結(jié)核桿菌對感染宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激的調(diào)控作用及其機(jī)制研究

結(jié)核桿菌對感染宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激的調(diào)控作用及其機(jī)制研究

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1、分類號:R378密級:學(xué)號:2010109022單位代碼:10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)核桿菌對感染宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激的調(diào)控作用及其機(jī)制研究學(xué)位申請人劉丹霞指導(dǎo)教師張萬江教授申請學(xué)位門類級別醫(yī)學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)名稱病理學(xué)與病理生理學(xué)研究方向感染性疾病的發(fā)病機(jī)制與防治所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院中國·新疆·石河子2013年5月StudyontheregulationandmechanismthatmycobacteriumtuberculosisreactsatthestressofhostmacrophageADissertationSubmittedtoShihe

2、ziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsFortheDegreeofMasterofMedicineByLiuDanXia(Pathologyandpathophysiology)DissertationSupervisor:Prof.ZhangWanJiangMay,2013石河子大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的學(xué)位論文是在我導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含其他個人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文

3、的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體,均已在文中作了明確的說明并表示謝意。研究生簽名:時間:年月日使用授權(quán)聲明本人完全了解石河子大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版。有權(quán)將學(xué)位論文在學(xué)校圖書館保存并允許被查閱。有權(quán)自行或許可他人將學(xué)位論文編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫提供檢索服務(wù)。有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。研究生簽名:時間:年月日導(dǎo)師簽名:時間:年月日摘要目的:探討研究不同毒力的結(jié)核分枝桿菌對感染宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激的調(diào)控作用及其機(jī)制。方法:1以結(jié)核分枝桿菌國際標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)

4、毒株H37Rv菌株(簡稱H37Rv菌株)和卡介苗菌株(簡稱BCG菌株)分別感染小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7),在感染1、6、12及24小時后,分別采用化學(xué)比色法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮合酶(NOS)的活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的測定。2采用免疫印跡技術(shù)檢測各組感染巨噬細(xì)胞的Cu/Zn-SOD和iNOS蛋白的表達(dá)。3采用RT-PCR方法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的Cu/Zn-SOD和iNOS基因的表達(dá)(mRNA水平)。結(jié)果:1采用化學(xué)比色法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的SOD和NOS活性及MDA和NO含量的測定:BC

5、G菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)SOD、NOS活性和NO含量逐漸升高,而MDA含量逐漸下降,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);H37Rv菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)SOD、NOS和NO含量逐漸下降,而MDA含量逐漸增加,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2采用免疫印跡技術(shù)檢測各組感染巨噬細(xì)胞的Cu/Zn-SOD和iNOS蛋白的表達(dá):BCG菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SOD表達(dá)逐漸升高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);H37Rv菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SOD表達(dá)逐漸下降,與對

6、照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)??瞻讓φ战M、BCG菌株組、H37RV菌株組感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)iNOS蛋白的表達(dá)無差異,為了進(jìn)一步研究不同毒力結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞的iNOS的蛋白表達(dá)差異,我們將對iNOS基因表達(dá)分析。3采用RT-PCR方法檢測各組感染巨噬細(xì)胞的iNOS和Cu/Zn-SOD基因的表達(dá)(mRNA水平):BCG菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SODmRNA和iNOSmRNA水平逐漸升高,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);H37Rv菌株感染RAW264.7后細(xì)胞內(nèi)Cu/Zn-SODmRNA和iNO

7、SmRNA水平逐漸下降,與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:1結(jié)核分枝桿菌感染宿主巨噬細(xì)胞導(dǎo)致巨噬細(xì)胞應(yīng)激,感染巨噬細(xì)胞的應(yīng)激與菌株毒力強(qiáng)弱有關(guān)。2低毒力的結(jié)核分枝桿菌對宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激發(fā)揮誘導(dǎo)作用。3高毒力的結(jié)核分枝桿菌對宿主巨噬細(xì)胞應(yīng)激發(fā)揮抑制作用。關(guān)鍵詞:結(jié)核分枝桿菌;巨噬細(xì)胞;應(yīng)激;調(diào)控;機(jī)制論文類型:A(基礎(chǔ)研究)IABSTRACTObjective:Tostudythefunctionandmechanismofregulatingandcontrolingthatdifferentvirulenceofmycobacter

8、iumtuberculosisreactsatthestressofinfectedhostm

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