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1、學(xué)校代碼：10264研究生學(xué)號：M120250522上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文喹烯酮在刺參（Apostichopusjaponicus）題目：幼參養(yǎng)殖中的安全性研究Investigationonthesecurityofquinocetoneinjuvenile英文題目：seacucumber(Apostichopusjaponicus)culture專業(yè)：食品工程研究方向：水產(chǎn)品質(zhì)量與安全姓名：安紅紅指導(dǎo)教師：張秀珍研究員二O一五年五月上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人
2、在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：2015年6月5日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描
3、等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密√學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：2015年6月5日日期：2015年6月5日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會成員名單姓名工作單位職稱備注孫虎山魯東大學(xué)教授主席郭承華煙臺大學(xué)教授委員邱盛堯煙臺大學(xué)教授委員答辯地點山東省海洋資源與環(huán)境研究院答辯日期2015.6.5上海海洋大學(xué)碩士論文喹烯酮在刺參（Apostichopusjaponicus）幼參養(yǎng)殖中的安全性研究摘要刺參（Apostichopusjaponicus），又稱仿刺參，屬于棘皮動物門(E
4、chinodermata)，海參綱(Holothuroidea)，具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值。隨著刺參需求量的不斷擴(kuò)大，我國的刺參養(yǎng)殖業(yè)也迅速發(fā)展起來。但在養(yǎng)殖過程中，刺參病害、死亡現(xiàn)象頻頻發(fā)生，合理用藥顯得尤為重要。喹烯酮(quinocetone)是我國首創(chuàng)的、擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的一類新型喹噁啉類獸藥，2003年農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)其作為抗菌促生長劑應(yīng)用在豬飼料中。喹烯酮對動物具有明顯的抗菌促生長作用，且具有在動物體內(nèi)代謝快、殘留少、不蓄積等優(yōu)點，突破了傳統(tǒng)獸藥的局限性。目前，喹烯酮廣泛地應(yīng)用在雞、鴨、豬等畜禽中，在魚類中也有應(yīng)用研究報道，
5、但在海參中至今未見相關(guān)報道。本文通過研究在刺參保苗期間，喹烯酮對幼參的生長、非特異性免疫及抗應(yīng)激能力的影響，探討了喹烯酮在刺參幼參保苗期間的使用安全性。證實了喹烯酮能導(dǎo)致刺參體內(nèi)3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（MQCA）殘留，并通過研究在刺參保苗期間和養(yǎng)成期間，喹烯酮及MQCA在刺參體內(nèi)的分布和消除規(guī)律，探討了喹烯酮對養(yǎng)成刺參食品安全性的影響。實驗結(jié)果表明，喹烯酮對刺參有明顯的促生長作用，各實驗組刺參幼參的增重率、特定生長率和成活率均高于對照組。隨著喹烯酮濃度的增加，增重率、特定生長率和成活率都呈現(xiàn)出先升高后下降的趨勢，20mg/kg組
6、最高。在飼料中添加適量喹烯酮可以影響刺參幼參的免疫指標(biāo)，隨著喹烯酮濃度的增加，ACP、AKP和SOD三種酶活性呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢，存在劑量效應(yīng)，20mg/kg組的三種酶活性最高；隨著時間的延長，實驗組三種酶活性與對照組的差異減小，50天后SOD、ACP活性接近對照組水平。實驗表明，高濃度的喹烯酮對幼參可能產(chǎn)生一定毒性，且使其抗應(yīng)激能力變差。由實驗結(jié)果可以看出，在刺參保苗期間喹烯酮的最適添加量為20mg/kg。本實驗優(yōu)化了高效液相色譜法測定刺參中喹烯酮殘留量的方法。樣品經(jīng)乙酸乙酯提取，正己烷脫脂凈化，色譜柱為MGC18（250m
7、m×4.6mm，5μm），流動相為乙腈+水（45+55，V/V），在312nm波長下進(jìn)行檢測。結(jié)果表明，在0.05μg/mLI上海海洋大學(xué)碩士論文~1.00μg/mL范圍內(nèi)喹烯酮的響應(yīng)值與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為Y=5.41e+002X+1.24e+002，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9995。在添加濃度為20~100μg/kg時，平均回收率在75.9~86.2%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.15~6.48%之間。該方法簡便快捷，靈敏度高，重復(fù)性好，精密度和準(zhǔn)確度均達(dá)到殘留分析的要求。本實驗研究了喹烯酮在刺參幼參體內(nèi)的殘留消除規(guī)律，
8、用藥一天后，刺參幼參體內(nèi)喹烯酮的殘留量迅速達(dá)到較高濃度，表明喹烯酮在刺參體內(nèi)吸收快；隨著時間延長，各濃度組刺參體內(nèi)喹烯酮的殘留量在一定范圍內(nèi)小幅度波動，且殘留量與用藥濃度大致成正比關(guān)系。停藥兩天后，除100mg/kg組外，其他組喹烯酮
