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1、分類號：TS201.1單位代碼：10190研究生學號：201310043密級：無碩士學位論文蹄葉橐吾葉多糖的提取及其體外生物學活性研究ExtractionofPolysaccharidesfromLigulariaFischeriLeavesandDevelopmentsonBiologicalActivityinVitro研究生姓名：尤婷婷專業(yè)：食品科學與工程指導教師姓名：姜燕指導教師職稱：講師2016年4月萬方數(shù)據(jù)碩士學位論文萬方數(shù)據(jù)碩士學位論文摘要近幾年，我國空氣霧霾情況逐年加劇，人們日漸重視對咽喉、肺部的保健，提高了對加強自身
2、免疫力的意識。蹄葉橐吾的根及根莖在吉林省藥材標準中記載為山紫莞，主“溫肺下氣，消痰止嗽”，它的葉片具有特殊風味，是延吉人民喜食的一種野菜，有研究表明蹄葉橐吾葉片提取物具有消炎和提高免疫力等功效，目前主要集中為有機溶劑提取物，本文以水提物為研究對象，提取、精制并分級蹄葉橐吾葉多糖（PLF），最后從抗氧化能力及對細胞存活率的影響兩方面初步探討其生物學活性。主要研究了以下幾方面內容。研究了PLF的提取及精制工藝。首先，對葉片定性檢出酚類、多糖類、黃酮類、生物堿等活性成分；水提醇沉提取PLF，采用響應面試驗優(yōu)化PLF最佳提取工藝為料液比1:2
3、0（g/mL）條件下，在90℃水浴鍋中提取2h，收集濾液3次，PLF提取率為8.76%；殼聚糖絮凝純化PLF得到精制蹄葉橐吾葉多糖（DPLF），采用正交試驗優(yōu)化最優(yōu)精制工藝為在50mLPLF（濃度為2mg/mL）中加入殼聚糖（濃度為2%）1mL，30℃條件下攪拌，絮凝60min后蛋白質去除率為85.03%，脫色率為81.74%，多糖損失率為42.81%；通過定性實驗、紫外全波長掃描（UV-Vis）、紅外光譜掃描（FTIR）和高效液相色譜（HPLC）等技術確定DPLF的理化性質，初步判斷其除雜程度，特征基團及單糖組成成分。采用離子交換層
4、析柱梯度洗脫DPLF，結合瓊脂糖凝膠柱層析進一步分級，最終得到DPLFN，DPLFA1-1，DPLFA1-2，DPLFA2-1，DPLFA3-1，DPLFA3-2，DPLFA4-1和DPLFA5-1八個組分。通過UV-Vis、FTIR、HPLC和高效凝膠滲透色譜（HPGPC）確定了其中五種組分幾乎不含干擾類雜質；推測出可能含有的特征基團；明確了單糖組成成分，其中主要包含的單糖種類有：甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、巖藻糖和阿拉伯糖等；計算出該四種組分相對分子量（Mw）依次為4.0992×105，1.3016×106，3.4
5、410×104和1.0280×104。研究了DPLF的生物學活性。（1）DPLF的抗氧化活性：從總抗氧化能力、還原力和對DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基的清除能力五方面綜合評價，結果表明DPLF具有一定的抗氧化能力，尤其對DPPH自由基清除能力較強，半抑制濃度為0.0351mg/mL；（2）采用MTT比色法測定DPLF對ConA誘導的小鼠脾細胞存活率的影響：當濃度為2μg/L時，影響顯著，細胞存活率為100.3135%，此時ConA刺激細胞增殖指數(shù)為1.7606。關鍵詞：蹄葉橐吾葉多糖絮凝純化抗氧化能力細胞存活率I萬方數(shù)據(jù)
6、碩士學位論文AbstractTheairofhazeinChinaisincreasedrecentyears.Peopleincreasinglypaymuchattentiontothethroatandlungcareandimprovingtostrengthentheirownimmunity.TherootandrhizomeofLigulariafischeriwererecordedas“ShanZiYuan”inJilinprovincemedicinalstandard,itseffectis“Warmlung,l
7、owingthebreath,eliminatingphlegmsyndromes”.LigulariafischerileaveswithspecialflavorisakindofediblewildherbspopularlyinYanJi.StudieshaveshownthatLigulariafischerileafextractshaveanti-inflammatoryandenhanceimmunity,etc,mostofwhichwereorganicsolventextracts.Inthispaper,aqu
8、eousextractastheresearchobject,extracted,purifiedandgradedtheLigulariafischerileafpolysaccharide(PLF).Twobiolo
