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《天津市流感病毒分子流行病學(xué)初步的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文天津市流感病毒分子流行病學(xué)的初步研究姓名：李穎申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：醫(yī)學(xué)微生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳錦英20030801天津市流感病毒分子流行病學(xué)的初步研究摘婺流行性感冒(流感)是危害人糞健康的常見急性傳染癇，以其抗原變異頻繁雖攮發(fā)大囂著稱，圓瑟流感瘸攥酌實驗室鑒溺戈憊重要。流感是第一個實行全球性監(jiān)測的傳染瘸，天津自2001年起被WHO納入流感般鍘網(wǎng)點。對天津市流感瘸薄進(jìn)行流行瘸學(xué)初步研究，為防治流感提供分子生物學(xué)基礎(chǔ)是零岳胥究之強的。本研究叁2001年至2003年在天津市備夫醫(yī)院采爨流罄樣病人標(biāo)本5
2、43份，綴MDCK細(xì)胞和雞胚分離墻養(yǎng)病毒，得到AI(H1N1)礴株13贊，A3(H3N2)毒揀75彥}，B毒揀斡資，2001--2002年天津棗濺行譙勢椽為A3(H3N2)(42，64)，2002--2003年流行優(yōu)勢株為B(90／123)，兩年間發(fā)生了流感病二毒優(yōu)勢流行株型的改變。繼麗，我翻愆掰發(fā)現(xiàn)酶A3《耩3N2)耍型“O”相毒揀遴杼分子生物學(xué)的韌步t研究，提取病毒液中的RNA，設(shè)計引物進(jìn)行RT-PCR擴增HAl基因全序列，將擴增產(chǎn)銹競瞳予PMD-18Tvector或pGEM—Teasyvector，筏建重縫壤羧。
3、對莢進(jìn)行序別分析顯示，在受體結(jié)合部位后壁第183位氨基酸做點上“O”相簿株為『‘組氨黢(H)，蔗“D”相為亮氨黢(L)。未發(fā)現(xiàn)國外文獻(xiàn)報道的。194位，226位i氨基酸的改變。在相應(yīng)豹乙型流感病毒“O”籀變異酶研究巾，發(fā)現(xiàn)了197位土增加了糖基化位點，符合國外報道。這一結(jié)果表明，流感癇毒的相變異機制復(fù)雜，它霹糍與HA豢鑫弱寒緩縫毒奄藩交囂細(xì)藏凌覆痍毒受傣麴交詫密穗竣美，毒待進(jìn)一步研究。為了明確2002—2003年天津市B型流感瘸毒抗原變髯的楓戴，我們選擇分離出的有代表性瀚8株毒撩(1椽為Yagamata系，其余為Vic
4、toria系)，握取瘸毒液RNA，利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈艇應(yīng)一單鏈構(gòu)漿多態(tài)性(RT-PCR．SSCP)對乙奎流感瘸毒易發(fā)生黧器敦HAl鄂分308bp萋困片段進(jìn)行突燮篩選，根據(jù)奄泳潛強形不同將其分為4類，每類中各選一株P(guān)CR產(chǎn)物直接測序，將所擴增的片段與國露流行轅B嫩。ngk。鞋g據(jù)30，20el(Victoria系)斃較，B，天滌／02／145類簿棟，tB，天津／02／221類毒株，B／天津／02／222類毒株，核苷酸序列間源性分別為：964％，96，4％，99．O％，與B／Sichuan／379／99(Yagamata系
5、)比較，B／天津／02／12l類毒棘棱螢酸序列鞫源性為93．1％。在荔交彝送沈較，嗣源羧仍髓這羽90％懿上，結(jié)果襲明，天津市B型流感病毒抗原交異幅度坷i大，屬于抗原漂移，成密切關(guān)注萁變化趨勢。與鼗閡時，本研究曼示了SSCP{睪先良籽鮑流感瘋毒流行糠簿選方法韻可行性，值得在今后的工作中采納和進(jìn)一步研究。!關(guān)鍵滔：流感病毒漉孬瘸學(xué)調(diào)查穗交羚單穗擒象多態(tài)佳HA萋因2。'，PrimaryStudtyontheMolecularEpidemiologyofInfluen'主aVirusesinTianjinAbstract．kI
6、nfluenzaisacommonacuteineectiousdiseasewhichisharmfullohumanhealth．Influenzavirusisveryfamousforitswiderangeandfrequentvariafitch，sothevirussurveillanceisquiteimportantInfluenzaisthefirstineectiousdiseasewhichwaspracticedsurveillancearoundtheworld吵TianjinWaSadmi
7、ttedtooneoftheInflfienzaSurveillanceNetworksbyWHOfrom2091．‘秘lopurposeofthisstudyistoinvestigateInfluenzaepidemiologyinTianjinandprovidemolecularbiologybasisforInfluenzapreventionandcure．543sampleswef#collectedfrominfluenza，likepatientsinTianjinfrom209lto2093，MDC
8、Kcelland9-llday-oldembryonatedeggswereusedtoviruscultivationandisolation．Wegot13viruseserAl(HINl)，75virusesofA3(H3N2)and99virusesofB．ThecirculatingdominantstrainWaSbe
