艾灸對(duì)ad大鼠學(xué)習(xí)記憶、gsk-3β和磷酸化tau蛋白影響的研究

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1、１０１６０分類(lèi)號(hào)民２４６．６單位代碼：學(xué)號(hào)：２０１２２００９２？ｆｆ審該碩：ｔ學(xué)位論文－題目；義灸對(duì)ＡＤ大鼠學(xué)習(xí)記憶、ＧＳＫ３Ｐ和雜酸化ｔａｕ蛋白影晌的研究Ｅｆｆｅｃｔｏｆｍｏｘｓｍｅ－ｔｎｏｎＡｈｅｓｉｂｕｉｏｌｚｉｒＤｉ’ｔｓｒｎｎａｎｄｍｅｍｏ－ｒ￣—ｅａｓｅｍｏｄｅｌｒａｌｅａｉｇｙ，－ａｎｄａａｕ－ｒｔｅＧＳＫＳｈｏｓｈｏｒｉｎｐｐｐｙｌｔｅｄＴｐｏ研究生：王靜蓉導(dǎo)?zhēng)?；許建陽(yáng)＾合臨床學(xué)科專(zhuān)業(yè)：中西醫(yī)結(jié)２０１３１２一論文課題起止時(shí)間：年月２０１５年３月日２日１５ｉ

2、它文完成寸間：年４月．．，．ｆ．＇＇：？－：．’＇．－Ａ；；－Ｌ三．ｆ‘／．＇，’：八‘＾＇Ｗ滿的；？■一－．■．＇’：■．．成＾，遼寧醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加Ｌ義標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)拘的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。一論申請(qǐng)學(xué)位論

3、文與資料若有不實(shí)乏處，本人承擔(dān)切相關(guān)責(zé)任。文作者簽名：＾職日期：ｋ＇？ｉｌ寧醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解巧寧醫(yī)學(xué)院有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究證生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬迂寧醫(yī)學(xué)院。本人保畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為巧寧醫(yī)學(xué)院，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署葦為迂寧醫(yī)學(xué)院。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)審件和禮盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？桑虂V公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容（保密巧容除外），Ｌ乂采用影巧、縮巧論或文其他手段保存論文。作者簽名：＿主務(wù)襄指導(dǎo)教

4、師簽養(yǎng)：方8·中文論著摘要·艾灸對(duì)AD大鼠學(xué)習(xí)記憶、GSK-3β和磷酸化tau蛋白影響的研究目的通過(guò)建立阿爾茨海默(AD)大鼠模型，觀測(cè)其學(xué)習(xí)記憶、海馬GSK-3β活性、磷酸化tau蛋白部分位點(diǎn)表達(dá)情況等，探討艾灸在防治AD中可能的作用機(jī)制，為早期防治AD提供新思路和理論依據(jù)。方法用Morris水迷宮淘汰反應(yīng)過(guò)于遲鈍或敏感的大鼠，篩選出60只2月齡雄性SD大鼠，再隨機(jī)分為假手術(shù)組12只、手術(shù)組48只。采用雙側(cè)側(cè)腦室微量注射鏈脲佐菌素（STZ）的方法建立擬AD大鼠模型，假手術(shù)組以檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液替代STZ注射。第9天去除術(shù)后死亡大鼠，再將手術(shù)組剩余36只隨機(jī)分為模型組、對(duì)照

5、組、艾灸組，每組各12只。術(shù)后第10天，艾灸組應(yīng)用艾灸任督脈穴“關(guān)元”“長(zhǎng)強(qiáng)”“命門(mén)”“百會(huì)”的方法干預(yù)一個(gè)月，對(duì)照組予西藥鹽酸多奈哌齊混懸液灌胃，假手術(shù)組、模型組不予處理。治療結(jié)束后第2天，用Morris水迷宮測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，測(cè)試結(jié)束后第2天取材，用ELISA法、免疫組織化學(xué)、Westernblot、超微量ATP酶測(cè)試盒以及圖像分析技術(shù)等手段，分別檢測(cè)各組大鼠海馬區(qū)GSK-3β活性及tau蛋白磷酸化位點(diǎn)（Ser396/Thr231）的含量和表達(dá)水平，額葉ATP酶活力變化以及光鏡下觀察大鼠海馬CA1區(qū)形態(tài)學(xué)的改變。1結(jié)果1、Morris水迷宮檢測(cè)結(jié)果示模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力明顯

6、受損,主要表現(xiàn)在前4天平均潛伏期明顯延長(zhǎng)，前4天平均游過(guò)的路徑距離與總路程百分比（距離百分比）明顯下降，空間探索實(shí)驗(yàn)中穿臺(tái)次數(shù)減少，120s內(nèi)平臺(tái)象限停留時(shí)間短，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）,而艾灸與西藥鹽酸多奈哌齊對(duì)術(shù)后大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力有一定改善作用,主要表現(xiàn)在前4天平均游泳距離百分比較模型組上升，尤其是第3天、第4天距離百分上升，120秒停留時(shí)間較模型組延長(zhǎng)，且象限轉(zhuǎn)換次數(shù)增多（均P<0.05），且兩種治療效果差別不大（P>0.05）。此外，比較各組大鼠空間探索軌跡與策略有明顯不同：假手術(shù)組軌跡集中在平臺(tái)附近，搜索靈活反應(yīng)快，但模型組搜索范圍大，軌跡呈隨機(jī)式或轉(zhuǎn)圈式；艾

7、灸組雖不如假手術(shù)組搜索集中且靠近平臺(tái)，但較之模型組軌跡呈現(xiàn)出大鼠在較小的范圍內(nèi)不斷變換方式搜索，說(shuō)明艾灸能部分抑制學(xué)習(xí)記憶的損傷，效果與鹽酸多奈哌齊差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。2、ELISA檢測(cè)大鼠海馬GSK-3β活性結(jié)果示：造模后大鼠海馬GSK-3β活性明顯升高，而兩種治療方法對(duì)GSK-3β活性升高均有抑制作用；且鹽酸多奈哌齊抑制作用大于艾灸，差異均具有統(tǒng)計(jì)意義。（均P<0.05）3、免疫印跡定量檢測(cè)結(jié)果顯示：模型組tau[pT231]、tau[pS396]相對(duì)表達(dá)量高于艾灸組