家蠶npv抗性遺傳的分析及其雙抗病毒病分子標記輔助育種論文

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1、江蘇大學碩士學位論文家蠶NPV抗性遺傳分析及其雙抗病毒病分子標記輔助育種姓名：馮凡申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：陳克平20120606江蘇大學碩士學位論文摘要家蠶病毒病是養(yǎng)蠶業(yè)中主要病害，主要包含核型多角體病毒(Bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirus，簡稱BmNPV)，質型多角體病毒(BombyxmoricytoplasmicpolyhedrosiSvirus，簡稱BmCPV)和濃核病毒(Bombyxmoridensovirus，簡稱BmDNV)三種，其中核型多角體病毒病對家蠶危害最為嚴重。家蠶核型多角體

2、病毒是昆蟲病毒病中發(fā)現(xiàn)最早、研究得較詳細的一類病毒病。目前的許多研究基本認為家蠶對NPV的抗性主要是有一對常染色體的顯性主效基因和性染色體上的微效基因共同控制，但是還存在許多爭論。家蠶濃核病毒病在養(yǎng)蠶業(yè)上的危害時有發(fā)生。家蠶對濃核病毒的抵抗有顯隱性之分，其中濃核病毒中國鎮(zhèn)江株(BIIlDNV—Z)屬于工I型濃核病毒，家蠶對其抵抗主要是由一對隱性單基因控制。本研究證明了抗性品系NB對BmNPV的抵抗主要是由顯性單基因控制，在分子水平上分別獲得了一個與BmNPV和BmDNV-Z抗性緊密連鎖的分子標記R，。。和S。。。，并將二者結合起來進行雙抗病毒病分子標記的輔助

3、育種。獲得的結果如下：1．根據(jù)經(jīng)典遺傳學的實驗方法，通過組配抗性品系NB和感性品系雜交構建BC。代和F。代群體，然后調查添毒后的分離比，經(jīng)過統(tǒng)計學分析之后發(fā)現(xiàn)控制家蠶NB對病毒抵抗的基因，符合孟德爾顯性單基因遺傳規(guī)律。2．借助于RAPD技術進行NPV抗性分子標記的篩選，獲得了一個連鎖性緊密的分子標記R，。。，該分子標記在BC。代和F：代擴增結果的比例基本符合抗病性狀在BC。代和F：代l：1和3：1分離定律，這進一步證明本實驗室的家蠶品種NB對核型多角體病毒的抵抗是由顯性單基因家蠶NPV抗性遺傳分析及其雙抗病毒病分子標記輔助育種控制。同時為了能夠有效的鑒定和克

4、隆該抗性基因，本實驗對該分子標記進行了染色體步移分析獲得了大約lOkb的片段，為下一步該基因圖位克隆的完成提供基礎。3．根據(jù)日本學者公布的濃核病毒抗性基因nsd-2的基因組序列，結合比較基因組學的分析方法選擇合成一對引物進行擴增，獲得了一個與濃核病毒抵抗緊密連鎖的分子標記S。m并對其進行了群體性的驗證。4．通過經(jīng)典的病毒選育和雙抗分子標記R，。。和S蚓的輔助育種技術，獲得了在生產(chǎn)上能夠抵抗家蠶核型多角體病毒和家蠶濃核病毒兩種病毒的雙抗新品種，并對該品種的成績進行了部分的鑒定。關鍵詞：家蠶，分子標記，家蠶核型多角體病毒，家蠶濃核病毒，遺傳分析，育種Ⅱ江蘇大學碩

5、士學位論文Silkwormviraldiseases，mainlycausedbynuclearpolyhedrosisvirus，cytoplasmicpolyhedrosisvirusanddensovirus，aremajordiseasescausinggreatlossinsilkwormraising，amongwhichthediseasecausedbynuclearpolyhedrosisvirus(NPV)isthemostdisastroustosilkworms．Silkwormnuclearpolyhedrosisvirus(NPV

6、)wasthefirstvirusdiscoveredinthehistoryofinsectvirologystudies．ManyofthecurrentresearchbasethatthesilkwormresistancetoNPVismainlycontrolledbyapairofautosomaldominantmajorgenesandsexchromosomesminorgenes，buttherearestillmanycontroversies．Thediseasecausedbydensovirusesoccursinsilkwor

7、mraisingfrequently．TheresistanceofthesilkwormdensovirusWasregulatedbydominantgenesandrecessivegenesindependly．DensovimsChinaZhenjiangstrain(BmDNV-Z)isatypeIIdensovirus．AtpresentsilkwormresistanttoBmDNV-2wascontrolledbyapairofrecessivegene．Inthispaper,themechanismthatthestrainNBresi

8、stanttoBmNPVwascontrolledb