盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究

盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究

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盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究_第1頁(yè)
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《盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)控上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)

1、隹"、分類號(hào)735.2:;R密級(jí)公開(kāi),鴻Wf;嚷研究生學(xué)位論文胃?。崳姡??一-Ala盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體1調(diào)?上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃;?論文題,出^、目(中文):癌侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研巧-馬StudontheMolecularMechanismofInvasionandy思?方.來(lái)論文題目(外文)MetashsisofGastricCancerAffectedbDDR1viay-maReulatin化eEi化elialMesenchlTransition巧ggpy'W研究生姓名謝瑞霞學(xué)

2、科.、專業(yè)內(nèi)科學(xué)消化系病學(xué)研巧方向消化道腫瘤學(xué)位級(jí)別碩±導(dǎo)師姓名、職稱張德奎副教授論文工作起止年月2013年1月至2015年1月論文提交日期2015年5月論文答辯日期2015年5月學(xué)位授予日期2015年6月'游校址:甘肅省蘭州市原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:本人所呈交的學(xué)位論文,是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。學(xué)位論文中凡引用他人已經(jīng)發(fā)表或未發(fā)表的成果、數(shù)據(jù)、觀點(diǎn)等,均己明確注明出處。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研究成果做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集

3、體,巧己在文中W明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。4'&?辦S.論文作者簽名;今扳日親;>f關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品,知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬蘭州。、大學(xué)本人完全了解蘭州大學(xué)有關(guān)保存使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保存或向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)蘭州大學(xué)可將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)。庫(kù)進(jìn)行檢索,可W采用任何復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文本人離校后發(fā)表一、使用學(xué)位論文或與該論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí),第署名單位仍然為蘭州大學(xué)。

4、本學(xué)位論文研究?jī)?nèi)容:□可W公開(kāi)□不宜公開(kāi),已在學(xué)位辦公室辦理保密申請(qǐng),解密后適用本授權(quán)書(shū)。""一(請(qǐng)?jiān)冢咨线x項(xiàng)內(nèi)選擇其中項(xiàng)打V)論文作者簽名;奇畔導(dǎo)師簽名:義王《I■/日期日期::I蘭州大學(xué)研究生學(xué)位論文盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體-間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響1調(diào)按上皮胃癌侵襲轉(zhuǎn)搜分子機(jī)制的研巧盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體-1調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃巧侵襲轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的研究中文摘要-目的觀察DDR1是否通過(guò)調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移,并探討其可能的分子機(jī)制。方法(1)運(yùn)用免疫組化法篩選DDR1高表達(dá)及低表達(dá)胃癌細(xì)胞株。但)構(gòu)建DDR1靴向siR

5、NA,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染siRNA于DDR1高表達(dá)胃癌細(xì)胞,RT-PC民及WesternBlot法檢測(cè)DDR1在轉(zhuǎn)染前后的表法情況。應(yīng)用MTT法、Transwell法及流式細(xì)胞法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后胃癌細(xì)胞的増殖、遷移侵襲能力、細(xì)胞周-期及調(diào)亡的變化。WesternBlot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后EMT相關(guān)蛋白Ecadherin及Vimentin的表達(dá)變化,并檢測(cè)EMT相關(guān)信號(hào)蛋白Snail的表達(dá)。(3)構(gòu)建DDR1重組慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染DDR1低表達(dá)胃癌細(xì)胞W過(guò)表達(dá)胃癌細(xì)-PCResnMTT胞DDR1,RT及WterBlot法檢測(cè)DDR1在轉(zhuǎn)染前后的表達(dá)情況。應(yīng)用法、平板克隆

6、形成實(shí)驗(yàn)、Transwel酷W及流式細(xì)胞法分別檢測(cè)過(guò)表達(dá)DDR1對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和細(xì)胞周期及稠亡的影響。WesternBlot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前-cadherin及Ventn的表達(dá)后EMT相關(guān)蛋白Eimi變化,并檢測(cè)EMT相關(guān)信號(hào)蛋白Snail的表達(dá)。(4-拾)裸鼠背部皮下注射攜帶GFP的DDR1重組慢病毒穩(wěn)轉(zhuǎn)的BGC3細(xì)胞構(gòu)6建裸鼠移植瘤模型,2X10細(xì)胞裸鼠皮下接種,分別于7d、21d、35t49d行小動(dòng)物活體成像W測(cè)定移植瘤大小,觀察DDRl過(guò)表達(dá)對(duì)裸鼠體內(nèi)胃癌移植瘤生長(zhǎng)的影響,49d處死裸鼠,取瘤體觀察其組織細(xì)胞形態(tài)和血管生成相關(guān)蛋白C

7、D34的表法情況。結(jié)果MKN-45---(1)對(duì)胃癌細(xì)胞、BGC823、SGC7901及正常胃粘膜細(xì)胞GES1免疫組織化學(xué)分析結(jié)果顯示:胃癌細(xì)胞DDR1表達(dá)均為陽(yáng)性,而正常胃粘膜細(xì)---胞GES1表達(dá)呈陰化DDR1在胃癌細(xì)胞MKN45中表達(dá)最強(qiáng)而在BGC823中表達(dá)最弱。--tl-sMKN(2)RTPCR及WesernBlot結(jié)果顯示DDRiRNA轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞45<后,DDR1在該細(xì)胞的表達(dá)明顯下降(p0.05),而DD民1重組慢病

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