文蛤多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)分析及抗氧化、免疫活性初步研究

文蛤多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)分析及抗氧化、免疫活性初步研究

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1、分類號密級碩±學(xué)位論文題目;文始多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)分析及抗氧化、免疫活忡初步研究英文并歹。題目:Extraction,puri打cation,structuralanalysisandantioxidant,immunityactivitiesreliminarstudyofpypolysaccharidesfromMeretrixmeretrixLinnaeus研究生:奎述專業(yè);藥學(xué)研究方向:微生物與生化藥學(xué)導(dǎo)師:陸震鳴副教授指導(dǎo)小組成員:

2、史勁松教授李恒副教授學(xué)位授予日期:答辯委員會主席:?槪子江畝大學(xué)地址:無錫市蠢湖大道1800號二〇—五年十二月I獨(dú)倒性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究王作及?。崳姷玫难芯砍晒宋闹刑貏e加>乂標(biāo)注和致謝的地方外,論文?盡我所知,除中不色含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含本人為獲得江南大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料一同工作的同志.與我對樹究所做的獻(xiàn)均芭在論文中作了明確的說明并表示謝素。簽克:嫂日期:足^文〇[渾U3Bj關(guān)于論

3、文使用搜權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解江南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定:江南大學(xué)有權(quán)保留并向國家有關(guān)部n或機(jī)拘送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查巧和猜巧》^^將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫,可進(jìn)行檢索,可采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文,人電一致并互本子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相.保密的學(xué)位論文在解密后也遵守此規(guī)定。簽名:寺睪導(dǎo)師簽義:叩4衫為、日期:W玉坪1么巧X巧摘要摘要’e化從/xme/它的JCLinnaeus.)主,資源豐富文貽(M產(chǎn)于

4、我罔東部沿海,具有較島的替養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值一。自古W來文始即為藥食同源的動物之,傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)證明文始浸提物,文貽所含有的蛋白具有治療發(fā)炎、濕熱、瘡、保肝和防癌的功效。近代研究表明、多一糖、脂肪酸等是其生理、藥理活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。多糖類物質(zhì)是文貽中的類主要活性物,、提高免疫及抗腫瘤等方面均具有良好的生物活性,質(zhì)其在抗氧化。盡管如此目前對于文始多糖的研究仍不夠系統(tǒng)和深入,關(guān)于文始《糖的結(jié)構(gòu)W及活性等方面的信息仍然一匿乏,。為了進(jìn)步了解文始中多糖成分的理化性質(zhì)和生物活性本課題對文始多糖進(jìn)行了提取,、分離和結(jié)構(gòu)分析并初步開

5、展了抗氧化及免疫調(diào)節(jié)活性研究。本課題依次采用酶法提取、藝醇沉淀、Sevage法除蛋白、石醇再沉淀的方法提取獲6-得了文始多糖.01.0%。,提取得率文始干重計(jì))為0W文始多糖得率為指標(biāo),選取加酶量、加酶種類、提取時(shí)間和料水比四個(gè)岡素進(jìn)行多糖提取的單岡素條件優(yōu)化。優(yōu)化后的提取工藝為:膜蛋白酶用量2.0%(W底物計(jì)),料水比1:10,提取時(shí)間4h。采一5-evae.0%的文始粗多糖DEAE的纖維素層用Sg法脫蛋白得到蛋白含量小于,進(jìn)步用析柱和Superdex-200凝膠層析柱進(jìn)行分離純化后得到兩個(gè)多糖組分MMPX

6、-1和-2MMPX。erdex200MPX-PX-經(jīng)S叩凝膠色譜括法對M1和MM2進(jìn)行純度鑒定,證明二者都一一NMR是均的多糖組分。進(jìn)步采用紫外光譜UV)、紅外光譜IR)、核磁共振、氣相((()色譜(GC)和高視酸氧化、Sim化降解、甲基化反應(yīng)等方法對上述兩個(gè)文始多糖組分進(jìn)行6MMPX-11.X結(jié)構(gòu)表征及鑒定:0410Da,其單糖組成。分析結(jié)果表明的平均分子量為,相應(yīng)的摩爾百分比為21.1%,29%,49.0%包括甘露糖、葡萄糖和半乳糖.9主鏈為;--^---半乳糖,。一43葡萄糖,14甘露糖,支鏈為連接

7、在主鏈半乳糖糖基C6)|()p5一3-a-MMPX-25X位置上的"葡萄糖和a構(gòu)型末端葡萄糖。的平均分子量為.010Da,)一--;.1主耍由葡萄糖和半到糖組成,其摩爾百分比分別為877%和2.3%,主鏈為。4〇1葡)--^3--萄糖,支鏈為連接在主鏈葡萄糖C6位置上的3半乳糖和構(gòu)型末端半乳糖。。)(P一步對純化得到的兩個(gè)多糖組分進(jìn)行體外抗氧化義細(xì)胞免疫活性的評價(jià)進(jìn)。W抗壞--血酸為陽性對照,對文始多糖MMPX1和MMPX2進(jìn)行體外清除DPPH自由基、超氧陰離子自由基、徑基自由基的能力yX及總還原能力的表征等

8、實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,兩個(gè)一MMPX-2-多糖組分均具有定的抗氧化活性,的抗氧化活性略高于MMPX1。yj旨多糖--LPS為陽性對照,1和MMPX2誘導(dǎo)小鼠單核巨隨細(xì)胞RAW2647對文始多糖MM

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