楊樹應(yīng)答鹽脅迫wrky基因的篩選及功能分析

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1、學校代碼；１０２２５學號；Ｓ１５７２６學化冷文楊樹應(yīng)答鹽脅迫ＷＲ公ｒ基因的篩選及功能分析王繼穎指導教師姓名：姜廷波教授東北林業(yè)大學申請學位級別：碩±學科專業(yè)；林木遺傳育種論文提交日期１５年４月論文答辯日期；２０１５年６月：２０授予學位單位；東北林化大學授予學位日期；２０１５年６月答辯委員會主席：論文評閱人；‘．■？．．．．．．－．＇、產(chǎn)：－又于＼心＇：；；心Ｖ．二一；Ｖｉ＾／’Ｖ／．＇＇．ｔ－．？．．．Ｖ．？＇．？．

2、．—＇一．’．占：＾ｖ；一：．請．Ｋ苗巧，＇－．？ＶＶ一二■＇．＇、■－．＞．－：＇＇＇ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｄｅ：１０２２５ＲｅｇｉｓｔｅｒＣｏｄｅ；ＳＩ５７２６ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｓｉｓｏｆｏｌａｒＷＲＫＹｙｐｐｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｅｎｅｉｎＫｓｏｎｓｅ化ｓａｌｔｓｔｒｅｓｓｐｇｐＣ

3、ａｎｄｉｄａ化：ＪｉｉｎｇＷａｎｙｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＴｉｎｂｏＪｉａｎｐｇｇＡｃａｄｅｍｉｃＤ巧ｒｅｅＡｌｉｅｄｆｏｒ：ＳｃｈｏｏｌｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙｐｐＳｅｃｉａｌｉｔ：ＦｏｒｅｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｐｙｇＤａｔｅｏｆＯｒａｌＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｊｕｎｅ２０１５，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：ＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ＾摘要植物受到不良環(huán)境脈迫，會通過激活或抑制脅

4、迫相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及生理生化的改變來適應(yīng)環(huán)境的變化。轉(zhuǎn)錄因子在響應(yīng)環(huán)境信號和調(diào)控基因表達變化中起重要作用。本研ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子基因究為篩選和鑒定耐鹽脅迫的楊樹，從楊樹基因組數(shù)據(jù)庫中獲得１１９個楊樹ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子基因的全長ｃＤＮＡ序列，并對其表達特性進行分析，對２個鹽脅迫誘導表達的眠Ｒｉｉ：巧６、基因進行功能分析，結(jié)果如下：利用實時癸光定量ＰＣＲ技術(shù)分析１１９個楊樹ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子基因在鹽脅迫條件下的表達水平。結(jié)果表明，有５１個ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子基因在鹽脅迫條件下表現(xiàn)出差異表達，

5、其中１７個基因下調(diào)表達，３４基因上調(diào)表達。Ｗ１３個應(yīng)答鹽脅迫的基因為代表，研究楊樹ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子基因在脅迫條件下不同脅迫時間和不同組織的差異表達。結(jié)果表明，楊樹ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子基因在根，莖，葉組織中均有表達，但它們的表達水平和３表達模式顯著不同，在根部，送１３個基因從處理小時后開始被誘導表達，并在９?。崳姇r表達水平最商。在葉中的表達情況與根中相似。在莖中，１３個基因表這沒有響應(yīng)ＮａＣＩ脅迫。將鹽脅迫誘導表達水平最商的ＷＲＫＹ５６、ＷＲＫＹＨ６轉(zhuǎn)錄因子基因ｃＤＮＡ插入到植物表達載體

6、ＰＢＩ１２１，用簾花法轉(zhuǎn)化擬南芥，比較轉(zhuǎn)基因擬南芥和野生型擬南芥■的根長，鮮重Ｗ、種子萌發(fā)率和生理指標等。結(jié)果表明，轉(zhuǎn)趴２／：巧６和Ｗ化基因擬南芥在鹽脅迫條件下種子萌發(fā)率、根長、鮮重明顯提高、ＭＤＡ含量明顯降低、脯氨酸含量明顯提高。在轉(zhuǎn)ＷＲＫＹ５６基因株系和轉(zhuǎn)ＷＲＫＹ１１６基因株系ＳＯＤ巧ＰＯＤ活性一ＷＲＫＹ表現(xiàn)不致，轉(zhuǎn)５６基因株系ＳＯＤ和ＰＯＤ活性比野生型明顯提髙，轉(zhuǎn)ＷＲＫＹ１１６基因株系ＳＯＤ和ＰＯＤ活性比野生型明顯降低。關(guān)鍵詞ＷＲＫＹ轉(zhuǎn)錄因子；基因差異表達；小黑楊：鹽脅迫

7、－Ｉ－ＡｂｓｔｒａｃｔＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅａｄａｐｔｉｖｅＫｓｏｎｓｅｓｃｏｍｍｏｎｌｕｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎａｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｒｒｅｒｅ巧ｉｏｎｏｆｅｎｅｓｐｙｐｐｇｕｏｎｓｉｇｎａｌｅｒｃｅｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｘｔｅｒｎａｌｓｔｉｍｕｌｉ．ＷａｎｔａｄａｔａＷｌｉｔｙｉｓｍａｉｎｌｙｐｐｐｐ＊ｏｐｅｒａｔｅｄｂｙｔｈｅＫｌａｔｉｏｎｏｆｖａｒｉｏｕｓｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏ

8、。ｆａｃｔｏｉｓ．Ｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｒｏｒｅｓｓｈａｓｂｅｅｎｍａｄｅｇｕｐｇｐｇ＇ｉｎｕｎｄｅｒ巧ａｎｄｉｎｔｈｅｅｎｅｓｒｅｓｏｎｓｅｔｏｖａｒｉｏｕｓｓｔｒｅｓｓｅｓ打ｕｍｅｒｏｕｓｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｆａｃｅｒｓｉｎｇｇｐ，ｐｔｒ－ｌａｎｔｓｈａｖｅｂｅｅｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．ＷＲＫＹａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓａｒｅｏｎｅｏｆｔｈｅｌａｒｇｅｓｔｒｏｕ