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《牙齦卟啉單胞菌脂多糖對(duì)破骨細(xì)胞epha2表達(dá)的調(diào)控》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中文摘要牙齦卟啉單胞菌脂多糖對(duì)破骨細(xì)胞EphA2表達(dá)的調(diào)控背景牙周炎是以牙周結(jié)締組織破壞和牙槽骨吸收為特點(diǎn)的慢性炎癥性疾病，牙菌斑生物膜中的牙齦卟啉單胞菌（Porphyromonasgingivalis，Pg）是牙周病變區(qū)主要的優(yōu)勢(shì)菌之一，該菌能夠產(chǎn)生大量的毒力因子，如內(nèi)毒素、胰酶樣蛋白酶等，這些毒力因子是引起牙周結(jié)締組織的破壞和牙槽骨的吸收的重要因素，其中內(nèi)毒素也稱脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁成分,是引發(fā)牙槽骨吸收的關(guān)鍵因子，它的作用是雙方面的，一方面它可以通過促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化促進(jìn)骨吸收，同時(shí)還可以抑制成骨細(xì)胞的分化而抑制骨形成。骨重建（bo
2、neremodeling）是一種有序、耦聯(lián)（coupling）的骨吸收和骨形成過程，兩者間處于動(dòng)態(tài)平衡以維持骨組織內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)（homeostasis），且伴隨終生。近來研究表明，ephrin/Eph雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與調(diào)節(jié)骨代謝平衡，對(duì)維持骨穩(wěn)態(tài)起重要作用，而其中的ephrinA2/EphA2信號(hào)在骨重建的骨吸收階段發(fā)揮顯著作用，而EphA2信號(hào)分子是否參與Pg-LPS介導(dǎo)的炎癥性骨吸收，目前國內(nèi)外尚未見研究報(bào)道?；谝陨媳尘把芯浚覀兲岢隽思僭O(shè)，Pg-LPS是否通過EphA2/ephrinA2雙向信號(hào)通路參與牙槽骨吸收呢？因此本實(shí)驗(yàn)通過用Pg-LPS與小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7共培養(yǎng)
3、，觀察EphA2表達(dá)的變化，以探討EphA2信號(hào)分子在Pg-LPS介導(dǎo)的炎癥性吸收過程中的作用。方法：使用濃度為10?g/ml的Pg-LPS與RAW264.7細(xì)胞共培養(yǎng)，分別在1、3、5d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)，采用RT-PCR和Westonblotting技術(shù)分別檢測(cè)EphA2基因和破骨相關(guān)基因的表達(dá)及EphA2蛋白質(zhì)的表達(dá)，并通過TRAP染色檢測(cè)破骨細(xì)胞的分化成熟情況。結(jié)果：1.RT-PCR結(jié)果顯示：在Pg-LPS與RAW264.7細(xì)胞共培養(yǎng)0.5h、1h、2h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)組EphA2基因的表達(dá)比對(duì)照組明顯增高。2.RT-PCR結(jié)果顯示：在Pg-LPS與RAW264.7細(xì)胞共培養(yǎng)后，EphA2基因
4、的表達(dá)在3d和5d時(shí)，實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組均有明顯增加（P<0.01），其中3d組較5d組，EphA2基因的表達(dá)更為明顯。但在1d時(shí)兩組間EphA2基因表達(dá)無顯著性差異。伴隨著EphA2基因上調(diào)的同時(shí)，同時(shí)破骨相關(guān)基因c-fos、NFATc1、CtsK、ACP5、MMP9的表達(dá)都明顯升高（P<0.05），但是CtsK在1d時(shí)和c-fos在5d時(shí)的表達(dá)無明顯差異。3.Westonblotting結(jié)果顯示：在Pg-LPS與RAW264.7細(xì)胞共培養(yǎng)后，在1d時(shí)實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組EphA2的表達(dá)明顯增加，但是在3、5d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)EphA2的表達(dá)無明顯差異。4.TRAP染色結(jié)果顯示：在Pg-LPS與RAW264
5、.7細(xì)胞共培養(yǎng)5d后,實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組的TRAP陽性多核細(xì)胞（細(xì)胞核≥3）數(shù)目明顯增多。結(jié)論：1.在無破骨誘導(dǎo)的條件下，Pg-LPS能夠促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞表達(dá)EphA2基因。2.在破骨誘導(dǎo)條件下，Pg-LPS在中期和晚期能夠促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化，但是在早期促進(jìn)作用不明顯。3.Pg-LPS可能通過EphA2/ephrinA2信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的過程。關(guān)鍵詞：Pg-LPS，破骨細(xì)胞，EphA2AbstractEffectofPorphyromonasgingivalisLipopolysaccharideontheExpressionofEph
6、A2inRAW264．7CellBackground:Chronicperiodontitisisachronicinflammatorydisease,whichischaracterizedbythedestructionofperiodontalconnectivetissueandalveolarboneloss.Pgindentalplaquebiofilmisoneofthemajorperiodontalpathogenicbacteria.Pgproduceslargeamountsofvirulencefactors,suchasbacterialendotoxin,tryp
7、sin-likeprotease.Theendotoxin,alsocalledlipopolysaccharide(LPS),isacellwallcomponentinGram-negativebacteria,isakeyfactorcausedbytheresorptionofalveolarbone.Itcancauseboneresorptionbypromotingthediffer
