杏仁核點(diǎn)燃耐藥性癲癇大鼠海馬nmdar1和nmdar2b亞單位的表達(dá)

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1、貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文≤中國(guó)圖書資料分類法≥單位代碼:10660分類號(hào):R743.9學(xué)號(hào):s100270貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士學(xué)位論文杏仁核點(diǎn)燃耐藥性癲癇大鼠海馬NMDAR1和NMDAR2B亞單位的表達(dá)研究生:馬曉娟導(dǎo)師:伍國(guó)鋒教授年級(jí):2010級(jí)專業(yè):神經(jīng)病學(xué)2013年4月20號(hào)1貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文目錄摘要???????????????????3前言???????????????????4-5材料與方法?????????????????6-15結(jié)果???????????????????16-19討論????????????

2、???????20-23結(jié)論???????????????????24參考文獻(xiàn)??????????????????25-28英文摘要??????????????????29-30致謝???????????????????31略縮詞表??????????????????32論文原創(chuàng)性聲明???????????????33附:綜述?????????????????342貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文杏仁核點(diǎn)燃耐藥性癲癇大鼠海馬NMDAR1和NMDAR2B亞單位的表達(dá)專業(yè)名稱:神經(jīng)病學(xué)研究生:馬曉娟導(dǎo)師:伍國(guó)鋒摘要目的:建立耐苯妥因鈉及苯巴比妥鈉杏仁核點(diǎn)燃

3、大鼠耐藥癲癇模型,觀察耐藥性癲癇大鼠海馬組織中N-甲基-D-天冬氨酸受體NR1、NR2B亞單位表達(dá)的變化,探討耐藥癲癇的可能機(jī)制。方法:選擇100只健康的雄性Wistar大鼠,通過(guò)杏仁核慢點(diǎn)燃刺激,建立癲癇模型后,分別給予苯妥因鈉及苯巴比妥鈉腹腔注射各三次,1小時(shí)后測(cè)量后放電閾值(Afterdischargethreshold,ADT),ADT平均值不增加或增高小于20%為耐藥癲癇組,ADT增高20%以上納入藥物敏感組,另選取8只正常大鼠為正常對(duì)照組。三組模型建立成功后立即處死大鼠,取海馬組織,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白免疫印記方法檢測(cè)NMDAR1、NM

4、DAR2B的表達(dá)。結(jié)果:1.模型制作情況:100只健康雄性Wistar大鼠,選取8只為正常對(duì)照,剩余大鼠建立癲癇點(diǎn)燃模型。完成點(diǎn)燃72只,成功點(diǎn)燃45只,發(fā)作級(jí)別均為5級(jí),點(diǎn)燃率62.5%。45只癲癇大鼠經(jīng)過(guò)苯妥因鈉及苯巴比妥鈉兩種一線抗癲癇藥物篩選,篩選出耐藥性癲癇大鼠8只,耐藥率17.7%,成功建立了耐苯妥因鈉及苯巴比妥鈉的杏仁核點(diǎn)燃癲癇大鼠模型。2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR:耐藥癲癇組海馬NR1、NR2BmRNA的相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。藥物敏感組NR1、NR2BmRNA的相對(duì)表達(dá)量比正常大鼠海馬稍高,未見顯著差異(

5、P>0.05)。3.蛋白免疫印記:耐藥癲癇組海馬NR1、NR2B的蛋白相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組和藥物敏感組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。藥物敏感組NR1、NR2B的蛋白相對(duì)表達(dá)量比正常大鼠海馬稍高,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:1.通過(guò)杏仁核電刺激慢點(diǎn)燃,并以苯妥英鈉和苯巴比妥鈉藥物篩選后可成功建立理想的耐藥癲癇大鼠模型;2.NR1、NR2B在耐藥癲癇組中明顯升高,提示其可能參與了耐藥癲癇發(fā)生機(jī)制;3.NR1、NR2B在藥物有效組中升高不明顯,提示其可能和藥物的作用位點(diǎn)有關(guān)。關(guān)鍵詞:N-甲基-D-天冬氨酸受體NR1、NR2B;耐藥性癲癇

6、;海馬;熒光定量PCR;蛋白免疫印記3貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文前言癲癇(epilepsy)是一組由不同病因所引起的大腦慢性疾病,以大腦神經(jīng)元異常放電所致[1]短暫性、發(fā)作性、重復(fù)性以及通常為刻板性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常為主要特征。根據(jù)相關(guān)[2]流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,其患病率約為7/1000,在全球范圍內(nèi)大約有5000萬(wàn)癲癇患者。根據(jù)[3]ILAE/IBE/WHO的統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示:目前我國(guó)有超過(guò)900萬(wàn)癲癇患者,每年新發(fā)人數(shù)可達(dá)30萬(wàn)人。癲癇可發(fā)生于各個(gè)年齡段,而青少年和老年則是癲癇發(fā)病的高峰年齡段。癲癇的反復(fù)發(fā)作嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量,致使其無(wú)法

7、完成九年義務(wù)制教育,無(wú)法進(jìn)行正常的社會(huì)勞動(dòng)及家庭勞動(dòng),無(wú)法正常的結(jié)婚繁育后代,無(wú)法正常完整的履行法律賦予的各項(xiàng)權(quán)利和義務(wù)等,對(duì)社會(huì)和家庭均造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)。有一小部分癲癇患者盡管給予了2種正確選擇、可耐受的、不同作用機(jī)制的抗癲癇藥物(Antiepilepticdrugs,AEDs),經(jīng)足量療程及劑量的單藥或聯(lián)[4]合用藥后仍未能控制發(fā)作,稱耐藥性癲癇(Intractableepilepsy,IE)。目前,對(duì)耐藥癲癇形成的確切機(jī)制尚不明確,耐藥性癲癇在臨床的中的診斷和治療仍相當(dāng)困難,多種藥物同時(shí)服用降低了患者的依從性,加大了藥物的副反應(yīng)和蓄積作用

8、。N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受

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