資源描述：
《赤蘚糖醇植物甾醇酯的制備及抗腫瘤功效研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號密級碩士學位論文題目：赤蘚糖醇植物甾醇酯的制備及抗腫瘤功效研究英文并列題目：Preparationandanti-tumoreffectoferythritolphytosterolester研究生：張敏專業(yè)：食品科學研究方向：食品加工與配料導師：馮骉教授指導小組成員：張曉鳴教授、賈承勝副教授學位授予日期：2015年6月答辯委員會主席：張灝教授江南大學地址：無錫市蠡湖大道1800號二○一五年六月摘要摘要植物甾醇具有抗癌、消炎退熱、降膽固醇和免疫調(diào)節(jié)等多種重要的生理功能，但是其油溶低、水不溶和熔點高等性質(zhì)限制了它在醫(yī)藥、食品等行業(yè)的開發(fā)應(yīng)用。已有研究嘗試
2、將植物甾醇進行改性，合成親油性植物甾醇酯，本研究嘗試通過化學改性合成親水性植物甾醇酯；在此基礎(chǔ)上，比較了植物甾醇及其改性產(chǎn)物的體外抗腫瘤功效，探索了抗癌作用機理，并對改性產(chǎn)物的物化性質(zhì)進行了初步測定。首先通過化學及酶催化兩步法合成了親水性的植物甾醇二酯，以酯化率為目標確定了最佳的合成工藝：脂肪酶Lipozyme435作催化劑，叔丁醇作溶劑，脂肪酶用量為100g/L，單酯濃度為50mmol/L，底物摩爾比（單酯：糖醇）1:3.5，分子篩用量80g/L，55℃，反應(yīng)120h，在此條件下，合成植物甾醇赤蘚糖醇琥珀酸二酯的酯化率可達82.0%。確定了用高效液相色譜、
3、薄層層析色譜及硅膠柱層析分離植物甾醇琥珀酸單酯和植物甾醇赤蘚糖醇琥珀酸二酯的條件。高效液相色譜分離單酯及二酯的流動相均為甲醇/甲酸（1000/1，v/v）；薄層層析色譜及硅膠柱層析分離植物甾醇琥珀酸單酯的展開體系是石油醚/乙酸乙酯/甲酸（13/7/0.02，v/v/v），分離植物甾醇赤蘚糖醇琥珀酸二酯的展開體系是乙酸乙酯/甲醇/甲酸（18/2/0.15，v/v/v）。經(jīng)質(zhì)譜和傅里葉變換紅外光譜分析，確定合成的產(chǎn)物是目標產(chǎn)物。采用MTT法考察了不同濃度植物甾醇、植物甾醇琥珀酸單酯及植物甾醇赤蘚糖醇琥珀酸二酯對腫瘤細胞增殖的抑制作用；流式細胞儀檢測凋亡率、周期分
4、布、Ca2+含量及線粒體膜電位的變化。結(jié)果表明：植物甾醇、單酯和二酯均能夠明顯抑制腫瘤細胞SGC-7901、HEPG2及A549的增殖，且抑制作用存在劑量-效應(yīng)關(guān)系和時間-效應(yīng)關(guān)系，凋亡早期及凋亡晚期的細胞比例隨作用劑量的增加及作用時間的延長而顯著增加，細胞形態(tài)出現(xiàn)典型的凋亡特征，說明酯化改性保留了植物甾醇抑制腫瘤細胞增殖并誘導其凋亡的功效。細胞周期阻滯在S期，線粒體膜電位顯著降低，細胞內(nèi)Ca2+含量顯著增加，說明植物甾醇及其酯可能通過阻滯細胞S期，線粒體依賴途徑，激活核酸內(nèi)切酶及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通路等來誘導腫瘤細胞的凋亡。通過研究改性產(chǎn)物的水溶性、熔融結(jié)晶特性及熱穩(wěn)
5、定性，結(jié)果表明：植物甾醇糖醇二酯的親水性明顯高于植物甾醇；植物甾醇赤蘚糖醇二酯的熔化及結(jié)晶溫度均有所升高；其裂解溫度高于植物甾醇，說明具有更好的熱穩(wěn)定性。關(guān)鍵詞：植物甾醇；改性；植物甾醇酯；體外抗腫瘤；細胞凋亡IAbstractAbstractPhytosterolshavemanyimportantbeneficialproperties,suchasanti-cancer,anti-inflammatory,cholesterol-lowering,antioxidantcapacity，immunoregulationandsoon.However,t
6、heirpoorsolubilityinoil,insolubilityinwaterandhighmeltingpoint,limitstheirapplication.Previousstudieshavesynthesizedphytosterolesterstoimprovetheirsolubilityinoil.Thepresentstudyhassynthesizedphytosterolestersviachemicalmodificationtoimprovetheirsolubilityinwater.Onthebasisofthismo
7、dification,theanti-tumoreffectofphytosterolsanditsmodifiedproductsinvitroandtheiranti-cancermechanismwereinvestigated.Firstly,hydrophilicphytosterolesterswaspreparedviachemicalandenzymaticways.Thehighestesterificationratiowasobtainedunderthefollowingconditions:Lipozyme435ascatalyst
8、andtert-butanolassolvent,L
