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1、分類號(hào)：S855.3單位代碼：10193密級(jí)：學(xué)號(hào)：2012635碩士學(xué)位論文豬/牛IFITMs基因的克隆、表達(dá)及其抗口蹄疫病毒作用Cloning,expressionandantiviralactivityagainstFMDVofSusscrofa/Bostaurusinterferoninducedtransmembraneproteingenes作者姓名：譚鵬學(xué)位類別：農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)名稱：預(yù)防獸醫(yī)研究方向：動(dòng)物病毒學(xué)指導(dǎo)教師：金寧一研究員所在學(xué)院：動(dòng)物科技學(xué)院2015年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲
2、明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝所列內(nèi)容外，論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。本學(xué)位論文所有內(nèi)容若有不實(shí)之處，本人愿意承擔(dān)一切相關(guān)法律責(zé)任和后果。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：
3、研究生在校攻讀學(xué)位期間所完成的論文及相關(guān)成果的知識(shí)產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)所有，并同意將本論文的版權(quán)授權(quán)給吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。2、本人（同意/不同意，務(wù)必打印后填寫）吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)將本論文版權(quán)授權(quán)給不同媒體進(jìn)行電子出版、多媒體出版、網(wǎng)絡(luò)出版以及其他形式出版（涉密學(xué)位論文解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）。3、本人聲明畢業(yè)后若發(fā)表在攻讀研究生學(xué)位期間完成的論文及相關(guān)的學(xué)術(shù)成果，必須以吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)作為第一署名單位。學(xué)位論
4、文作者簽名：簽字日期：年月日指導(dǎo)教師簽名：簽字日期：年月日摘要干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白（Interferoninducibletransmembraneproteins,IFITMs）屬于膜相關(guān)蛋白中的一個(gè)大家族——CD225蛋白超家族，包括兩個(gè)疏水的膜相關(guān)域（IM1,IM2），兩者之間由一個(gè)保守的細(xì)胞內(nèi)環(huán)狀結(jié)構(gòu)分隔。在內(nèi)源性表達(dá)的基礎(chǔ)上，干擾素誘導(dǎo)及病毒感染都會(huì)使該類蛋白的表達(dá)量進(jìn)一步上調(diào)。IFITMs功能多樣，參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞黏附/增殖、腫瘤形成等多個(gè)方面，但近幾年使其再度成為研究熱門的是因其在抗病
5、毒方面的突出作用—自2009年cell雜志首次報(bào)道IFITMs在甲型流感病毒（InfluenzaAvirus,IAV）感染早期顯著抑制病毒復(fù)制而引發(fā)廣泛關(guān)注后，截止目前，IFITMs抗病毒譜已包含至少10個(gè)科（包括正黏病毒科、反轉(zhuǎn)錄病毒科、披膜病毒科、冠狀病毒科、絲狀病毒科、黃病毒科、彈狀病毒科、嗜肝DNA病毒科、呼腸孤病毒科）中20多種病毒。但是當(dāng)前研究大多集中于人、鼠方面，而在其他領(lǐng)域涉及不多。鑒于人IFITMs的抗病毒研究成果，人們亟待探索豬/牛IFITMs（Susscrofa/BosTaur
6、usIFITMs,s/bIFITMs）基因簇是不是也有類似的作用。目前僅有幾篇關(guān)于豬IFITM3抗流感病毒以及豬IFITM1,IFITM2對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV）、乙型腦炎病毒（Japaneseencephalitisvirus,JEV）等抗病毒作用相關(guān)報(bào)道，但仍未見(jiàn)與豬IFITMs處于同一進(jìn)化分支的牛IFITMs的相關(guān)報(bào)道?？谔阋撸‵ootandmouthdisease,FMD）是當(dāng)前對(duì)豬、
7、牛等家畜養(yǎng)殖業(yè)危害最為嚴(yán)重的傳染病之一。由于該病會(huì)降低動(dòng)物性產(chǎn)品的質(zhì)量以及產(chǎn)量，進(jìn)而影響相關(guān)國(guó)家畜產(chǎn)品在國(guó)際社會(huì)間的流通，造成巨額的經(jīng)濟(jì)損失等原因，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物性疫病?？紤]到豬、牛養(yǎng)殖業(yè)對(duì)于推動(dòng)農(nóng)業(yè)發(fā)展的重要性以及豬肉、牛肉在全世界肉類消費(fèi)品中所占的極大比重，一旦暴發(fā)疫情，影響將極為惡劣。而且在前期研究中，IFITMs的抗病毒譜多集中于囊膜病毒方面，對(duì)于非囊膜病毒僅有限制呼腸孤病毒的報(bào)道。為此，我們擬開(kāi)展豬/牛IFITMs的克隆表達(dá)及其抗非囊膜病毒FMDV感染的作用研究，通
8、過(guò)研究，不僅填補(bǔ)大型家畜IFITMs相關(guān)信息的空缺，而且為進(jìn)一步拓展該類蛋白的抗病毒譜提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。鑒于此目的，我們參照GenBank中sIFITM1、sIFITM2、sIFITM3、bIFITM1、bIFITM2、bIFITM3基因序列設(shè)計(jì)相應(yīng)編碼序列特異性引物，分別從豬外周血單個(gè)核細(xì)胞PBMC、豬腎細(xì)胞PK-15和牛腎細(xì)胞MDBK中成功擴(kuò)增出豬/牛IFITM1,IFITM2,IFITM3編碼序列，與pMD18-T載體連接后進(jìn)行測(cè)序，I通過(guò)多種生物信息學(xué)軟件的應(yīng)用完
