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《Bt、CPTI雙價(jià)殺蟲基因?qū)λ具z傳轉(zhuǎn)化的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文Bt、CPTI雙價(jià)殺蟲基因?qū)λ具z傳轉(zhuǎn)化的研究姓名:王珣申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:徐仲2003.5.1摘要/水稻是世界上最主要的糧食作物之一,全球有一半的人口以水稻為主食.據(jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)水稻播種面積約占全球糧食播種面積的28.9%,總產(chǎn)量居所有糧食作物的首位。是我國(guó)人民的主要糧食之一。然而水稻生產(chǎn)卻受到鱗翅目害蟲的嚴(yán)重威脅,每年因蟲害水稻減產(chǎn)在10%以上。本實(shí)驗(yàn)所應(yīng)用的抗蟲基因?yàn)殡p價(jià)抗蟲基因,含有雙價(jià)抗蟲基因的轉(zhuǎn)基因植株可以延緩害蟲對(duì)轉(zhuǎn)基因植株產(chǎn)生抗毒性,延長(zhǎng)轉(zhuǎn)基因作物的
2、使用壽命,充分發(fā)揮轉(zhuǎn)基因作物的作用。,^戶—一本實(shí)驗(yàn)所采用的抗蟲基因?yàn)殡p價(jià)抗蟲基因,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、單細(xì)胞電擊法對(duì)水稻推廣品種東農(nóng)419、東農(nóng)420、東升16進(jìn)行Bt基因遺傳轉(zhuǎn)化,探討了共培養(yǎng)方式對(duì)抗性愈傷發(fā)生率的影響;抗氧化劑抑制轉(zhuǎn)化愈傷組織褐化并恢復(fù)其生長(zhǎng)狀態(tài)的影響;不同酶及滲透壓對(duì)單細(xì)胞解離的影響因素;確立了用于單細(xì)胞電擊轉(zhuǎn)化的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)基及激素濃度:并獲得轉(zhuǎn)基因植株,通過(guò)GUS及PcR檢測(cè),初步證實(shí)目的基因已整合到水稻基因組中。關(guān)鍵詞:農(nóng)桿菌介導(dǎo)法;基因槍法;單細(xì)胞電擊法;遺傳轉(zhuǎn)化;東
3、北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文StudiesongenetiC缸’ansf.omationofBtinsect.resistantgenetoriceAbstractRiceisthemainfoodstuffintheworldandregardedasstaplefoodbyalmosthalfofpopulation.AccordingtoStar.:Theplantinganaofriceinourcou[nryoccupy28.9%ofitintheworld.Theoveralloutputoccu
4、pyprimacyinallfoodstuff.Buttheproductionofriceisaffectedbylepidopteralinsect.Thereductionofoutputexceed10%becauseofinsectpest.Thedoubleinsect-resistantgeneCanstavethemithridatismofinsectandextendusedtimeoftransformedriceinthisexperiment.Sothetransformedric
5、ecallexertactionplenty.Inthisexperimentthedoubleinsect-resistantgeneWaStransformedintoDongnong419,Dongnong420andDongsheng6thosealethepopularizedbreedswiththemethodsofco-cultivationwithA.tumefaciens、microprojectilebombardmentandelectroporation.Theeffectsofd
6、ifferentkindsofco-cultivationonPere.ofresistantcalli,theeffectofdifferentantioxidantsonrestoringgrowthstateandbrowninginhibitionoftransformedricecaili,TheeffectsofEnzymeandFilterpressureonseparationofsingercellandtheeffectofdifferentmediumonthegrowthofrice
7、suspendedcellwerestudied.ThemediumthatWaSusedinsingercell—electroporationWaSestablished.TheobtainedtransformedriceWaSprovedthatobjectivegenehaSbeentransformedinitbytheGUSandPCRexamine.Candidate:WangxunMajor:BotanySupervisor:AssociateProf.XuZhongKEYWORDS:Co
8、-cultivationwithA.tumefaciens;microprojectilebombardment;electropomtion;genetictransformation-ll-前言1.前言1.1目的與意義本實(shí)驗(yàn)具有重要的應(yīng)用價(jià)值,實(shí)驗(yàn)所獲得的轉(zhuǎn)Bt基因水稻應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中可得到巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)價(jià)值:水稻是世界上最主要的糧食作物之一,全球有一半的人口以水稻為主食。據(jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)水稻播種面積約占全