎn)錄，SP6,顯微注射,信使核糖核酸[基金項(xiàng)目]：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（31260284）香港大學(xué)周中軍教授協(xié)作課
