微小rna在胸腺腫瘤組織的表達及其臨床意義new

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1、廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報２０１３Ｆｅｂ；３０（１）ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＵＡＮＧＸＩＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ·７９·微?。遥危猎谛叵倌[瘤組織的表達及其臨床意義石俊杰馮旭１鄭寶石王俊龍黃國雄王時俊（廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胸心外科南寧５３００２１）摘要目的：研究微?。遥危粒ǎ恚椋悖颍铮遥危粒?，ｍｉＲＮＡｓ）在人類胸腺腫瘤組織中的表達及其作用。方法：收集廣西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院２０１０年９月至２０１２年３月切除的４５例胸腺腫瘤組織標(biāo)本及腫瘤旁正常組織標(biāo)本。通過ｍｉＲＮＡｓ微陣點雜交法檢測腫瘤組織及其

2、癌旁正常組織的手術(shù)標(biāo)本中ｍｉＲＮＡｓ的表達情況，對癌組織及其癌旁正常胸腺組織進行定性判斷（癌和非癌）。結(jié)果：胸腺良性腫瘤和正常胸腺組織中對比發(fā)現(xiàn)有４種ｍｉＲＮＡｓ上調(diào)，分別為ｍｉＲ－１８３，ｍｉＲ－７ｅ－２，ｍｉＲ－２６ａ和ｍｉＲ２８（均Ｐ＜０．０５）；惡性胸腺腫瘤組織與正常胸腺組織相比，ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２３ａ、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－１７－５ｆ、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２１０和ｍｉＲ－１７表達明顯上調(diào)（Ｐ＜０．０５）。結(jié)論：ｍｉＲＮＡｓ與胸腺

3、腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的聯(lián)系，有可能成為一個有效的腫瘤標(biāo)志物用以對胸腺腫瘤的早期預(yù)測和診斷治療。關(guān)鍵詞微?。遥危粒恍叵侔?；腫瘤標(biāo)記；微陣點中圖分類號：Ｒ７３４．５文獻標(biāo)志碼：Ａ文章編號：１００５－９３０Ｘ（２０１３）０１－００７９－０３胸腺癌是我國胸外科較為常見的腫瘤，占前縱隔腫瘤的后經(jīng)病理診斷４２例為鱗狀上皮細(xì)胞癌，３例為胸腺瘤。４２６％。胸腺癌是來源于胸腺上皮細(xì)胞的縱隔惡性腫瘤，在病例鱗狀上皮細(xì)胞癌ＴＮＭ分期：Ｔ１２５例，Ｔ２１６例，Ｔ３１例。理組織學(xué)上表現(xiàn)出不同于胸腺瘤的惡性生物學(xué)行為。胸腺１

4、．２儀器與試劑：ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ掃描儀；ＱｕｎｔＡｒｒｙ軟件癌的治療以手術(shù)為主，但是術(shù)后容易復(fù)發(fā)，且腫瘤的惡性程（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＩｎｃ，美國）；Ｔｒｉｚｏｌ試劑（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，美國）；伊文度、浸潤能力隨著復(fù)發(fā)次數(shù)的增加往往也隨之增強。近年藍(lán)（ＢｉｏｔｉｕｍＩｎｃ，美國）；微陣點雜交芯片（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒＩｎｃ．，來，在小分子ＲＮＡ中新發(fā)現(xiàn)一類與調(diào)節(jié)基因表達密切相關(guān)Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）。的小分子非編碼單鏈ＲＮＡ，稱其為微?。遥危粒ǎ恚椋悖颍铮遥危粒?，１．３組織總ＲＮ

5、Ａ提?。河茫裕颍椋铮煲徊椒ㄌ崛〗M織中的總ｍｉＲＮＡｓ）。已經(jīng)有研究表明ｍｉＲＮＡｓ與腫瘤有密切相關(guān)ＲＮＡ，通過異丙醇沉淀法濃縮ＲＮＡ，用分光度計定量，甲醛［１］。ｍｉＲＮＡｓ是近年生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域新發(fā)現(xiàn)的一類非編碼了變性膠電泳質(zhì)檢總ＲＮＡ質(zhì)量。所有標(biāo)本都是新鮮冰凍，臨單鏈小分子ＲＮＡ，長度約２５個核苷酸，廣泛存在于真核生物床病理資料齊全。低溫環(huán)境下把上述標(biāo)本在研缽中充分研［２］。ｍｉＲＮＡｓ能對基因表達進行負(fù)調(diào)控，進而調(diào)節(jié)細(xì)胞的中碎，用Ｔｒｉｚｏｌ提取總ＲＮＡ。紫外分光光度計檢測ＲＮＡ純代謝、增殖、

6、分化和凋亡等基本的生理過程。目前研究表明，度，測總ＲＮＡ的Ａ２６０／２８０為１．８～２．０。ｍｉＲＮＡｓ在基因表達調(diào)控領(lǐng)域非常重要，其涉及的生命活動１．４ＭｉＲＮＡｓ微陣點雜交法：所有腫瘤標(biāo)本切除后立即冷包括生物個體發(fā)育、組織分化、病毒感染、癌癥發(fā)生發(fā)展的各凍放置，根據(jù)試劑商提供的說明，總ＲＮＡ的提取根據(jù)制造商［３］。但ｍｉＲＮＡｓ在胸腺癌發(fā)生過程中扮演的角色仍個方面的要求采用Ｔｒｉｚｏｌ法（ＧＩＢＣＯ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）。ＭｉＲＮＡｓ的不十分清楚。在本實驗研究中，我們分析了ｍｉＲＮＡｓ在

7、人類寡核苷酸微芯片載有３６８探針，相當(dāng)于２４８ＭｉＲＮＡｓ和１５個胸腺癌的表達，并檢測不同的ｍｉＲＮＡｓ出現(xiàn)在胸腺癌組織中ｔＲＮＡ，對兩種探針進行了不同的設(shè)計，包括活動序列和其他的分子生物學(xué)特征。特殊的前提物質(zhì)。使用這些獨特的序列，我們可以針對性的分析ＭｉＲＮＡｓ和ｐｒｉ－ｍｉＲＮＡｓ在同一基因的轉(zhuǎn)錄和表達以及１材料與方法各種ＭｉＲＮＡｓ分子表達水平的高低。而每個點的信號強度是從總強度中減去背景強度。１．１材料：標(biāo)本取自２０１０年９月至２０１２年３月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)院胸心外科接受手術(shù)治療的

8、胸腺腫瘤患者１．５數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)的分析：原始數(shù)據(jù)進行標(biāo)準(zhǔn)化分析使用４５例，其中男２８例，女１７例，年齡１２～５５歲，中位年齡ＧｅｎｅＳｐｒｉｎｇ軟件，ＧｅｎｅＳｐｒｉｎｇ分析過程中，每個ＭｉＲＮＡｓ均產(chǎn)生３個點數(shù)據(jù)和１個平均值，組間比較采用方差分析，Ｐ４２歲。手術(shù)切除標(biāo)本立刻放于－８０℃的冰箱凍存。取患者的胸腺腫瘤及腫瘤旁正常胸腺組織標(biāo)本進行研究。研究方＜０．０５為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。案均經(jīng)廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者本２結(jié)果人或法定代理人同意并簽訂知情同意書。４５例胸腺