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《骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)博萊霉素致小鼠肺纖維化的影響與作用機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要摘要目的：通過(guò)觀察骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)對(duì)博來(lái)霉素致小鼠肺纖維化動(dòng)物模型的影響，探討治療肺纖維化的新方法。方法：體外分離、培養(yǎng)雄性6—8周C57BL／6J小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞。60只6-8周雌性C57BL／6J小鼠隨機(jī)分為3組：陰性對(duì)照組(P組)，陽(yáng)性對(duì)照組(B組)，BMSCs治療組(B硼組)。P組于氣管內(nèi)注入PBS50#L，B組及B+M組按5肛g／g劑量氣管內(nèi)注入博萊霉素50肚制備肺纖維化模型，B+M組于造模后6h經(jīng)尾靜脈注射BMSCs1×107／mL，200弘L。實(shí)驗(yàn)第3，7，14，28天分別處死5只小鼠，收集小鼠肺泡灌洗液檢測(cè)其細(xì)胞因子IFN—y、
2、IL-4的濃度；留取肺組織行病理HE染色，羥脯氨酸含量測(cè)定，提取肺組織RNA以檢測(cè)TGF-BlmRNA、IFN—YmRNA、IL-4mRNA基因表達(dá)情況；提取肺組織的DNA檢測(cè)雄鼠的性別決定基因(sry基因)。結(jié)果：1、肺組織病理：B+M組在第7、14天的肺泡炎較B組明顯減輕，第28天肺纖維化程度較B組明顯減輕。2、肺系數(shù)：B及B+M組各時(shí)間點(diǎn)肺系數(shù)均較P組稍高，但B+M組較B組明顯降低。3、HYP含量：在3、7天，三組的HYP含量無(wú)明顯差異；B+M組的HYP含量在第14天與P組相當(dāng)，在28天稍高于P組，但均明顯低于B組。4、TGF-13lmRNA：B及B+M組
3、各時(shí)間點(diǎn)TGF-BlmRNA表達(dá)均較P組高，但在后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組明顯低于B組。5、sry基因檢測(cè)：B+M組各時(shí)間點(diǎn)均有雄性小鼠的sry基因存在。6、肺組織IFN-YmRNA、IL一4mRNA表達(dá)情況：B及B+M組IFN—YmRNA、IL-4mRNA表達(dá)在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯高于P組，在后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組IFN-YmRNA較B組明顯偏低，在后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組IL一4mRNA較B組明顯偏低；比較IL-4mRNA／IFN—YmRNA，B+M組在后兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯低于B組。7、肺泡灌沈液中IFN-y、IL-4的濃度：B及B+M組IFN-Y、IL一4濃度在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高
4、于P組，但在后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)B+M組IFN-Y濃度較B組明顯偏低；且其IL一4濃度在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)均較B組明顯偏低；比較IL一4／IFN-Y濃度，B+M組在3，14，28天高于P組，在7、14、28天明顯低B組(7、14天：P(0．05；28天P=O．05)。結(jié)論：1、外源性BMSCs經(jīng)尾靜脈注射可以到達(dá)肺損傷部位，且可以長(zhǎng)期存在；2、外源性BMSCs可以減輕肺泡炎、肺纖維化的程度；3、外源性BMSCs發(fā)揮抗炎、抗纖維化的bj．能是通過(guò)逆轉(zhuǎn)Thl／Th2細(xì)胞因子的失衡實(shí)現(xiàn)的；4、外源性BMSCs摘要到達(dá)損傷肺后可能抑制TGF-13lmRNA的表達(dá)，從而抑$1JfF-維化
5、形成。關(guān)鍵詞：肺纖維化；骨髓fBJ充質(zhì)干細(xì)胞；羥脯氨酸；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子一13l(T(；F一131)；干擾素一Y；白介素一4；sry性別決定區(qū)ABSTRACTobjective：Toexploretheeffectsofbonemarrow-derivedmesenchymalstemcellsonbleomycin—inducedpulmonaryfibrosisinmiceandtostudythemechanismofitseffects．Methods：BonemarrowderivedBMSCswereharvestedfrommaleC57BI／6Jmi
6、ceinvitro，culturedintocultureflaskswithmediumandexpandedtothefourthpassagefortheexperiments．60C57BL／6Jmicewererandomlydividedinto3groupswith20ofeachgroup：negativecontrolgroup(GroupP)、positivecontrolgroup(GroupB)、mesenchymalstemcellstransplantinggroup(groupB+M)．GroupPwereinstilledwith
7、50I／xLPBSviatracheadiscission．GroupBandgroupB+Mweremadeaspulmonaryfibrosismodelsbyintratrachealinstillationofbleomycin(5#g／g，50#L)．After6hours，thesuspensionofBMSCswereinjectedintomiceviathetailveinofB+MgroupwithaconcentrationoflxlO7／mL，200u1．Fivemiceweresacrificedatdays3,7，14，28after
8、modelinginba
