資源描述：
《通絡(luò)益腎湯對(duì)DN模型大鼠腎組織αSMA表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、通絡(luò)益腎湯對(duì)DN模型大鼠腎組織α-SMA表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究作者：董正華,楊薪博,應(yīng)小平，宋春光，范麗，李小會(huì)【摘要】 目的觀察通絡(luò)益腎湯對(duì)糖尿病腎?。―N）大鼠腎小管上皮及間質(zhì)平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）表達(dá)的影響，探討本方對(duì)DN模型大鼠腎保護(hù)作用的可能機(jī)制。方法采用單側(cè)腎切除+STZ誘導(dǎo)DN大鼠模型，大鼠隨機(jī)分為正常組、病理組、通絡(luò)益腎湯治療組、西藥治療組。觀察各組大鼠治療后腎功能（BUN、Scr）、24h尿蛋白定量（24hUpr）、尿β2微球蛋白（β2-MG）含量、腎臟肥大指數(shù)及腎組織α-SM
2、A的表達(dá)等指標(biāo)的變化。結(jié)果與病理組比較，通絡(luò)益腎湯治療組大鼠腎臟肥大指數(shù)、BUN、Scr顯著改善（P<0.01），24hUpr、尿β2-MG明顯下降（P<0.01），腎小管上皮及間質(zhì)α-SMA陽(yáng)性表達(dá)率明顯下降（P<0.01），與西藥組比較，各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著性差異（P﹥0.05）。結(jié)論通絡(luò)益腎湯可能通過(guò)降低腎小管上皮α-SMA的表達(dá)，抑制腎小管上皮-間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，延緩腎小管間質(zhì)纖維化，從而達(dá)到保護(hù)腎臟，改善腎功能的目的?！娟P(guān)鍵詞】通絡(luò)益腎湯 糖尿病腎病 α-平滑肌肌動(dòng)蛋白8 糖尿
3、病腎?。―N）是糖尿病（DM）發(fā)展到一定階段而出現(xiàn)的主要并發(fā)癥之一。DN持續(xù)、進(jìn)行性發(fā)展，將導(dǎo)致終末期腎臟病(ESRD)。腎間質(zhì)纖維化是導(dǎo)致ESRD的主要原因和共同病理過(guò)程，腎小管上皮-間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化（EMT）則是腎間質(zhì)纖維化的重要發(fā)病機(jī)制之一［1］，腎小管間質(zhì)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）又是EMT的標(biāo)志因子［2］。此前我們針對(duì)DN腎虧陰陽(yáng)兩虛、血絡(luò)瘀阻的病機(jī)，使用通絡(luò)益腎湯治療DN，臨床取得較好療效［3］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察通絡(luò)益腎湯對(duì)DN模型大鼠腎小管上皮-間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中α-SMA表達(dá)的影響，
4、探討其對(duì)DN腎間質(zhì)纖維化的影響，揭示其腎保護(hù)作用的可能機(jī)制。 1材料 1.1動(dòng)物SD雄性大鼠，60只，體質(zhì)量(180±20)g，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(軍)2007-007（08034）?！ ?.2用藥及試劑通絡(luò)益腎湯由桃仁、水蛭、生地、酒大黃、山萸肉、山藥、黃芪等組成，大鼠用量按文獻(xiàn)折算［4］。藥物經(jīng)常規(guī)煎煮、過(guò)濾，水浴蒸發(fā)至每毫升含生藥2.23g，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆?。洛汀新：北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)X1036；糖適平：北京萬(wàn)輝雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，
5、批號(hào)070822。鏈脲佐菌素（STZ）：購(gòu)自sigma公司，批號(hào)S8050。α-SMA試劑盒，購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。8 2方法 2.1模型復(fù)制及分組給藥大鼠購(gòu)回后適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，稱(chēng)體重，經(jīng)尿糖、尿蛋白定性檢測(cè)為陰性后，隨機(jī)抽取9只作為正常對(duì)照組（A組）。所有大鼠以10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉、備皮、常規(guī)消毒，在背部左腎區(qū)做1～1.5cm切口，A組僅暴露出左腎，用玻棒撥動(dòng)后，縫合切口。模型組大鼠暴露左腎，剝離腎臟脂肪及腎上腺，結(jié)扎左腎門(mén)血管，切除左腎，縫合切口。碘伏消毒，紅
6、霉素軟膏涂抹創(chuàng)口。術(shù)后1周，模型組按50mg/kg體重腹腔內(nèi)注射2%STZ溶液，A組腹腔注射等量的枸櫞酸鈉緩沖液。72h后經(jīng)尾靜脈取血，測(cè)空腹血糖高于16.7mmol/L為DM模型成功。1周后，隨機(jī)抽取兩只測(cè)尿微量白蛋白﹥15μg/ml，確定DN模型形成［5,6］。將造模成功后的43只大鼠隨機(jī)分為病理組15只（B組），通絡(luò)益腎湯治療組14只（C組），西藥治療組14只（D組）。A、B組分別給蒸餾水2ml灌胃，C組給通絡(luò)益腎湯煎液灌胃（22.3g/kg）,D組給洛汀新（1.5mg/kg）＋糖適平（10m
7、g/kg）蒸餾水混懸液灌胃。以上給藥均1次/d，共持續(xù)10周。 2.2觀測(cè)指標(biāo)及方法24hUpr、尿β2-MG測(cè)定：治療結(jié)束后于處死前1d，代謝籠收集尿液，檢測(cè)24hUpr、尿β2-MG含量；治療結(jié)束后，腹腔麻醉下心臟采血，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)BUN，Scr；大鼠處死后取腎臟稱(chēng)重，計(jì)算腎臟肥大指數(shù)（腎重KW/體重BW）；摘取右腎，腎組織常規(guī)石蠟包埋，切片，按α8-SMA試劑盒操作說(shuō)明，免疫組化法測(cè)定α-SMA表達(dá)?！ ?.3資料統(tǒng)計(jì)與分析各組數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理運(yùn)
8、用SPSS13.0進(jìn)行分析?！ ?結(jié)果 3.1治療后各組大鼠腎功能、腎臟肥大指數(shù)的比較結(jié)果見(jiàn)表1。表1各組模型大鼠腎功能、腎臟肥大指數(shù)的比較（略）B組大鼠BUN、Scr、腎臟肥大指數(shù)較A組明顯增高，均有極顯著性差異（P<0.01）；與B組比較，C組、D組大鼠BUN、Scr、腎臟肥大指數(shù)明顯降低，具有極顯著性差異（P<0.01）。C、D兩組比較，上述指標(biāo)無(wú)明顯差異（P＞0.05）。說(shuō)明通絡(luò)益腎湯和西藥治療在改善DN大鼠腎臟肥大指數(shù)、腎功能方面有都有比較理想
