骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)博萊霉素致小鼠肺纖維化形成期干預(yù)的研究

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3、養(yǎng)法分離、培養(yǎng)雄性6.8周齡ICR小鼠BMSCs。本實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)4個(gè)分組,共160只實(shí)驗(yàn)小鼠,將這些小鼠隨機(jī)分為:陰性對(duì)照組(NC組),陽(yáng)性對(duì)照組(PC組),BMSCs干預(yù)組A(A組),BMSCs干預(yù)組B(B組)。NC組于經(jīng)鼻腔滴入50ulPBS作為陰性對(duì)照,PC組、A組、B組則按6ug/g的劑量經(jīng)鼻腔滴入50ul博萊霉素制成小鼠的肺纖維化模型,A組在造模后第14天經(jīng)尾靜脈注射外源性的BMSCslxl07/ml,200ul;B組在造模后第14天起隔日經(jīng)尾靜脈注射外源性的BMSCsl×107/ml,200ul。以上各組小鼠造模后28天統(tǒng)一稱重后處死,取小鼠全肺組織稱

4、重并留取部分肺組織行HE、MASSON染色及羥脯氨酸含量測(cè)定,用熒光定量PCR及免疫組化檢測(cè)肺組織中SP.C和AQP5表達(dá)情況;提取肺組織的DNA檢測(cè)雄鼠的性別決定基因(Sry基因1。結(jié)果:1、肺系數(shù):PC組及A、B組肺系數(shù)均較NC組高,PC組、A組、B組3組間無(wú)明顯差異。2、肺組織病理:PC組及A組、B組肺泡炎、肺纖維化程度均較NC組明顯加重;A組肺泡炎及纖維化較PC、B組稍減輕,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、HYP含量:PC組及A組、B組3組HYP含量均較NC組明顯升高,A組較PC組、B組有所減低,與B組間的差異較為明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,PC組、B組間無(wú)明顯差異。4

5、、Sry基因檢測(cè):A組、B組均有雄性小鼠的sry基因存在。5、肺組織SP.C蛋白的表達(dá):PC組、A組、B組中SP.C蛋白的表達(dá)均低于NC組,A組的表達(dá)高于PC組、B組,而PC組與B組間無(wú)明顯差異。6、肺組織AQP。5蛋白的表達(dá):PC組、A組、B組的SP.CmRNA表達(dá)均低于NC組,PC組、A組、B組3組間無(wú)明顯差異。7、肺組織SP.CmRNA表達(dá)情況:PC組、A組、B組3組中SP.CmRNA表達(dá)均低于NC組,A組的表達(dá)高于PC組、B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而PC組與B組問(wèn)無(wú)明顯差異。8、肺組織AQP5mRNA表達(dá)情況:PC組、A組、B組的AQP5mRNA表達(dá)均低于

6、NC組,3組間無(wú)明顯差異。摘要結(jié)論:1、外源性BMSCs經(jīng)尾靜脈注射后可以到達(dá)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化形成期小鼠的肺組織并可成功實(shí)現(xiàn)在局部定植;2、外源性BMSCs在肺纖維化形成期單次給藥較單純?cè)炷=M的肺纖維化程度有減輕的趨勢(shì),但差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,因此目前尚不能說(shuō)明在肺纖維化形成期給予外源性BMSCs干預(yù)能治療肺纖維化;3、在肺纖維化形成期單次和多次給予外源性BMSCs的干預(yù)效果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,甚至多次給藥有加重肺纖維化的趨勢(shì)。關(guān)鍵詞:肺纖維化形成期;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;肺泡表面活性蛋白.C;水通道蛋白5。IllAbstractABSTRACTObjective:

7、Toresearchtheinterventioneffectoftransplantexogenousbonemarrow-derivedmesenchymalstemcells(BMSCs)onbleomycin.inducedadvancedpulmonaryfbrosis,alsodefinedaspulmonaryfibrosisformationinmice.Methods:BMSCswereharvestedwiththewholebonemarrowadherentcellsisolationandculturemethodfrommale6-8

8、week.oldICRm

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