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《家蠶對蘇云金芽孢桿菌毒素cry1ac的抗性遺傳分析及基因的定位克隆》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、學校代碼：10289分類號：S881.2;S482.3+9密級：公開學號：122300012江蘇科技大學碩士學位論文家蠶對蘇云金芽孢桿菌毒素Cry1Ac的抗性遺傳分析及基因的定位克隆研究生姓名易曉莉導師姓名李木旺申請學位類別理學碩士學位授予單位江蘇科技大學學科專業(yè)生物化學與分子生物學論文提交日期2015年4月27日研究方向家蠶分子遺傳學論文答辯日期2015年6月3日答辯委員會主席趙巧玲評閱人匿名評閱2015年6月4日分類號：S881.2;S482.3+9密級：公開學號：122300012理學碩士學位論文家蠶對蘇云金芽孢桿菌毒素Cry1Ac的抗性
2、遺傳分析及基因的定位克隆學生姓名易曉莉指導教師李木旺研究員江蘇科技大學二O一五年六月AThesisSubmittedinFulfillmentoftheRequirementsFortheDegreeofMasterofScienceGeneticAnalysisonResistanceofBombyxmoriAgainstBacillusthuringiensisToxinCry1AcandPositionalCloningofResistanceGeneSubmittedbyYiXiaoliSupervisedbyLiMu-wangJian
3、gsuUniversityofScienceandTechnologyJune,2015江蘇科技大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名：年月日江蘇科技大學學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文
4、的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權江蘇科技大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于：(1)保密□，在年解密后適用本授權書。(2)不保密□。學位論文作者簽名：指導教師簽名：年月日年月日摘要摘要Bt毒素是由蘇云金芽胞桿菌(Bacillusthuringiensis,Bt)產生的一種伴孢晶體，對鞘翅目、鱗翅目、雙翅目昆蟲的幼蟲具有特異的殺滅活性，而對人及其他動物無害。Bt不僅可以作為噴射的微生物殺蟲剎，還可以通過轉基因技術導入到植物中高效特異地殺滅
5、害蟲，現(xiàn)已廣泛應用于農林業(yè)害蟲的防治。但隨著Bt植物的大面積種植，對目標昆蟲造成了極高的選擇壓力，使昆蟲的抗藥性不斷增強，嚴重影響了該新型生物殺蟲剎的使用效率。對昆蟲抗性機制的研究是設計抗藥性治理策略的基礎，也是Bt植物持續(xù)應用于農林業(yè)生產中的根本保障。鱗翅目昆蟲分布范圍極廣，且多數種類的幼蟲為害各類栽培植物，是農林害蟲最多的一個目。家蠶（Bombyxmori）是鱗翅目中的模式昆蟲，具有極高的經濟價值和豐富的種質資源，在生物學研究中發(fā)揮著重要作用。本研究以家蠶作為鱗翅目昆蟲模型，研究其對微生物殺蟲劑蘇云金芽胞桿菌（Bt）毒素Cry1Ac的抗性水
6、平及遺傳特性及抗性相關基因，從分子生物學的角度解釋了家蠶對Bt毒素Cry1Ac產生抗性的機理，為鱗翅目害蟲對Bt毒素的抗藥性治理提供參考。其主要實驗研究內容及結果如下：1.品種間的抵抗力差異將Cry1Ac毒素蛋白分別給供試的100個家蠶品種的2齡起蠶添食，調查幼蟲死亡率并計算LC50值。調查結果顯示家蠶不同品種對Cry1Ac毒素的抵抗力差異很大，呈現(xiàn)多態(tài)性。2.家蠶對Bt毒素Cry1Ac的抗性遺傳分析選取抗性親本ACR1、敏感性親本Nistari進行單蛾區(qū)雜交，構建正、反交F1代、F2代，及BC1代群體，對各群體抗性調查統(tǒng)計結果顯示，家蠶對Cr
7、y1Ac毒素的抗性屬于單基因控制的隱性遺傳。3.家蠶對Bt毒素Cry1Ac抗性基因的連鎖定位分析以兩個親本及F1的基因組DNA為模板，在28個家蠶連鎖群上篩選多態(tài)標記。將篩選出的多態(tài)標記在親本及后代群體中進行基因型分析，結果顯示在第15連鎖群上篩選到的多態(tài)標記，在BC1F中的帶型與表型一致，說明抗性基因與15號連鎖群連鎖。用BC1M個體的300個個體確定與家蠶對Bt毒素Cry1Ac抗性基因連鎖的多態(tài)性標記順序和遺傳距離，繪制出家蠶抗Cry1Ac基因的分子連鎖圖，其遺傳距離為2.0cM。4.家蠶對Bt毒素Cry1Ac抗性基因的初步預測及克隆測序根
8、據分子遺傳連鎖圖的定位區(qū)域預測目的基因為BGIBMGA007792-93，根據I江蘇科技大學理學碩士學位論文家蠶轉運蛋白基因BGIBMGA007792
