溝葉結(jié)縷草愈傷組織再生體系的優(yōu)化

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1、溝葉結(jié)縷草愈傷組織再生體系的優(yōu)化論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：論文評(píng)閱人：塍云文教授浙江太堂國藝丕盆昌態(tài)教援逝江太堂國藝丕樓建垡高工杭州植物園答辯委員會(huì)主席：摟曉明教授級(jí)高工杭劃直園文局．．答辯委員會(huì)委員：夏宜堊教授逝延太堂國撻砑究壓固撾至副教授逝江太堂國撻班究壓柴明良副教授、逝江太堂園撻班究壓浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得逝姿盤鱟或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證

2、書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解濫婆太堂有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝'江盤堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：簽字日期：年月日簽字日期：年月日致謝能夠完成學(xué)業(yè)和論文，我首先應(yīng)該感謝

3、導(dǎo)師柴明良副教授。他不僅是一位治學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)、學(xué)識(shí)淵博的學(xué)者，更是一位和藹可親的長者，也是一位真摯的朋友。近三年的研究生生涯，有幸得到柴老師的敦敦教導(dǎo)、熱心幫助，是我求學(xué)生涯中最幸運(yùn)的事。柴老師除了培養(yǎng)我的科研思維、科研能力，在學(xué)習(xí)和實(shí)驗(yàn)上對(duì)我細(xì)心教導(dǎo)，在生活上更是對(duì)我關(guān)懷備至。論文的選題、方案的設(shè)計(jì)、試驗(yàn)的操作、論文的撰寫等多個(gè)環(huán)節(jié)，都凝聚著柴老師的心血。試驗(yàn)過程中，當(dāng)試驗(yàn)不順利時(shí)，柴老師給予了我建議和莫大的鼓勵(lì)，使我重振旗鼓，繼續(xù)奮斗。值此論文完成之際，衷心地表達(dá)我對(duì)柴老師的感激之情!感謝園林所夏宜平和周樹軍老師在研究生課程

4、上的教導(dǎo)。特別感謝我的師兄陳曙、李克虎，師姐賈玉芳、王麗萍、林文丹，同學(xué)張麗，師妹邵麗達(dá)，他們?cè)谖业纳詈驮囼?yàn)上給予了我莫大的幫助和支持，沒有他們，我的生活將略顯枯燥，沒有他們，我的試驗(yàn)和論文也無法順利完成!同時(shí)要感謝我的室友譚欣、肖郁綿、廖金及園林所的其他同學(xué)，謝謝他們?cè)谖业纳钌辖o予的無私幫助!還要感謝我的家人和遠(yuǎn)方的好友多年來對(duì)我的支持和鼓勵(lì)，他們給予我堅(jiān)持完成學(xué)業(yè)和科研的動(dòng)力!最后，謹(jǐn)向參加本論文評(píng)閱、答卷的各位老師致以最誠摯的謝意!顧敏霞2013年1月10號(hào)于杭州浙江大學(xué)紫金港校區(qū)摘要溝葉結(jié)縷草(Zoysiama

5、lrella匝．]Merr．)又名馬尼拉，是一種優(yōu)良的暖季型草坪草，被廣泛應(yīng)用于暖溫帶及過渡地區(qū)。因其無法產(chǎn)生種子，故在自然界通過匍匐莖進(jìn)行無性繁殖，無法采用雜交育種等傳統(tǒng)方法進(jìn)行遺傳改良。因此，轉(zhuǎn)基因及體細(xì)胞無性系變異等生物技術(shù)在溝葉結(jié)縷草育種、抗性和觀賞性改良中有著重要的作用。本試驗(yàn)以繼代了8年的溝葉結(jié)縷草匍匐莖所誘導(dǎo)的胚性愈傷組織為材料，比較了不同生長調(diào)節(jié)劑(BA和ZR)及其濃度(0．00、0．05、0．10、0．20、o．40mg／L)組合、不同氨基酸種類(L．Pro、L-Arg、L-Glu)，不同固化劑種類(Ph

6、ytagel、Gelzan、Agar、Carrageenan、Agargellan)、不同接種大小(1、2、3、4mm)、不同培養(yǎng)容器(柱形瓶、三角瓶和培養(yǎng)皿)以及不同輻射劑量(0、20Gy)的60cov射線對(duì)愈傷組織再生的影響，以優(yōu)化溝葉結(jié)縷草胚性愈傷組織的再生條件．同時(shí)，對(duì)愈傷組織再生過程進(jìn)行了超微結(jié)構(gòu)觀察以更深入了解其再生。主要研究結(jié)果如下：1．溝葉結(jié)縷草胚性愈傷組織再生率隨著生長調(diào)節(jié)劑的改變而發(fā)生明顯改變，隨著生長調(diào)節(jié)劑濃度從0．00提高至0．40mg／L，胚性愈傷組織再生率在2．5％-70．O％之間變化。低濃度(

7、0．05mg／L)的BA能夠刺激愈傷組織再生，而隨著BA濃度的增加，愈傷組織的再生率顯著降低；另一方面，在未添加BA的培養(yǎng)基上，胚性愈傷組織的再生率隨著ZR濃度的提高并未表現(xiàn)出顯著性差異。結(jié)果顯示在含有O．05mg／L的BA和ZR培養(yǎng)基中，胚性愈傷組織的再生率達(dá)到最高(70．0％)1且平均總不定芽數(shù)最多(109．5)。2．含有500mg／LL-GIu培養(yǎng)基上其再生率(18．o％)與對(duì)照組的再生率(30．o％)未存在顯著差異(p>0．05)，而添加同濃度L-Arg和L-Pro顯著抑制了愈傷組織的再生(p<0．05)，其中在含

8、有L-Arg的培養(yǎng)基上再生率及再生力最低，分別為8．O％和74．5％。3．在含不同固化劑的再生培養(yǎng)基上，胚性愈傷組織的再生力差異并不顯著。Agargellan上的胚性愈傷組織顯示最高的再生率(39．O％)，Agar及Carrageenan培養(yǎng)基上的愈傷組織再生率分別為32．0％、27．o％，與Agarg