白藜蘆醇對(duì)野百合堿誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓大鼠治療作用及機(jī)制研究

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1、分類夸１００２１０學(xué)?；?hào)１０５７２ＵＤＣ６１７密級(jí)學(xué)號(hào)２０１２１１０１１３９灌）戶州中虔為乂＃切計(jì)、，ｓｍ訴ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ碩±學(xué)位論文白黎蘆醇對(duì)野百合堿誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈髙壓大鼠治巧作用及妍制研究＊－■－．，學(xué)位申請(qǐng)人楊東脂指導(dǎo)教師姓名王巧武專業(yè)名稱外科學(xué)申請(qǐng)學(xué)位類型科學(xué)學(xué)位論文提交日期２０１５年３月廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所

2、呈交的學(xué)位論文，是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加Ｗ注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中Ｗ明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。擎份論義作者懲余．私■■曰期年５月曰關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部口機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允巧被查閩和借閱。本人授枝廣州中醫(yī)藥大學(xué)可

3、每本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可Ｗ采用影印、縮印或其他復(fù)印手段俱存和匯編本學(xué)位論文。（保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定）論丈作者簽＾＾＾＾＾＾＾文別取簽名円期；廠月＞？｜日摘要肺動(dòng)脈高壓是臨床致死率很高的疾病，其發(fā)病率逐年升高，目前尚無能夠有效改善恵者生存狀態(tài)的治療手段；近年來，中藥單體在防治也肺血管疾病方面取得了顯著成效，白黎蘆醇是其中較為突出的，有望改善肺動(dòng)脈高壓患者生存狀態(tài)。目的：ｔｅ＇１．觀察腹腔注射野百合堿誘導(dǎo)肺動(dòng)脈高皮（ｐｕｌｍｏｎａｒｙａｒｒｉａ

4、ｌｈｙｐｅｉｔｅｎｓｉｏｎ，ＰＡＨ）大鼠模型的穩(wěn)定性，并探討其機(jī)制；２．觀測(cè)白黎蘆醇（ｒｅｓｖｅｒａ化〇１，肥Ｓ）對(duì)ＰＡＨ大鼠血流動(dòng)力學(xué)、肺組織外觀及血管病理發(fā)展的影響，驗(yàn)證Ｒ盼對(duì)ＰＡＨ的治療作用；一３．檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織氧化應(yīng)激水平及誘導(dǎo)型氧化氮合酶和ｃＧＭＰ依賴性蛋白激酶的表達(dá)水平，初步探討ＲＥＳ防治ＰＡＨ的作用機(jī)制。方法：１ＦＳＤ３４．動(dòng)物分組及造模；ＳＰ級(jí)成年雄性大鼠只，賄入后普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)１周后隨機(jī)分成２組：正常對(duì)照組（Ｃｔ）１０只２４只注射野百，模型組；模型組

5、腹腔合堿（ｍｏｎｏｃｒｏｔａｌｉｎｅ，ＭＣＴ），造模成后再隨機(jī)平分為ＭＣＴ模型組（Ｍ）和白黎蘆醇治療組（祀Ｓ）于實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)進(jìn)行生存率分析。；２．測(cè)定血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)及右也室肥厚指數(shù)：各實(shí)驗(yàn)組大鼠于第８周處理，記錄體重，經(jīng)胸經(jīng)右室測(cè)平均肺動(dòng)脈壓（ｍｅａｎｐｕｌｍｏｎａｒｙａｒｔｅｉｙｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｍＰＡ巧，取出也臟，分離右也室，稱濕重并計(jì)算右也室肥厚指數(shù)。３．組織病理檢測(cè)：大鼠左肺下葉做石蠟切片，行免疫組化檢測(cè)、肥及Ｍａｓｓｏｎ染色，Ｗ觀察肺組織病理改變Ｉｍａｅ化０Ｐｌｕｓ；采用ｇ軟件測(cè)

6、量分析小微動(dòng)脈的管腔和平均直徑，透射電鏡下觀察肺動(dòng)脈，計(jì)算肺動(dòng)脈肥厚指數(shù)。右肺口組織做電鏡切片管壁組織超微結(jié)構(gòu)。４．氧化應(yīng)激檢測(cè)：利用試劑盒檢測(cè)大鼠肺組織抗氧化應(yīng)激指標(biāo)超氧化物歧化酶（ＳｅｒｏｘｉｄｅＤｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）、谷脫甘膚（ｌｕ１：ａｔｈｉｏｎｅｅｒｏｘｉｄａｓｅ，Ｇ細(xì)、過氧叩ｇｐ）化氨酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）二醒（ＭａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅＭＤＡ）的活性。和氧化應(yīng)激因子丙，？５一ｉｔ．誘導(dǎo)型氧化氮合酶（ｉｎ加Ｃ化ｌｅｎｒｉｃｏｘｉｄｅｎｔｈａｓｅ）ｃＧＭ

7、Ｐ巧，ｉＮＯＳ和’’ｕａｎｏ－－依賴性蛋白激酶（ｇｓｉｎｅ３，５ｃｙｃｌｉｃｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ１，ＰＫＧ－１）檢測(cè)；取右肺中葉放入凍存管，后期將組織制成勻漿并提取蛋白，采用ｗｅｓｔｅｒｎｂｉＮ－１－ｌｏｔ檢測(cè)ＯＳ和ＰＫＧ的表達(dá)水平免疫組化檢測(cè)ｉＮＯＳＰＫＧ１的表達(dá)；和及位點(diǎn)。６１７＋．統(tǒng)計(jì)分析：所有數(shù)據(jù)采用ＳＰＳＳ．０軟件進(jìn)行分析，定量數(shù)據(jù)均Ｗ（均值，組間比較采用單因素方差分析０５標(biāo)準(zhǔn)誤）表示，Ｐ＜０．為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：

8、－．４；１．采用腹腔注射ＭＣＴ后４周成功復(fù)制出大鼠ＰＡＨ模型，造模期大鼠堯亡率為１２．５％（４／２４），實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)Ｈ組死亡率分別為；Ｃｔ：０％，Ｍ；４０％（４／１０），祀Ｓ；１０％（１／１０）；２．Ｃｔ、Ｍ、贓Ｓ平均肺動(dòng)脈巧為分別為巧．７８±０．６４ｖｓ２０．８８±１．５３ｖｓｌｌ．２２±０．＜．