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《離體篩選小麥抗赤霉病和根腐病突變體* i.小麥兼抗赤霉病和根腐病愈傷組織的篩選及其抗病性的鑒》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、jftf}HEREDITAS(憋jing)14.(3):.4-6.二.=1.,絲2離體篩選小麥抗赤霉病和根腐病突變體*I.小麥兼抗赤霉病和根腐病愈傷組織的篩選及其抗病性的鑒定郭麗娟姚慶筱胡啟德(中國(guó)科學(xué)院遺傳研究所,北京,100101張浩康紹蘭鄧福友董金皋黃梧芳(河北農(nóng)業(yè)大學(xué),保定,071001)本文選用冬小麥和春小麥品種及其雜種后代的幼穗進(jìn)行離體培養(yǎng),以赤霉病菌及根腐病菌的培養(yǎng)濾液為選擇劑,按不同的篩選方法篩選兼抗赤霉病和根腐病的突變體,用赤霉病菌和根腐病菌分生抱子直接接種在經(jīng)篩選的愈傷組織上,進(jìn)行抗病性鑒定。試驗(yàn)結(jié)果表明:不同篩選方法對(duì)篩選兼坑赤霉病和根腐病的愈傷組織的效果有明顯差異,二
2、步篩選法比混合篩選法效果好。供鑒定的120塊愈傷組織中,有村塊愈傷組織具有兼抗赤霉病菌和根腐菌侵染的能力。關(guān)銳詞:小麥赤霉病菌,小麥根腐病菌,離體篩選赤霉?。‵usariumgraminearum)和根腐病(Helmiuthosporiumsativum)分別是我國(guó)材料和方法小麥南方和北方產(chǎn)麥區(qū)的兩大重要病害。近年(一)試驗(yàn)材料來,赤霉病有向北方、而根腐病有向南方蔓延的選用6個(gè)冬小麥和春小麥品種和雜種后代趨勢(shì),危害面積不斷擴(kuò)大,因此,培育兼抗赤霉的幼穗作外植體進(jìn)行離體培養(yǎng),幼穗長(zhǎng)度為和根腐兩種病害,又具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀的過硬0.5-1.Ocm,品種和抗源已成為目前育種家們迫切關(guān)注的問(二)培養(yǎng)
3、荃題。誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基用MS培養(yǎng)基附加自從Carlson(1973)首次采用離體選擇2,4-D2mg/Lo繼代培養(yǎng)基用MS培養(yǎng)基附加技術(shù)篩選出煙草抗野火病的再生植株以來,國(guó)2,4-D2mg/L、激動(dòng)素0.5mg/L。選擇培養(yǎng)基內(nèi)外許多學(xué)者相繼在馬鈴薯E91、玉米t}l首用MS培養(yǎng)基分別附加:(1)根腐病菌培養(yǎng)濾蓓[7,a1、r小麥167燕麥〔10,117和水稻CQ等作物上獲得液3.0g/L;(2)赤霉病菌培養(yǎng)濾液0.5g/L;(3)成功,但在同廠作物中篩選出同時(shí)兼抗兩種病害的突變體,迄今尚未見報(bào)道。本文報(bào)道中國(guó)GuoLi護(hù)manetal.:InvitroScreeningofMutant
4、sResistanttoFusariumgraminearumandHelms-科學(xué)院遺傳研究所和河北農(nóng)業(yè)大學(xué)自1989年nthosportumsativuminWheat1.SelectionofCallusResistanttoFusariumgramznearumand以來,應(yīng)用組織培養(yǎng)和病菌培養(yǎng)濾液篩選技術(shù),HelminthosporiumsativurnandDiseaseResista-并通過赤霉病菌和根腐病菌分生抱子直接接種nceAssayinWheat的抗病性鑒定,現(xiàn)已成功地獲得兼抗赤霉病和*本項(xiàng)研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金的資助。參加本項(xiàng)工作的還有趙四維同志。根腐病的愈傷組織。
5、本文于1990年11月22日收到.4根腐病菌培養(yǎng)濾液1.獨(dú)/L與赤霉病菌培養(yǎng)濾衰1小麥赤.菌株和根腐曹株培養(yǎng)派液毒力的測(cè)試結(jié)果液0.25g/L的混合培養(yǎng)基(生物測(cè)定表明,根腐赤霉29號(hào)菌株根腐002號(hào)菌株病菌培養(yǎng)濾液1.5g/L的毒力相當(dāng)于赤霉病菌培養(yǎng)濾液0.25g/L的毒力)。培養(yǎng)濾液種子根長(zhǎng)相對(duì)抑制培養(yǎng)濾液!種子根長(zhǎng)相對(duì)抑制柿釋怡ga(cm)根長(zhǎng)柿釋1I數(shù)(cm)根長(zhǎng)(三)病菌培養(yǎng)濾液的制備(cm)(cm)CK2.80CK3.53分別從小麥赤霉病和根腐病嚴(yán)重發(fā)病地區(qū)6000.422.382001.731。80*收集的40個(gè)菌株中,用生物測(cè)驗(yàn)法,選出了產(chǎn)8000.662.144002.45
6、1.08生毒力強(qiáng)而穩(wěn)定的赤霉病菌”號(hào)菌株和根腐10000.762.048003.110.4212000.84病菌002號(hào)菌株,作為供試菌株,將赤霉病菌291.96*1號(hào)菌株的菌體放在PDA培養(yǎng)基上,在250C培*表示兩種菌株培養(yǎng)濾液毒力相當(dāng)。養(yǎng)7天后切菌絲塊接種在PS培養(yǎng)基中,在250C將前述所選出的菌株用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),培養(yǎng)21天后,經(jīng)過過濾、消毒和濃縮制成赤霉制備出培養(yǎng)濾液,然后對(duì)制出的兩種培養(yǎng)濾液病菌培養(yǎng)濾液。將002號(hào)菌株的菌體放在改良用種子萌發(fā)方法測(cè)試毒力,以確定兩個(gè)TITl株培Fries加麥汁的液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)15天養(yǎng)濾液毒力相當(dāng)?shù)呐浔?,測(cè)試結(jié)果見表1。后,經(jīng)過消毒和濃縮制成
7、根腐病菌的培養(yǎng)濾液。(二)不同篩選方法對(duì)篩選小麥兼抗赤霉(四)篩選方法病和根腐病愈傷組織誘導(dǎo)頻率的影響1.二步篩選法將小麥幼穗先接種在含將冬小麥和春小麥品種及其雜種的幼穗分3.0g/L根腐病菌培養(yǎng)濾液的培養(yǎng)基上,待長(zhǎng)出別接種在不同的選擇培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織,愈傷組織后,再轉(zhuǎn)到含0.5g/L赤霉病菌培養(yǎng)濾10天后觀察到在不含病菌的培養(yǎng)濾液的對(duì)照液的培養(yǎng)基上,或?qū)⒂姿胂冉臃N在含0.5g/L赤培養(yǎng)基上,愈傷組織呈白