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1、秋茄多糖的提取及其組成的研究【摘要】目的該文對紅樹植物秋茄中多糖的提取及其組成進行了研究。方法秋茄葉經(jīng)熱水浸提、Sevage法脫蛋白等方法得到多糖;經(jīng)完全酸水解，糖腈乙酸酯衍生化，并用紅外光譜儀、氣質(zhì)聯(lián)用儀對其結(jié)構(gòu)和組成進行了研究。結(jié)果秋茄多糖由D-阿拉伯糖和葡萄糖組成，它們的摩爾比為1∶2。結(jié)論秋茄多糖為雜多糖?！娟P(guān)鍵詞】秋茄;多糖;提取;組分 近年來,國際上對藥用紅樹植物的化學(xué)成分及其藥理研究表明，紅樹植物具有抗艾滋病、抗腫瘤、抗氧化等活性[1]。秋茄為紅樹科秋茄屬植物，本屬只有一種，即為秋茄。秋茄因其特殊的生長環(huán)境，在其化學(xué)成分和生理活性方
2、面都具有很多特殊性。至今為止的秋茄研究資料表明，對秋茄化學(xué)成分和生理活性的研究在世界范圍內(nèi)較為分散，缺乏較深入或系統(tǒng)地研究。雖然人們現(xiàn)已從秋茄中分離出多個鞣質(zhì)類化合物，但是關(guān)于其生物活性方面的研究并沒有多少報道。本實驗對紅樹植物秋茄中的多糖進行提取并對其組成進行了研究?！ ?材料與儀器 1.1原料秋茄葉(采自湛江東海島)，洗凈剪碎，置于通風(fēng)處陰干，備用。5 1.2試劑95%乙醇;無水乙醇;氯仿;正丁醇;丙酮;無水乙醚;硫酸;碳酸鋇;吡啶;鹽酸羥胺;乙酸酐，以上試劑均為分析純。 1.3儀器E-5299旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司);
3、SHB-B95A型循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司);GCMS-QP2010氣相色譜質(zhì)譜連用儀(島津制作所);HH-S2系列恒溫水浴鍋(江蘇省全壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠);FTIR-8400S型紅外光譜儀(日本島津公司);ESJ120-4型電子天平(沈陽市龍騰電子有限公司);202-2型干燥箱(上海市實驗儀器總廠);GSP-84-02型磁力恒溫攪拌器(山東電訊七廠)。 2方法 2.1多糖提取稱取粉碎、干燥好的秋茄葉150g，加入1500ml蒸餾水，超聲處理20min后加熱到90℃，熱水浸提3次，過濾，合并，得棕色濾液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮濾液
4、至50ml，抽濾，濾液中加入3倍其體積的95%乙醇沉淀多糖，于冰箱放置過夜，得棕色絮狀物，離心收集沉淀?！ ?.2Sevag法去蛋白[2]Sevag試劑的配制：用氯仿與正丁醇以4∶51混合。上述沉淀加水溶解，即得棕色溶液，加入溶液1/3倍體積的Sevag試劑，劇烈振蕩至無白色絮狀物析出，然后離心，除去水相與有機相交界處的變性蛋白，剩余液體再加入200ml無水乙醇，充分振蕩搖勻，于冰箱靜置24h，得棕色絮狀物。離心收集沉淀，沉淀經(jīng)無水乙醇、丙酮、無水乙醚洗滌兩次脫去脂肪和色素，干燥，得棕色粗多糖1.1g?！ ?.3紅外光譜法(IR)鑒定多糖采用KB
5、r壓片制樣，在4000～400cm-1區(qū)間內(nèi)用紅外光譜儀掃描IR吸收。 2.4多糖水解[3]稱取30mg粗多糖，加入5ml30mmol/L的硫酸溶液，封管，超聲片刻，至多糖完全溶解，100℃恒溫水浴振蕩2h。將試管置于烘箱中于110℃反應(yīng)6h后冷卻至室溫，加BaCO3粉末中和、離心、干燥得到水解后的淡黃色單糖混合物0.0103g?！ ?.5糖腈乙酸酯衍生物的制備稱取10mg單糖樣品和10mg鹽酸羥胺，用20ml吡啶溶解，封管，95℃恒溫水浴振蕩40min后冷卻至室溫，加入0.6ml乙酸酐，封管，95℃恒溫水浴振蕩40min，冷卻至室溫，得淡黃色
6、單糖腈乙酸酯衍生物，待測?！ ?.6單糖衍生物的GC/MS分析色譜條件：RTX-5石英毛細管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，柱溫：80℃，氣化室溫度：280℃，載氣為高純度氦氣，進樣量1μl，升溫程序：起始溫度80℃，保留時間2min，每分鐘5℃升溫到260℃，保留15min。質(zhì)譜條件：離子源為EI源，燈絲電流0.6mA，離子源溫度200℃，電離能量70eV，接口溫度250℃，電子倍增管電壓1.20kV，掃描周期0.5s，掃描范圍30.00～400.00m/z，溶劑延遲3min?！ ?結(jié)果與討論 3.1多糖紅外光譜分析結(jié)果秋茄多糖的紅
7、外光譜如圖1所示，從圖譜中可以看出秋茄多糖具有以下結(jié)構(gòu)特征：在3600～3200cm-1的一個強峰是O-H的伸縮振動。1665～1625cm-1間吸收峰是糖的水化物的吸收峰。1200～1000cm-1間比較大的吸收峰是由兩種C-O伸縮振動所引起的，其中一種是屬于C-O-H的，另一種是糖環(huán)的C-O-C。在3000～2800cm-1的一組吸收峰是糖類C-H的伸縮振動引起的，1400～1200cm-1的不太尖的吸收峰是C-H的變角振動，這兩組吸收峰是糖類的特征吸收峰。該樣品具有典型的多糖特征峰。圖1秋茄多糖的紅外光譜圖 3.2單糖衍生物GC-MS分析
8、結(jié)果將糖腈乙酸酯衍生物進行GC-MS分析，經(jīng)計算機內(nèi)NIST02質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索得到分析結(jié)果見表1。表1單糖衍生物GC/MS分析結(jié)果 4
