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《骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)博萊霉素致小鼠肺纖維化形成期干預(yù)的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名(手寫(xiě)):越丑列簽字日期:o!汐,≥年6月/日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán),允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將
2、學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊(光盤(pán)版)電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表,并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位論文作者簽名(手寫(xiě)):趑國(guó)刊鋤引矧:琴繹簽字日期:J口,5年6月7日簽字日期:d口一年占月g日摘要目的:研究移植外源性骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)對(duì)博萊霉素致小鼠晚期肺纖維化即肺纖維化形成期的干預(yù)作用。方法:全骨髓貼壁細(xì)胞分離培
3、養(yǎng)法分離、培養(yǎng)雄性6.8周齡ICR小鼠BMSCs。本實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)4個(gè)分組,共160只實(shí)驗(yàn)小鼠,將這些小鼠隨機(jī)分為:陰性對(duì)照組(NC組),陽(yáng)性對(duì)照組(PC組),BMSCs干預(yù)組A(A組),BMSCs干預(yù)組B(B組)。NC組于經(jīng)鼻腔滴入50ulPBS作為陰性對(duì)照,PC組、A組、B組則按6ug/g的劑量經(jīng)鼻腔滴入50ul博萊霉素制成小鼠的肺纖維化模型,A組在造模后第14天經(jīng)尾靜脈注射外源性的BMSCslxl07/ml,200ul;B組在造模后第14天起隔日經(jīng)尾靜脈注射外源性的BMSCsl×107/ml,200ul。以上各組小鼠造模后28天統(tǒng)一稱重后處死,取小鼠全肺組織稱
4、重并留取部分肺組織行HE、MASSON染色及羥脯氨酸含量測(cè)定,用熒光定量PCR及免疫組化檢測(cè)肺組織中SP.C和AQP5表達(dá)情況;提取肺組織的DNA檢測(cè)雄鼠的性別決定基因(Sry基因1。結(jié)果:1、肺系數(shù):PC組及A、B組肺系數(shù)均較NC組高,PC組、A組、B組3組間無(wú)明顯差異。2、肺組織病理:PC組及A組、B組肺泡炎、肺纖維化程度均較NC組明顯加重;A組肺泡炎及纖維化較PC、B組稍減輕,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、HYP含量:PC組及A組、B組3組HYP含量均較NC組明顯升高,A組較PC組、B組有所減低,與B組間的差異較為明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,PC組、B組間無(wú)明顯差異。4
5、、Sry基因檢測(cè):A組、B組均有雄性小鼠的sry基因存在。5、肺組織SP.C蛋白的表達(dá):PC組、A組、B組中SP.C蛋白的表達(dá)均低于NC組,A組的表達(dá)高于PC組、B組,而PC組與B組間無(wú)明顯差異。6、肺組織AQP。5蛋白的表達(dá):PC組、A組、B組的SP.CmRNA表達(dá)均低于NC組,PC組、A組、B組3組間無(wú)明顯差異。7、肺組織SP.CmRNA表達(dá)情況:PC組、A組、B組3組中SP.CmRNA表達(dá)均低于NC組,A組的表達(dá)高于PC組、B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而PC組與B組問(wèn)無(wú)明顯差異。8、肺組織AQP5mRNA表達(dá)情況:PC組、A組、B組的AQP5mRNA表達(dá)均低于
6、NC組,3組間無(wú)明顯差異。摘要結(jié)論:1、外源性BMSCs經(jīng)尾靜脈注射后可以到達(dá)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化形成期小鼠的肺組織并可成功實(shí)現(xiàn)在局部定植;2、外源性BMSCs在肺纖維化形成期單次給藥較單純?cè)炷=M的肺纖維化程度有減輕的趨勢(shì),但差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,因此目前尚不能說(shuō)明在肺纖維化形成期給予外源性BMSCs干預(yù)能治療肺纖維化;3、在肺纖維化形成期單次和多次給予外源性BMSCs的干預(yù)效果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,甚至多次給藥有加重肺纖維化的趨勢(shì)。關(guān)鍵詞:肺纖維化形成期;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;肺泡表面活性蛋白.C;水通道蛋白5。IllAbstractABSTRACTObjective:
7、Toresearchtheinterventioneffectoftransplantexogenousbonemarrow-derivedmesenchymalstemcells(BMSCs)onbleomycin.inducedadvancedpulmonaryfbrosis,alsodefinedaspulmonaryfibrosisformationinmice.Methods:BMSCswereharvestedwiththewholebonemarrowadherentcellsisolationandculturemethodfrommale6-8
8、week.oldICRm