玉米黏蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究及rnai機(jī)制相關(guān)基因的克隆

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1、＾分類(lèi)號(hào)密級(jí)ＵＤＣ編號(hào)藝／ｈ：ｉＩＮＮＥＲＭＯＮＧＯＬＩＡＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ爾士學(xué)位論龕？丨ＭＡＳＴＩＩＲＢＩＳｉｌＲＴＡＴＩＯＭ玉米薪蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究及ＲＮＡｉ＿｜機(jī)制相關(guān)翻的克隆學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院ｆｌ：專(zhuān)業(yè)：生物工程，．：；零ｉ＿ｒ。研究方向：農(nóng)牧業(yè)生物工程？：：姓名：授指導(dǎo)教師ｉｌ婆—尊２０１５５２５，年月日學(xué)校代碼：１０１２６學(xué)號(hào)：３１３０８１０９分類(lèi)號(hào)：編號(hào)：玉米點(diǎn)蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究及ＲＮＡｉ機(jī)制相關(guān)基因的克?。崳姡停簦瑁椋恚睿幔?/p>

2、ｓｅｐａｒａｔａｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇａｎｄｃｌｏｎｉｎｇｏｆＲＮＡｉｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｌａｔｅｄｅｎｅｓｇ學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院專(zhuān)業(yè)：生物工程研究方向：農(nóng)牧業(yè)生物工程姓名：其木格指導(dǎo)教師：哈達(dá)教授２０１５年５月２５日原創(chuàng)性聲明本人聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研宄工作及取得的研宄成果。除本文己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研宄成果，也不包含為獲得內(nèi)蒙古大舉及其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料一。與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己

3、在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：該’指導(dǎo)教師簽名：（＞、２日期：ｙ日期：在學(xué)期間研宄成果使用承諾書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：內(nèi)蒙古大學(xué)有權(quán)將學(xué)位論文的全部?jī)?nèi)容或部分保留并向國(guó)家有關(guān)機(jī)構(gòu)、部門(mén)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，也可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。為保護(hù)學(xué)院和導(dǎo)師的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，作者在學(xué)期間取得的研究成果屬于內(nèi)蒙古大學(xué)。作者今后使用涉及在學(xué)期間主要研究?jī)?nèi)容或研宄成果，須征得內(nèi)蒙古大學(xué)就讀期間導(dǎo)師的同意若用于；發(fā)表論文，版權(quán)單位必須署名

4、為內(nèi)蒙古大學(xué)方可投稿或公開(kāi)發(fā)表。學(xué)位論文作者簽名－指導(dǎo)教師簽名：、毛日期：日期：目錄？＾ＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ一第章文獻(xiàn)綜述１１１玉１．米點(diǎn)蟲(chóng)１……．２ＲＮＡ干擾機(jī)制１１２．Ａｉ１．１ＲＮ的發(fā)現(xiàn)簡(jiǎn)史２１．２ｉ２．ＲＮＡ的作用機(jī)制３１．２．３ＲＮＡｉ在植物抗蟲(chóng)基因工程的應(yīng)用３１．３轉(zhuǎn)錄組學(xué)研宄概述１．４．３１轉(zhuǎn)錄組測(cè)序方法１４．３．２昆蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組研究概況１４５．研宄意義第二章基本材料與方法６２１６．昆蟲(chóng)詞養(yǎng)相關(guān)材料和設(shè)備２１１６．．玉米點(diǎn)蟲(chóng)飼養(yǎng)

5、２．１工氣候箱６．２人２．１３植物培養(yǎng)室６．６２．１．４養(yǎng)蟲(chóng)盒１７２．．５取蟲(chóng)工具２７．２常用試劑的配制２１．２．瓊脂糖凝膠電泳相關(guān)試劑７２２８．２．感受態(tài)細(xì)胞的制備９２．３ＬＢ．２培養(yǎng)基的制備ＯＣ２．４Ｓ９．２培養(yǎng)基的配制２．５１０．２雜交試驗(yàn)相關(guān)試劑配制第三章玉米點(diǎn)蟲(chóng)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及功能注釋?zhuān)墸保保崳姡保墸保保崳姡常D(zhuǎn)錄組測(cè)序及序列拼接錄組序列特征１３．２轉(zhuǎn)１３２．１２．產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)１１３．２組２．２裝結(jié)果分析ｉ３．３Ｕｎｅｎｅ１４．２ｇ功能注釋?zhuān)墸玻梗崳姡常常壜殻常墸?/p>

6、４?。常埃崳姷谒恼掠衩c(diǎn)蟲(chóng)ＲＮＡｉ機(jī)制相關(guān)基因的克隆３１４．１引物設(shè)計(jì)３２４．２基因克?。常常崳姡矗牐玻墸保遥停常矗崳姡牐牽偅牐犔崛∫唬矗墸牐玻玻牐悖模危粒牭阪満铣桑常担崳姡矗墸牐玻牐常牐校牵壹夹g(shù)體外擴(kuò)增ＤＮＡ３６４．２．４ＰＣＲ產(chǎn)物回收３８－組Ｔ４．３９．２５重載體的構(gòu)建４２．Ｔ１感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化３９．６４ＤＮＡ．２．７質(zhì)粒提取４０４．２．８重組質(zhì)粒的ＰＣＲ鑒定４０４．２．９重組質(zhì)粒的酶切鑒定４２４ｉ４．２．１０Ｕｎｉｇｅｎｅｓ序歹ｊ測(cè)定３４３ＲＡＣＥ４４，克隆實(shí)驗(yàn)４．

7、３１４４．引物設(shè)計(jì)４４４．３．２ｍＲＮＡ純化實(shí)驗(yàn)４．４６．３３ＲＡＣＥｃＤＮＡ合成４．４７．３４ＲＡＣＥＰＣＲ檢測(cè)４３ＥＰＣＲ４９．．５ＲＡＣ產(chǎn)物重組質(zhì)粒的鑒定４５０．３．６ＲＡＣＥ產(chǎn)物重組質(zhì)粒的酶切鑒定１４５．３．７序列測(cè)定４５２．３．８結(jié)果分析４５２．４序列組合拼接５２４．４１．引物組合４５５．４．２瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果４５５．４．３組合引物ＰＣＲ擴(kuò)增片段克隆４５７．４．